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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-41300 | |||||||||||||||
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タイトル | Inner spoke ring of the yeast NPC | |||||||||||||||
マップデータ | c8 inner spoke ring recombined from multibody | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | nuclear pore complex / nucleocytoplasmic transport / nucleoporin / membrane protein / translocase / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 response to spindle checkpoint signaling / nuclear pore linkers / regulation of protein desumoylation / mRNA export from nucleus in response to heat stress / nuclear pore inner ring / protein localization to nuclear inner membrane / chromosome, subtelomeric region / transcription-dependent tethering of RNA polymerase II gene DNA at nuclear periphery / nuclear pore central transport channel / regulation of nucleocytoplasmic transport ...response to spindle checkpoint signaling / nuclear pore linkers / regulation of protein desumoylation / mRNA export from nucleus in response to heat stress / nuclear pore inner ring / protein localization to nuclear inner membrane / chromosome, subtelomeric region / transcription-dependent tethering of RNA polymerase II gene DNA at nuclear periphery / nuclear pore central transport channel / regulation of nucleocytoplasmic transport / nuclear pore organization / nuclear pore complex assembly / telomere tethering at nuclear periphery / post-transcriptional tethering of RNA polymerase II gene DNA at nuclear periphery / nuclear pore cytoplasmic filaments / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / Regulation of HSF1-mediated heat shock response / nuclear pore nuclear basket / tRNA export from nucleus / SUMOylation of SUMOylation proteins / protein localization to kinetochore / SUMOylation of RNA binding proteins / structural constituent of nuclear pore / SUMOylation of chromatin organization proteins / RNA export from nucleus / nucleocytoplasmic transport / poly(A)+ mRNA export from nucleus / nuclear localization sequence binding / regulation of mitotic nuclear division / NLS-bearing protein import into nucleus / ribosomal large subunit export from nucleus / mRNA transport / nuclear pore / ribosomal small subunit export from nucleus / nuclear periphery / chromosome segregation / promoter-specific chromatin binding / molecular condensate scaffold activity / heterochromatin formation / phospholipid binding / protein import into nucleus / protein transport / nuclear envelope / single-stranded DNA binding / nuclear membrane / amyloid fibril formation / cell division / chromatin binding / protein-containing complex binding / positive regulation of DNA-templated transcription / DNA binding / RNA binding / identical protein binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.6 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Akey CW / Echeverria I / Ouch C / Fernandez-Martinez J / Rout MP | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023 タイトル: Implications of a multiscale structure of the yeast nuclear pore complex. 著者: Christopher W Akey / Ignacia Echeverria / Christna Ouch / Ilona Nudelman / Yi Shi / Junjie Wang / Brian T Chait / Andrej Sali / Javier Fernandez-Martinez / Michael P Rout / 要旨: Nuclear pore complexes (NPCs) direct the nucleocytoplasmic transport of macromolecules. Here, we provide a composite multiscale structure of the yeast NPC, based on improved 3D density maps from ...Nuclear pore complexes (NPCs) direct the nucleocytoplasmic transport of macromolecules. Here, we provide a composite multiscale structure of the yeast NPC, based on improved 3D density maps from cryogenic electron microscopy and AlphaFold2 models. Key features of the inner and outer rings were integrated into a comprehensive model. We resolved flexible connectors that tie together the core scaffold, along with equatorial transmembrane complexes and a lumenal ring that anchor this channel within the pore membrane. The organization of the nuclear double outer ring reveals an architecture that may be shared with ancestral NPCs. Additional connections between the core scaffold and the central transporter suggest that under certain conditions, a degree of local organization is present at the periphery of the transport machinery. These connectors may couple conformational changes in the scaffold to the central transporter to modulate transport. Collectively, this analysis provides insights into assembly, transport, and NPC evolution. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_41300.map.gz | 15.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-41300-v30.xml emd-41300.xml | 46.8 KB 46.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_41300_fsc.xml | 21.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_41300.png | 205.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-41300.cif.gz | 13.7 KB | ||
その他 | emd_41300_additional_1.map.gz emd_41300_additional_2.map.gz emd_41300_additional_3.map.gz emd_41300_half_map_1.map.gz emd_41300_half_map_2.map.gz | 51.2 MB 51.2 MB 2.4 MB 27 MB 27.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-41300 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-41300 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_41300_validation.pdf.gz | 587.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_41300_full_validation.pdf.gz | 587.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_41300_validation.xml.gz | 24.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_41300_validation.cif.gz | 32.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-41300 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-41300 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8tj5MC 8t9lC 8tieC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_41300.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | c8 inner spoke ring recombined from multibody | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.66 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: spoke multibody half map
ファイル | emd_41300_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | spoke multibody half map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: spoke multibody half map
ファイル | emd_41300_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | spoke multibody half map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: c2 spoke map aligned within c8 ring and aligned with pdb
ファイル | emd_41300_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | c2 spoke map aligned within c8 ring and aligned with pdb | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map of c8 spoke inner ring
ファイル | emd_41300_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map of c8 spoke inner ring | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map of c8 spoke inner ring
ファイル | emd_41300_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map of c8 spoke inner ring | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Nuclear Pore Complex
+超分子 #1: Nuclear Pore Complex
+分子 #1: Spoke connector
+分子 #2: Nucleoporin NUP170
+分子 #3: Nucleoporin NUP157
+分子 #4: Nucleoporin NSP1
+分子 #5: Nucleoporin NUP57
+分子 #6: Nucleoporin NUP49/NSP49
+分子 #7: Nucleoporin NUP192
+分子 #8: Nucleoporin NUP188
+分子 #9: Nucleoporin NIC96
+分子 #10: Nucleoporin NUP53
+分子 #11: Nucleoporin 59
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20mM HEPES,50mM Potassium acetate,20mM NaCl,2mM MgCl2,1mM DTT |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
詳細 | One step affinity purified |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
詳細 | Preliminary grid screening done manually with individual images of low magnification montages of candidate meshes. |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-40 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4015 / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 / 詳細: 3218 images retained after triage |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 倍率(補正後): 37651 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: Other / Chain - Initial model type: experimental model / 詳細: none |
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詳細 | Rigid body docking of 3D map of Nucleoporins in the spoke complex with Chimera followed by flexible fitting and rebuilding in Coot. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | PDB-8tj5: |