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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3985 | |||||||||
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タイトル | PilQ from Thermus thermophilus | |||||||||
マップデータ | None | |||||||||
試料 |
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生物種 | Thermus thermophilus HB27 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 20.4 Å | |||||||||
データ登録者 | D'Imprima E / Vonck J / Sanchez R | |||||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2017 タイトル: Cryo-EM structure of the bifunctional secretin complex of . 著者: Edoardo D'Imprima / Ralf Salzer / Ramachandra M Bhaskara / Ricardo Sánchez / Ilona Rose / Lennart Kirchner / Gerhard Hummer / Werner Kühlbrandt / Janet Vonck / Beate Averhoff / 要旨: Secretins form multimeric channels across the outer membrane of Gram-negative bacteria that mediate the import or export of substrates and/or extrusion of type IV pili. The secretin complex of is an ...Secretins form multimeric channels across the outer membrane of Gram-negative bacteria that mediate the import or export of substrates and/or extrusion of type IV pili. The secretin complex of is an oligomer of the 757-residue PilQ protein, essential for DNA uptake and pilus extrusion. Here, we present the cryo-EM structure of this bifunctional complex at a resolution of ~7 Å using a new reconstruction protocol. Thirteen protomers form a large periplasmic domain of six stacked rings and a secretin domain in the outer membrane. A homology model of the PilQ protein was fitted into the cryo-EM map. A crown-like structure outside the outer membrane capping the secretin was found not to be part of PilQ. Mutations in the secretin domain disrupted the crown and abolished DNA uptake, suggesting a central role of the crown in natural transformation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3985.map.gz | 11.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3985-v30.xml emd-3985.xml | 12.1 KB 12.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3985.png | 38.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3985 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3985 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3985_validation.pdf.gz | 203.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3985_full_validation.pdf.gz | 202.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3985_validation.xml.gz | 6.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3985 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3985 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3985.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 129.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.63 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : PilQ complex with 13-fold symmetry
全体 | 名称: PilQ complex with 13-fold symmetry |
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要素 |
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-超分子 #1: PilQ complex with 13-fold symmetry
超分子 | 名称: PilQ complex with 13-fold symmetry / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Thermus thermophilus HB27 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-分子 #1: PilQ
分子 | 名称: PilQ / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Thermus thermophilus HB27 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MKSAWIRAAV IALAGLGAFA LAGSFPEEPR FQAPVNLKVS ESQVKAGQTL PLDVVLEALA RSVGLQPLI YRAYDPSGDP ATAQPPLPNV KLDFQGKPFR EVWDLLFATY GNQYSLDYLF L PPDVVVVA PTQVITALVD APSRTGAMER RPYIVGVPEI AYKRTETDAQ ...文字列: MKSAWIRAAV IALAGLGAFA LAGSFPEEPR FQAPVNLKVS ESQVKAGQTL PLDVVLEALA RSVGLQPLI YRAYDPSGDP ATAQPPLPNV KLDFQGKPFR EVWDLLFATY GNQYSLDYLF L PPDVVVVA PTQVITALVD APSRTGAMER RPYIVGVPEI AYKRTETDAQ GQPRTVVNIE GA KAWVQND LLPFLSREAA GLNVNWIVVE EGGRLKAVLS VLATPEQHAR FSDILQRAGI DFR PLPALA QPKPRVEKTY TLTYATFPDL LAFLQSRLPE AQIGVVPTNP QRAIVLATEE DHAR LSELL KTADVPKTVR RVYTLQNLTF AEAQERLKPL LEKDLKGARL ESLPGNPKAL LLEAP EAEH ALFAEILKAL DVPPQAPQAP QEATLRRLYP LHYANAEQVA PFLAREVPGI VVQTVP GQP LLSVRGTEAQ LREVESLLAQ IDRPPEQGPP VFQRAYQLSN AKAVELAQVL QEALKAR QA QNQGQQNQAP PTREATVVAD PRTNTLIVTG TQEDLALVEG LIPKLDQPVP QVNLRVRI Q EVQSNLTRSL GLKWNSIAGG NVAASILDSG LSLIFDSTRS LAALNIMATL DALQQQGLS RALRDVNQTV LNNQTARLQS GETFFIRRVV NDQVERVPFD VGLIVEVTPQ ITADGQILLN IKAEVSGNV QRNPVDGDVD RFTKQVVTTT LRVKDGETVV LGGLTSQESN QSQQGVPLLM D IPLIGELF KQRTNESTDK ELLVVITADI LKEAASANP |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 70 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blotting for 8-10 seconds. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FSC |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: In-column Omega Filter エネルギーフィルター - エネルギー下限: 18 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 18 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-45 / 平均露光時間: 9.0 sec. / 平均電子線量: 33.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 30675 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 4.2 mm / 倍率(公称値): 20000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: JEOL / ホルダー冷却材: NITROGEN |