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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-31485 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Spx-dependent transcription activation complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 nucleoid / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / response to antibiotic / DNA-templated transcription ...nucleoid / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / response to antibiotic / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Bacillus subtilis (枯草菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Lin W / Feng Y / Shi J | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2021 タイトル: Structural basis of transcription activation by the global regulator Spx. 著者: Jing Shi / Fangfang Li / Aijia Wen / Libing Yu / Lu Wang / Fulin Wang / Yuanling Jin / Sha Jin / Yu Feng / Wei Lin / 要旨: Spx is a global transcriptional regulator in Gram-positive bacteria and has been inferred to efficiently activate transcription upon oxidative stress by engaging RNA polymerase (RNAP) and promoter ...Spx is a global transcriptional regulator in Gram-positive bacteria and has been inferred to efficiently activate transcription upon oxidative stress by engaging RNA polymerase (RNAP) and promoter DNA. However, the precise mechanism by which it interacts with RNAP and promoter DNA to initiate transcription remains obscure. Here, we report the cryo-EM structure of an intact Spx-dependent transcription activation complex (Spx-TAC) from Bacillus subtilis at 4.2 Å resolution. The structure traps Spx in an active conformation and defines key interactions accounting for Spx-dependent transcription activation. Strikingly, an oxidized Spx monomer engages RNAP by simultaneously interacting with the C-terminal domain of RNAP alpha subunit (αCTD) and σA. The interface between Spx and αCTD is distinct from those previously reported activators, indicating αCTD as a multiple target for the interaction between RNAP and various transcription activators. Notably, Spx specifically wraps the conserved -44 element of promoter DNA, thereby stabilizing Spx-TAC. Besides, Spx interacts extensively with σA through three different interfaces and promotes Spx-dependent transcription activation. Together, our structural and biochemical results provide a novel mechanistic framework for the regulation of bacterial transcription activation and shed new light on the physiological roles of the global Spx-family transcription factors. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_31485.map.gz | 28.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-31485-v30.xml emd-31485.xml | 22.8 KB 22.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_31485.png | 81.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31485 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31485 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_31485_validation.pdf.gz | 485.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_31485_full_validation.pdf.gz | 484.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_31485_validation.xml.gz | 5.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_31485_validation.cif.gz | 6.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31485 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31485 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_31485.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.307 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Bacillus subtilis Spx dependent transcription activation complex
+超分子 #1: Bacillus subtilis Spx dependent transcription activation complex
+超分子 #2: Spx-dependent transcription activation complex
+超分子 #3: DNA
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase sigma factor SigA
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerase subunit epsilon
+分子 #7: transcriptional regulator Spx
+分子 #10: DNA-directed RNA polymerase subunit delta
+分子 #8: trxA promoter DNA-Non template strand
+分子 #9: trxA promoter DNA-template strand
+分子 #11: MAGNESIUM ION
+分子 #12: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 59.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 153870 |
初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION |