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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | DmDcr-2 with slm2 in intial binding state | |||||||||
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![]() | RNAi / Dcr-2 / Loqs-PD / esiRNA / Cryo-EM / STRUCTURAL PROTEIN/RNA / STRUCTURAL PROTEIN-RNA complex | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.14 Å | |||||||||
![]() | Cao N / Su S / Wang J / Ma J / Wang H-W | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis of endo-siRNA processing by Drosophila Dicer-2 and Loqs-PD. 著者: Na Cao / Jia Wang / Ting Deng / Boming Fan / Shichen Su / Jinbiao Ma / Hong-Wei Wang / ![]() 要旨: Endogenous small interfering RNAs (endo-siRNAs or esiRNAs) originate from either elongated endogenous transcripts capable of forming complex fold-back structures or from double-stranded regions ...Endogenous small interfering RNAs (endo-siRNAs or esiRNAs) originate from either elongated endogenous transcripts capable of forming complex fold-back structures or from double-stranded regions generated through intermolecular base pairing of convergently transcribed mRNAs. The mechanism of maturation and functionality of esiRNAs exhibit significant variation across diverse species. In Drosophila melanogaster, esiRNAs reside in both somatic and germline cells, where they serve as post-transcriptional modulators for specific target RNAs. Their maturation process critically relies on Dicer-2 (Dcr-2), with the assistance of its cofactor Loqs-PD. In this study, we have successfully elucidated the cryo-EM structures of Dcr-2/Loqs-PD complex bound to esiRNA precursors (pre-esiRNAs) in various states. Our structural and biochemical results reveal that ATP is essential for the cleavage of esiRNAs by the Dcr-2/Loqs-PD complex, a process analogous to the cleavage of double-stranded RNA (dsRNA). When Loqs-PD is present, pre-esiRNAs are preferentially loaded onto the Helicase domain of Dcr-2. Moreover, as the Helicase domain exhibits a preference for binding to the rigid end of double-stranded RNA, Dcr-2 tends to cleave pre-esiRNA from the small closed loop end, rather than the loose and flexible open end. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 25.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 16.5 KB 16.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 56 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 48.8 MB 48.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 667.3 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 666.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 12 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 14 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_39321_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_39321_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : DmDcr-2/LoqsPD/slm2 in initial binding state
全体 | 名称: DmDcr-2/LoqsPD/slm2 in initial binding state |
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要素 |
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-超分子 #1: DmDcr-2/LoqsPD/slm2 in initial binding state
超分子 | 名称: DmDcr-2/LoqsPD/slm2 in initial binding state / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 200 KDa |
-分子 #1: Dicer-2
分子 | 名称: Dicer-2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: EDVEIKPRGY QLRLVDHLTK SNGIVYLPTG SGKTFVAILV LKRFSQDFDK PIESGGKRAL FMCNTVELAR QQAMAVRRCT NFKVGFYVG EQGVDDWTRG MWSDEIKKNQ VLVGTAQVFL DMVTQTYVAL SSLSVVIIDE CHHGTGHHPF REFMRLFTIA N QTKLPRVV ...文字列: EDVEIKPRGY QLRLVDHLTK SNGIVYLPTG SGKTFVAILV LKRFSQDFDK PIESGGKRAL FMCNTVELAR QQAMAVRRCT NFKVGFYVG EQGVDDWTRG MWSDEIKKNQ VLVGTAQVFL DMVTQTYVAL SSLSVVIIDE CHHGTGHHPF REFMRLFTIA N QTKLPRVV GLTGVLIKGN EITNVATKLK ELEITYRGNI ITVSDTKEME NVMLYATKPT EVMVSFPHQE QVLTVTRLIS AE IEKFYVS LDLMNIGVQP IRRSKSLQCL RDPSKKSFVK QLFNDFLYQM KEYGIYAASI AIISLIVEFD IKRRQAETLS VKL MHRTAL TLCEKIRHLL VQKLQDMTYD DDDDNVNTEE VIMNFSTPKV QRFLMSLKVS FADKDPKDIC CLVFVERRYT CKCI YGLLL NYIQSTPELR NVLTPQFMVG RNNISPDFES VLERKWQKSA IQQFRDGNAN LMICSSVLEE GIDVQACNHV FILDP VKTF NMYVQSKGRA RTTEAKFVLF TADKEREKTI QQIYQYRKAH NDIAEYLKDR VLEKTEPELY EIKGHFQDDI DPFTNE NGA VLLPNNALAI LHRYCQTIPT DAFGFVIPWF HVLQEDERDR IFGVSAKGKH VISINMPVNC MLRDTIYSDP MDNVKTA KI SAAFKACKVL YSLGELNERF VPKTLKERVA SIADVHFEHW NKYGDSVTAT VNKADKSKDR TYKTECPLEF YDALPRVG E ICYAYEIFLE PQFESCEYTE HMYLNLQTPR NYAILLRNKL PRLAEMPLFS NQGKLHVRVA NAPLEVIIQN SEQLELLHQ FHGMVFRDIL KIWHPFFVLD RRSKENSYLV VPLILGAGEQ KCFDWELMTN FRRLPQSHGS NVQQREQQPA PRPEDFEGKI VTQWYANYD KPMLVTKVHR ELTPLSYMEK NQQDKTYYEF TMSKYGNRIG DVVHKDKFMI EVRDLTEQLT FYVHNRGKFN A KSKAKMKV ILIPELCFNF NFPGDLWLKL IFLPSILNRM YFLLHAEALR KRFNTYLNLH LLPFNGTDYM PRPLEIDYSL KR NVDPLGN VIPTEDIEEP KSLLEPMPTK SIEASVANLE ITEFENPWQK YMEPVDLSRN LLSTYPVELD YYYHFSVGNV CEM NEMDFE DKEYWAKNQF HMPTGNIYGN RTPAKTNANV PALMPSKPTV RGKVKPLLIL QKTVSKEHIT PAEQGEFLAA ITAS SAADV FDMERLEILG NSFLKLSATL YLASKYSDWN EGTLTEVKSK LVSNRNLLFC LIDADIPKTL NTIQFTPRYT WLPPG ISLP HNVLALWREN PEFAKIIGPH NLRDLALGDE ESLVKGNCSD INYNRFVEGC RANGQSFYAG ADFSSEVNFC VGLVTI PNK VIADTLEALL GVIVKNYGLQ HAFKMLEYFK ICRADIDKPL TQLLNLELGG KKMRANVNTT EIDGFLINHY YLEKNLG YT FKDRRYLLQA LTHPSYPTNR ITGSYQELEF IGNAILDFLI SAYIFENNTK MNPGALTDLR SALVNNTTLA CICVRHRL H FFILAENAKL SEIISKFVNF QESQGHRVTN YVRILLEEAD VQPTPLDLDD ELDMTELPHA NKCISQEAEK GVPPKGEFN MSTNVDVPKA LGDVLEALIA AVYLDCRDLQ RTWEVIFNLF EPELQEFTRK VPINHIRQLV EHKHAKPVFS SPIVEGETVM VSCQFTCME KTIKVYGFGS NKDQAKLSAA KHALQQLSKC DA |
-分子 #2: slm2
分子 | 名称: slm2 / タイプ: rna / ID: 2 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: GGUUCGCUCC CGGCGCUUCA CAGGCGCUGG AAAAUCUUAA CCGCCGGAAG UCACUUCCGC UGGCUUUGAU UUUCCAGCGU CUGUCGAGCG GAAGGAGGGA CCUU |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOCONTINUUM (6k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.14 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 52187 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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