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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3135 | |||||||||
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タイトル | Electron cryo-microscopy of an immune pore | |||||||||
![]() | Reconstruction of the barrel of the membrane attack complex | |||||||||
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![]() | cryo-EM / single particles / membrane protein | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.3 Å | |||||||||
![]() | Serna M / Bubeck D | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural basis of complement membrane attack complex formation. 著者: Marina Serna / Joanna L Giles / B Paul Morgan / Doryen Bubeck / ![]() 要旨: In response to complement activation, the membrane attack complex (MAC) assembles from fluid-phase proteins to form pores in lipid bilayers. MAC directly lyses pathogens by a 'multi-hit' mechanism; ...In response to complement activation, the membrane attack complex (MAC) assembles from fluid-phase proteins to form pores in lipid bilayers. MAC directly lyses pathogens by a 'multi-hit' mechanism; however, sublytic MAC pores on host cells activate signalling pathways. Previous studies have described the structures of individual MAC components and subcomplexes; however, the molecular details of its assembly and mechanism of action remain unresolved. Here we report the electron cryo-microscopy structure of human MAC at subnanometre resolution. Structural analyses define the stoichiometry of the complete pore and identify a network of interaction interfaces that determine its assembly mechanism. MAC adopts a 'split-washer' configuration, in contrast to the predicted closed ring observed for perforin and cholesterol-dependent cytolysins. Assembly precursors partially penetrate the lipid bilayer, resulting in an irregular β-barrel pore. Our results demonstrate how differences in symmetric and asymmetric components of the MAC underpin a molecular basis for pore formation and suggest a mechanism of action that extends beyond membrane penetration. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 20.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 12.6 KB 12.6 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 409.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of the barrel of the membrane attack complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Membrane attack complex
全体 | 名称: Membrane attack complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: Membrane attack complex
超分子 | 名称: Membrane attack complex / タイプ: sample / ID: 1000 詳細: Protein complex was assembled on liposomes and detergent solubilized Number unique components: 7 |
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分子量 | 理論値: 1.8 MDa |
-分子 #1: C5
分子 | 名称: C5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 190 KDa |
-分子 #2: C6
分子 | 名称: C6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 120 KDa |
-分子 #3: C7
分子 | 名称: C7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 110 KDa |
-分子 #4: C8 alpha
分子 | 名称: C8 alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 152 KDa |
-分子 #5: C8 beta
分子 | 名称: C8 beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 152 KDa |
-分子 #6: C8 gamma
分子 | 名称: C8 gamma / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 152 KDa |
-分子 #7: C9
分子 | 名称: C9 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 18 / 集合状態: eighteen-mer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 69 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 20 mM HEPES, 150 mM NaCl |
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グリッド | 詳細: 300 mesh quatifol R1.2/1.3 grids with thin carbon film |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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日付 | 2015年7月2日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 14.0 µm / 実像数: 622 / 平均電子線量: 45 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.00 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | Masked refinement |
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CTF補正 | 詳細: CTFFIND3, phase flip on each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.3 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION, EMAN2 / 使用した粒子像数: 25343 |