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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-36997 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the products-bound PGAP1(Bst1)-S327A from Chaetonium thermophilum | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Bst1 / Glycosylphosphatidylinositol / GPI anchoring / GPI-AP / GPI-AP remodelase / Integral membrane enzyme / Lipase / Lipid remodeling / Membrane enzyme / Membrane protein / Nanodisc / PGAP1 / TGP / Thermostable green fluorescence protein / Transmembrane enzyme / Triad enzyme. | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of lipopolysaccharide-mediated signaling pathway / negative regulation of complement activation / regulation of complement-dependent cytotoxicity / regulation of complement activation / respiratory burst / positive regulation of CD4-positive, alpha-beta T cell activation / positive regulation of CD4-positive, alpha-beta T cell proliferation / Class B/2 (Secretin family receptors) / hydrolase activity, acting on ester bonds / ficolin-1-rich granule membrane ...regulation of lipopolysaccharide-mediated signaling pathway / negative regulation of complement activation / regulation of complement-dependent cytotoxicity / regulation of complement activation / respiratory burst / positive regulation of CD4-positive, alpha-beta T cell activation / positive regulation of CD4-positive, alpha-beta T cell proliferation / Class B/2 (Secretin family receptors) / hydrolase activity, acting on ester bonds / ficolin-1-rich granule membrane / COPI-mediated anterograde transport / complement activation, classical pathway / side of membrane / transport vesicle / endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment membrane / bioluminescence / secretory granule membrane / generation of precursor metabolites and energy / Regulation of Complement cascade / positive regulation of T cell cytokine production / protein transport / virus receptor activity / positive regulation of cytosolic calcium ion concentration / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / membrane raft / Golgi membrane / innate immune response / lipid binding / Neutrophil degranulation / endoplasmic reticulum membrane / cell surface / extracellular exosome / extracellular region / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Chaetomium thermophilum (strain DSM 1495 / CBS 144.50 / IMI 039719) (菌類) / Psychromonas sp. B3M02 (バクテリア) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.66 Å | |||||||||
データ登録者 | Li T / Hong J / Qu Q / Li D | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Molecular basis of the inositol deacylase PGAP1 involved in quality control of GPI-AP biogenesis. 著者: Jingjing Hong / Tingting Li / Yulin Chao / Yidan Xu / Zhini Zhu / Zixuan Zhou / Weijie Gu / Qianhui Qu / Dianfan Li / 要旨: The secretion and quality control of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins (GPI-APs) necessitates post-attachment remodeling initiated by the evolutionarily conserved PGAP1, which deacylates ...The secretion and quality control of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins (GPI-APs) necessitates post-attachment remodeling initiated by the evolutionarily conserved PGAP1, which deacylates the inositol in nascent GPI-APs. Impairment of PGAP1 activity leads to developmental diseases in humans and fatality and infertility in animals. Here, we present three PGAP1 structures (2.66-2.84 Å), revealing its 10-transmembrane architecture and product-enzyme interaction details. PGAP1 holds GPI-AP acyl chains in an optimally organized, guitar-shaped cavity with apparent energetic penalties from hydrophobic-hydrophilic mismatches. However, abundant glycan-mediated interactions in the lumen counterbalance these repulsions, likely conferring substrate fidelity and preventing off-target hydrolysis of bulk membrane lipids. Structural and biochemical analyses uncover a serine hydrolase-type catalysis with atypical features and imply mechanisms for substrate entrance and product release involving a drawing compass movement of GPI-APs. Our findings advance the mechanistic understanding of GPI-AP remodeling. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_36997.map.gz | 70.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-36997-v30.xml emd-36997.xml | 23.4 KB 23.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_36997_fsc.xml | 8.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_36997.png | 72.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-36997.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_36997_additional_1.map.gz emd_36997_half_map_1.map.gz emd_36997_half_map_2.map.gz | 37.9 MB 69.7 MB 69.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-36997 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-36997 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_36997_validation.pdf.gz | 991.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_36997_full_validation.pdf.gz | 991.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_36997_validation.xml.gz | 17.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_36997_validation.cif.gz | 21.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-36997 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-36997 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_36997.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 75.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.932 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_36997_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_36997_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_36997_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Complex of PGAP1 with a chimera GPI-anchored protein
+超分子 #1: Complex of PGAP1 with a chimera GPI-anchored protein
+分子 #1: GPI inositol-deacylase,MCherry protein
+分子 #2: Green fluorescent protein,Complement decay-accelerating factor
+分子 #3: PALMITIC ACID
+分子 #4: alpha-D-mannopyranose
+分子 #5: 2-azanylethyl [(2~{S},3~{S},4~{S},5~{S},6~{R})-6-(hydroxymethyl)-...
+分子 #6: 2-amino-2-deoxy-alpha-D-glucopyranose
+分子 #7: [(2~{R})-1-octadecoxy-3-[oxidanyl-[(2~{R},3~{R},5~{S},6~{R})-2,3,...
+分子 #8: CHOLESTEROL
+分子 #9: 2-azanylethyl [(2R,3S,4S,5S,6S)-3,4,5,6-tetrakis(oxidanyl)oxan-2-...
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 14.9 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 50 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.026000000000000002 kPa | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |