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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3724 | |||||||||
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タイトル | The structure of the COPI coat linkage IV | |||||||||
![]() | The structure of the COPI coat linkage IV | |||||||||
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機能・相同性 | ![]() cerebellar Purkinje cell layer maturation / protein localization to cell leading edge / Synthesis of PIPs at the plasma membrane / protein localization to axon / VxPx cargo-targeting to cilium / Intra-Golgi traffic / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / trans-Golgi Network Vesicle Budding / Golgi localization / COPI-coated vesicle ...cerebellar Purkinje cell layer maturation / protein localization to cell leading edge / Synthesis of PIPs at the plasma membrane / protein localization to axon / VxPx cargo-targeting to cilium / Intra-Golgi traffic / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / trans-Golgi Network Vesicle Budding / Golgi localization / COPI-coated vesicle / pancreatic juice secretion / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / COPI-mediated anterograde transport / COPI-mediated anterograde transport / COPI vesicle coat / Golgi vesicle transport / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / organelle transport along microtubule / intra-Golgi vesicle-mediated transport / Golgi to plasma membrane transport / establishment of Golgi localization / retrograde vesicle-mediated transport, Golgi to endoplasmic reticulum / ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / ![]() | |||||||||
![]() | Dodonova SO / Aderhold P | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: 9Å structure of the COPI coat reveals that the Arf1 GTPase occupies two contrasting molecular environments. 著者: Svetlana O Dodonova / Patrick Aderhold / Juergen Kopp / Iva Ganeva / Simone Röhling / Wim J H Hagen / Irmgard Sinning / Felix Wieland / John A G Briggs / ![]() ![]() 要旨: COPI coated vesicles mediate trafficking within the Golgi apparatus and between the Golgi and the endoplasmic reticulum. Assembly of a COPI coated vesicle is initiated by the small GTPase Arf1 that ...COPI coated vesicles mediate trafficking within the Golgi apparatus and between the Golgi and the endoplasmic reticulum. Assembly of a COPI coated vesicle is initiated by the small GTPase Arf1 that recruits the coatomer complex to the membrane, triggering polymerization and budding. The vesicle uncoats before fusion with a target membrane. Coat components are structurally conserved between COPI and clathrin/adaptor proteins. Using cryo-electron tomography and subtomogram averaging, we determined the structure of the COPI coat assembled on membranes in vitro at 9 Å resolution. We also obtained a 2.57 Å resolution crystal structure of βδ-COP. By combining these structures we built a molecular model of the coat. We additionally determined the coat structure in the presence of ArfGAP proteins that regulate coat dissociation. We found that Arf1 occupies contrasting molecular environments within the coat, leading us to hypothesize that some Arf1 molecules may regulate vesicle assembly while others regulate coat disassembly. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 33.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 27.9 KB 27.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 8.1 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 127.2 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 10.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 5nzvMC ![]() 3720C ![]() 3721C ![]() 3722C ![]() 3723C ![]() 5mu7C ![]() 5nzrC ![]() 5nzsC ![]() 5nztC ![]() 5nzuC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ |
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リンク
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | The structure of the COPI coat linkage IV | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.78 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : The structure of the COPI coat leaf
+超分子 #1: The structure of the COPI coat leaf
+超分子 #2: COPI coat complex
+超分子 #3: ADP-ribosylation factor 1
+分子 #1: Coatomer subunit alpha
+分子 #2: Coatomer subunit epsilon
+分子 #3: Coatomer subunit beta
+分子 #4: Coatomer subunit beta'
+分子 #5: Coatomer subunit delta
+分子 #6: ADP-ribosylation factor 1
+分子 #7: Coatomer subunit gamma-1
+分子 #8: Coatomer subunit zeta-1
-実験情報
-構造解析
手法 | ![]() |
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![]() | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | 3D array |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: Protein-A conjugated 10 nm gold was added to the reaction mix in 1:6 volume ratio before plunge-freezing | ||||||||||||
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グリッド | モデル: C-flat / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: Protochips C-flat MultiHole 20 mA | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 85 % / チャンバー内温度: 296 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: The sample was applied onto glow-discharged (30 sec, 20 mA) C-flat (Protochips Inc.) multihole grids. The grids were blotted from the back side for 11 seconds at room temperature in a chamber ...詳細: The sample was applied onto glow-discharged (30 sec, 20 mA) C-flat (Protochips Inc.) multihole grids. The grids were blotted from the back side for 11 seconds at room temperature in a chamber at 85% humidity and plunge-frozen into liquid ethane using a manual plunger.. | ||||||||||||
詳細 | COPI-coated vesicles were produced in vitro by incubating coatomer, Arf1, GTPgS, ARNO and GUVs in a total volume of 40 ul for 30 minutes at 37C |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD![]() |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
詳細 | Tomographic tilt series were acquired with the dose-symmetric tilt-scheme (Hagen et al., J Struct Biol. 2017) |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-5 / 撮影したグリッド数: 1 / 平均電子線量: 2.0 e/Å2 詳細: Each of the images in the tilt series was low-pass filtered according to the electron-dose acquired by the sample (Grant and Grigorieff, 2015). |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
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得られたモデル | ![]() PDB-5nzv: |