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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | An apo TRiC map | |||||||||
![]() | A sharpened map of apo TRiC | |||||||||
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生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.11 Å | |||||||||
![]() | Park JS / Roh SH | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural visualization of the tubulin folding pathway directed by human chaperonin TRiC/CCT. 著者: Daniel Gestaut / Yanyan Zhao / Junsun Park / Boxue Ma / Alexander Leitner / Miranda Collier / Grigore Pintilie / Soung-Hun Roh / Wah Chiu / Judith Frydman / ![]() ![]() ![]() 要旨: The ATP-dependent ring-shaped chaperonin TRiC/CCT is essential for cellular proteostasis. To uncover why some eukaryotic proteins can only fold with TRiC assistance, we reconstituted the folding of ...The ATP-dependent ring-shaped chaperonin TRiC/CCT is essential for cellular proteostasis. To uncover why some eukaryotic proteins can only fold with TRiC assistance, we reconstituted the folding of β-tubulin using human prefoldin and TRiC. We find unstructured β-tubulin is delivered by prefoldin to the open TRiC chamber followed by ATP-dependent chamber closure. Cryo-EM resolves four near-atomic-resolution structures containing progressively folded β-tubulin intermediates within the closed TRiC chamber, culminating in native tubulin. This substrate folding pathway appears closely guided by site-specific interactions with conserved regions in the TRiC chamber. Initial electrostatic interactions between the TRiC interior wall and both the folded tubulin N domain and its C-terminal E-hook tail establish the native substrate topology, thus enabling C-domain folding. Intrinsically disordered CCT C termini within the chamber promote subsequent folding of tubulin's core and middle domains and GTP-binding. Thus, TRiC's chamber provides chemical and topological directives that shape the folding landscape of its obligate substrates. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 117.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 25 KB 25 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.1 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 111.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 115.6 MB 115.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | A sharpened map of apo TRiC | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: A half map of apo TRiC
ファイル | emd_32822_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | A half map of apo TRiC | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: A half map of apo TRiC
ファイル | emd_32822_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | A half map of apo TRiC | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Apo TRiC/CCT
全体 | 名称: Apo TRiC/CCT |
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要素 |
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-超分子 #1: Apo TRiC/CCT
超分子 | 名称: Apo TRiC/CCT / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-分子 #1: CCT subunit 1
分子 | 名称: CCT subunit 1 / タイプ: other / ID: 1 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MEGPLSVFGD RSTGETIRSQ NVMAAASIAN IVKSSLGPVG LDKMLVDDIG DVTITNDGAT ILKLLEVEH PAAKVLCELA DLQDKEVGDG TTSVVIIAAE LLKNADELVK QKIHPTSVIS G YRLACKEA VRYINENLIV NTDELGRDCL INAAKTSMSS KIIGINGDFF ...文字列: MEGPLSVFGD RSTGETIRSQ NVMAAASIAN IVKSSLGPVG LDKMLVDDIG DVTITNDGAT ILKLLEVEH PAAKVLCELA DLQDKEVGDG TTSVVIIAAE LLKNADELVK QKIHPTSVIS G YRLACKEA VRYINENLIV NTDELGRDCL INAAKTSMSS KIIGINGDFF ANMVVDAVLA IK YTDIRGQ PRYPVNSVNI LKAHGRSQME SMLISGYALN CVVGSQGMPK RIVNAKIACL DFS LQKTKM KLGVQVVITD PEKLDQIRQR ESDITKERIQ KILATGANVI LTTGGIDDMC LKYF VEAGA MAVRRVLKRD LKRIAKASGA TILSTLANLE GEETFEAAML GQAEEVVQER ICDDE LILI KNTKARTSAS IILRGANDFM CDEMERSLHD ALCVVKRVLE SKSVVPGGGA VEAALS IYL ENYATSMGSR EQLAIAEFAR SLLVIPNTLA VNAAQDSTDL VAKLRAFHNE AQVNPER KN LKWIGLDLSN GKPRDNKQAG VFEPTIVKVK SLKFATEAAI TILRIDDLIK LHPESKDD K HGSYEDAVHS GALND |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #2: CCT subunit 2
分子 | 名称: CCT subunit 2 / タイプ: other / ID: 2 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MASLSLAPVN IFKAGADEER AETARLTSFI GAIAIGDLVK STLGPKGMDK ILLSSGRDAS LMVTNDGAT ILKNIGVDNP AAKVLVDMSR VQDDEVGDGT TSVTVLAAEL LREAESLIAK K IHPQTIIA GWREATKAAR EALLSSAVDH GSDEVKFRQD LMNIAGTTLS ...文字列: MASLSLAPVN IFKAGADEER AETARLTSFI GAIAIGDLVK STLGPKGMDK ILLSSGRDAS LMVTNDGAT ILKNIGVDNP AAKVLVDMSR VQDDEVGDGT TSVTVLAAEL LREAESLIAK K IHPQTIIA GWREATKAAR EALLSSAVDH GSDEVKFRQD LMNIAGTTLS SKLLTHHKDH FT KLAVEAV LRLKGSGNLE AIHIIKKLGG SLADSYLDEG FLLDKKIGVN QPKRIENAKI LIA NTGMDT DKIKIFGSRV RVDSTAKVAE IEHAEKEKMK EKVERILKHG INCFINRQLI YNYP EQLFG AAGVMAIEHA DFAGVERLAL VTGGEIASTF DHPELVKLGS CKLIEEVMIG EDKLI HFSG VALGEACTIV LRGATQQILD EAERSLHDAL CVLAQTVKDS RTVYGGGCSE MLMAHA VTQ LANRTPGKEA VAMESYAKAL RMLPTIIADN AGYDSADLVA QLRAAHSEGN TTAGLDM RE GTIGDMAILG ITESFQVKRQ VLLSAAEAAE VILRVDNIIK AAPRKRVPDH HPC |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #3: CCT subunit 3
分子 | 名称: CCT subunit 3 / タイプ: other / ID: 3 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MMGHRPVLVL SQNTKRESGR KVQSGNINAA KTIADIIRTC LGPKSMMKML LDPMGGIVMT NDGNAILRE IQVQHPAAKS MIEISRTQDE EVGDGTTSVI ILAGEMLSVA EHFLEQQMHP T VVISAYRK ALDDMISTLK KISIPVDISD SDMMLNIINS SITTKAISRW ...文字列: MMGHRPVLVL SQNTKRESGR KVQSGNINAA KTIADIIRTC LGPKSMMKML LDPMGGIVMT NDGNAILRE IQVQHPAAKS MIEISRTQDE EVGDGTTSVI ILAGEMLSVA EHFLEQQMHP T VVISAYRK ALDDMISTLK KISIPVDISD SDMMLNIINS SITTKAISRW SSLACNIALD AV KMVQFEE NGRKEIDIKK YARVEKIPGG IIEDSCVLRG VMINKDVTHP RMRRYIKNPR IVL LDSSLE YKKGESQTDI EITREEDFTR ILQMEEEYIQ QLCEDIIQLK PDVVITEKGI SDLA QHYLM RANITAIRRV RKTDNNRIAR ACGARIVSRP EELREDDVGT GAGLLEIKKI GDEYF TFIT DCKDPKACTI LLRGASKEIL SEVERNLQDA MQVCRNVLLD PQLVPGGGAS EMAVAH ALT EKSKAMTGVE QWPYRAVAQA LEVIPRTLIQ NCGASTIRLL TSLRAKHTQE NCETWGV NG ETGTLVDMKE LGIWEPLAVK LQTYKTAVET AVLLLRIDDI VSGHKKKGDD QSRQGGAP D AGQE |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #4: CCT subunit 4
分子 | 名称: CCT subunit 4 / タイプ: other / ID: 4 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MPENVAPRSG ATAGAAGGRG KGAYQDRDKP AQIRFSNISA AKAVADAIRT SLGPKGMDKM IQDGKGDVT ITNDGATILK QMQVLHPAAR MLVELSKAQD IEAGDGTTSV VIIAGSLLDS C TKLLQKGI HPTIISESFQ KALEKGIEIL TDMSRPVELS DRETLLNSAT ...文字列: MPENVAPRSG ATAGAAGGRG KGAYQDRDKP AQIRFSNISA AKAVADAIRT SLGPKGMDKM IQDGKGDVT ITNDGATILK QMQVLHPAAR MLVELSKAQD IEAGDGTTSV VIIAGSLLDS C TKLLQKGI HPTIISESFQ KALEKGIEIL TDMSRPVELS DRETLLNSAT TSLNSKVVSQ YS SLLSPMS VNAVMKVIDP ATATSVDLRD IKIVKKLGGT IDDCELVEGL VLTQKVSNSG ITR VEKAKI GLIQFCLSAP KTDMDNQIVV SDYAQMDRVL REERAYILNL VKQIKKTGCN VLLI QKSIL RDALSDLALH FLNKMKIMVI KDIEREDIEF ICKTIGTKPV AHIDQFTADM LGSAE LAEE VNLNGSGKLL KITGCASPGK TVTIVVRGSN KLVIEEAERS IHDALCVIRC LVKKRA LIA GGGAPEIELA LRLTEYSRTL SGMESYCVRA FADAMEVIPS TLAENAGLNP ISTVTEL RN RHAQGEKTAG INVRKGGISN ILEELVVQPL LVSVSALTLA TETVRSILKI DDVVNTR |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #5: CCT subunit 5
分子 | 名称: CCT subunit 5 / タイプ: other / ID: 5 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MASMGTLAFD EYGRPFLIIK DQDRKSRLMG LEALKSHIMA AKAVANTMRT SLGPNGLDKM MVDKDGDVT VTNDGATILS MMDVDHQIAK LMVELSKSQD DEIGDGTTGV VVLAGALLEE A EQLLDRGI HPIRIADGYE QAARVAIEHL DKISDSVLVD IKDTEPLIQT ...文字列: MASMGTLAFD EYGRPFLIIK DQDRKSRLMG LEALKSHIMA AKAVANTMRT SLGPNGLDKM MVDKDGDVT VTNDGATILS MMDVDHQIAK LMVELSKSQD DEIGDGTTGV VVLAGALLEE A EQLLDRGI HPIRIADGYE QAARVAIEHL DKISDSVLVD IKDTEPLIQT AKTTLGSKVV NS CHRQMAE IAVNAVLTVA DMERRDVDFE LIKVEGKVGG RLEDTKLIKG VIVDKDFSHP QMP KKVEDA KIAILTCPFE PPKPKTKHKL DVTSVEDYKA LQKYEKEKFE EMIQQIKETG ANLA ICQWG FDDEANHLLL QNNLPAVRWV GGPEIELIAI ATGGRIVPRF SELTAEKLGF AGLVQ EISF GTTKDKMLVI EQCKNSRAVT IFIRGGNKMI IEEAKRSLHD ALCVIRNLIR DNRVVY GGG AAEISCALAV SQEADKCPTL EQYAMRAFAD ALEVIPMALS ENSGMNPIQT MTEVRAR QV KEMNPALGID CLHKGTNDMK QQHVIETLIG KKQQISLATQ MVRMILKIDD IRKPGESEE |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #6: CCT subunit 6
分子 | 名称: CCT subunit 6 / タイプ: other / ID: 6 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MAAVKTLNPK AEVARAQAAL AVNISAARGL QDVLRTNLGP KGTMKMLVSG AGDIKLTKDG NVLLHEMQI QHPTASLIAK VATAQDDITG DGTTSNVLII GELLKQADLY ISEGLHPRII T EGFEAAKE KALQFLEEVK VSREMDRETL IDVARTSLRT KVHAELADVL ...文字列: MAAVKTLNPK AEVARAQAAL AVNISAARGL QDVLRTNLGP KGTMKMLVSG AGDIKLTKDG NVLLHEMQI QHPTASLIAK VATAQDDITG DGTTSNVLII GELLKQADLY ISEGLHPRII T EGFEAAKE KALQFLEEVK VSREMDRETL IDVARTSLRT KVHAELADVL TEAVVDSILA IK KQDEPID LFMIEIMEMK HKSETDTSLI RGLVLDHGAR HPDMKKRVED AYILTCNVSL EYE KTEVNS GFFYKSAEER EKLVKAERKF IEDRVKKIIE LKRKVCGDSD KGFVVINQKG IDPF SLDAL SKEGIVALRR AKRRNMERLT LACGGVALNS FDDLSPDCLG HAGLVYEYTL GEEKF TFIE KCNNPRSVTL LIKGPNKHTL TQIKDAVRDG LRAVKNAIDD GCVVPGAGAV EVAMAE ALI KHKPSVKGRA QLGVQAFADA LLIIPKVLAQ NSGFDLQETL VKIQAEHSES GQLVGVD LN TGEPMVAAEV GVWDNYCVKK QLLHSCTVIA TNILLVDEIM RAGMSFLKG |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #7: CCT subunit 7
分子 | 名称: CCT subunit 7 / タイプ: other / ID: 7 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MMPTPVILLK EGTDSSQGIP QLVSNISACQ VIAEAVRTTL GPRGMDKLIV DGRGKATISN DGATILKLL DVVHPAAKTL VDIAKSQDAE VGDGTTSVTL LAAEFLKQVK PYVEEGLHPQ I IIRAFRTA TQLAVNKIKE IAVTVKKADK VEQRKLLEKC AMTALSSKLI ...文字列: MMPTPVILLK EGTDSSQGIP QLVSNISACQ VIAEAVRTTL GPRGMDKLIV DGRGKATISN DGATILKLL DVVHPAAKTL VDIAKSQDAE VGDGTTSVTL LAAEFLKQVK PYVEEGLHPQ I IIRAFRTA TQLAVNKIKE IAVTVKKADK VEQRKLLEKC AMTALSSKLI SQQKAFFAKM VV DAVMMLD DLLQLKMIGI KKVQGGALED SQLVAGVAFK KTFSYAGFEM QPKKYHNPKI ALL NVELEL KAEKDNAEIR VHTVEDYQAI VDAEWNILYD KLEKIHHSGA KVVLSKLPIG DVAT QYFAD RDMFCAGRVP EEDLKRTMMA CGGSIQTSVN ALSADVLGRC QVFEETQIGG ERYNF FTGC PKAKTCTFIL RGGAEQFMEE TERSLHDAIM IVRRAIKNDS VVAGGGAIEM ELSKYL RDY SRTIPGKQQL LIGAYAKALE IIPRQLCDNA GFDATNILNK LRARHAQGGS HHHHHHG SG TWYGVDINNE DIADNFEAFV WEPAMVRINA LTAASEAACL IVSVDETIKN PRSTVDAP T AAGRGRGRGR PH |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #8: CCT subunit 8
分子 | 名称: CCT subunit 8 / タイプ: other / ID: 8 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MALHVPKAPG FAQMLKEGAK HFSGLEEAVY RNIQACKELA QTTRTAYGPN GMNKMVINHL EKLFVTNDA ATILRELEVQ HPAAKMIVMA SHMQEQEVGD GTNFVLVFAG ALLELAEELL R IGLSVSEV IEGYEIACRK AHEILPNLVC CSAKNLRDID EVSSLLRTSI ...文字列: MALHVPKAPG FAQMLKEGAK HFSGLEEAVY RNIQACKELA QTTRTAYGPN GMNKMVINHL EKLFVTNDA ATILRELEVQ HPAAKMIVMA SHMQEQEVGD GTNFVLVFAG ALLELAEELL R IGLSVSEV IEGYEIACRK AHEILPNLVC CSAKNLRDID EVSSLLRTSI MSKQYGNEVF LA KLIAQAC VSIFPDSGHF NVDNIRVCKI LGSGISSSSV LHGMVFKKET EGDVTSVKDA KIA VYSCPF DGMITETKGT VLIKTAEELM NFSKGEENLM DAQVKAIADT GANVVVTGGK VADM ALHYA NKYNIMLVRL NSKWDLRRLC KTVGATALPR LTPPVLEEMG HCDSVYLSEV GDTQV VVFK HEKEDGAIST IVLRGSTDNL MDDIERAVDD GVNTFKVLTR DKRLVPGGGA TEIELA KQI TSYGETCPGL EQYAIKKFAE AFEAIPRALA ENSGVKANEV ISKLYAVHQE GNKNVGL DI EAEVPAVKDM LEAGILDTYL GKYWAIKLAT NAAVTVLRVD QIIMAKPAGG PKPPSGKK D WDDDQN |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | 3D array |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 実像数: 6084 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
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