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- EMDB-39800: cryo-EM map of RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-39800
タイトルcryo-EM map of RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosome at a resolution of 3.23 angstrom
マップデータ3.23 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c-NCP complex
試料
  • 複合体: RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes
キーワードnucleosome / RNF168 / H2AK13/15 / UbcH5c-Ub / NUCLEAR PROTEIN
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.23 Å
データ登録者Ai HS / Tong ZB / Deng ZH / Tian CL / Liu L / Pan M
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
National Natural Science Foundation of China (NSFC) 中国
引用ジャーナル: Nat Chem Biol / 年: 2025
タイトル: Mechanism of nucleosomal H2A K13/15 monoubiquitination and adjacent dual monoubiquitination by RNF168.
著者: Huasong Ai / Zebin Tong / Zhiheng Deng / Qiang Shi / Shixian Tao / Gaoge Sun / Jiawei Liang / Maoshen Sun / Xiangwei Wu / Qingyun Zheng / Lujun Liang / Hang Yin / Jia-Bin Li / Shuai Gao / ...著者: Huasong Ai / Zebin Tong / Zhiheng Deng / Qiang Shi / Shixian Tao / Gaoge Sun / Jiawei Liang / Maoshen Sun / Xiangwei Wu / Qingyun Zheng / Lujun Liang / Hang Yin / Jia-Bin Li / Shuai Gao / Changlin Tian / Lei Liu / Man Pan /
要旨: The DNA damage repair regulatory protein RNF168, a monomeric RING-type E3 ligase, has a crucial role in regulating cell fate and DNA repair by specific and efficient ubiquitination of the adjacent ...The DNA damage repair regulatory protein RNF168, a monomeric RING-type E3 ligase, has a crucial role in regulating cell fate and DNA repair by specific and efficient ubiquitination of the adjacent K13 and K15 (K13/15) sites at the H2A N-terminal tail. However, understanding how RNF168 coordinates with its cognate E2 enzyme UbcH5c to site-specifically ubiquitinate H2A K13/15 has long been hampered by the lack of high-resolution structures of RNF168 and UbcH5c~Ub (ubiquitin) in complex with nucleosomes. Here we developed chemical strategies and determined the cryo-electron microscopy structures of the RNF168-UbcH5c~Ub-nucleosome complex captured in transient H2A K13/15 monoubiquitination and adjacent dual monoubiquitination reactions, providing a 'helix-anchoring' mode for monomeric E3 ligase RNF168 on nucleosome in contrast to the 'compass-binding' mode of dimeric E3 ligases. Our work not only provides structural snapshots of H2A K13/15 site-specific monoubiquitination and adjacent dual monoubiquitination but also offers a near-atomic-resolution structural framework for understanding pathogenic amino acid substitutions and physiological modifications of RNF168.
履歴
登録2024年4月19日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年8月7日-
マップ公開2024年8月7日-
更新2025年5月14日-
現状2025年5月14日処理サイト: PDBc / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_39800.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_39800.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈3.23 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c-NCP complex
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.87 Å/pix.
x 256 pix.
= 222.643 Å		0.87 Å/pix.
x 256 pix.
= 222.643 Å		0.87 Å/pix.
x 256 pix.
= 222.643 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.8697 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.007
最小 - 最大-0.012658969 - 0.03501457
平均 (標準偏差)0.00024639812 (±0.0016500234)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 222.6432 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: 4.54 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c complex

ファイルemd_39800_additional_1.map
注釈4.54 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c complex
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: 3.59 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c-Ub-NCP complex

ファイルemd_39800_additional_2.map
注釈3.59 angstrom cryo-EM map of RNF168(1-193)-Ubc5c-Ub-NCP complex
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_39800_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_39800_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes

全体名称: RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes
要素
  • 複合体: RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes

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超分子 #1: RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes

超分子名称: RNF168(1-193) in complex with Ubc5c-Ub conjugated nucleosomes
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 2.066 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正タイプ: NONE
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.23 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 81043
初期 角度割当タイプ: RANDOM ASSIGNMENT
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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