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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-30885 | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM map of Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 in complex with human antibody 1C19 Fab at 37 deg C | ||||||||||||
マップデータ | CryoEM map of DENV2 strain PVP94/07 in complex with Fab 1C19 at 37 deg C | ||||||||||||
試料 |
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生物種 | Dengue virus 2 (デング熱ウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 23.0 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Fibriansah G / Ng TS / Kostyuchenko VA / Shi J / Lok SM | ||||||||||||
資金援助 | シンガポール, 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2021 タイトル: Antibody affinity versus dengue morphology influences neutralization. 著者: Guntur Fibriansah / Elisa X Y Lim / Jan K Marzinek / Thiam-Seng Ng / Joanne L Tan / Roland G Huber / Xin-Ni Lim / Valerie S Y Chew / Victor A Kostyuchenko / Jian Shi / Ganesh S Anand / Peter ...著者: Guntur Fibriansah / Elisa X Y Lim / Jan K Marzinek / Thiam-Seng Ng / Joanne L Tan / Roland G Huber / Xin-Ni Lim / Valerie S Y Chew / Victor A Kostyuchenko / Jian Shi / Ganesh S Anand / Peter J Bond / James E Crowe / Shee-Mei Lok / 要旨: Different strains within a dengue serotype (DENV1-4) can have smooth, or "bumpy" surface morphologies with different antigenic characteristics at average body temperature (37°C). We determined the ...Different strains within a dengue serotype (DENV1-4) can have smooth, or "bumpy" surface morphologies with different antigenic characteristics at average body temperature (37°C). We determined the neutralizing properties of a serotype cross-reactive human monoclonal antibody (HMAb) 1C19 for strains with differing morphologies within the DENV1 and DENV2 serotypes. We mapped the 1C19 epitope to E protein domain II by hydrogen deuterium exchange mass spectrometry, cryoEM and molecular dynamics simulations, revealing that this epitope is likely partially hidden on the virus surface. We showed the antibody has high affinity for binding to recombinant DENV1 E proteins compared to those of DENV2, consistent with its strong neutralizing activities for all DENV1 strains tested regardless of their morphologies. This finding suggests that the antibody could out-compete E-to-E interaction for binding to its epitope. In contrast, for DENV2, HMAb 1C19 can only neutralize when the epitope becomes exposed on the bumpy-surfaced particle. Although HMAb 1C19 is not a suitable therapeutic candidate, this study with HMAb 1C19 shows the importance of choosing a high-affinity antibody that could neutralize diverse dengue virus morphologies for therapeutic purposes. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_30885.map.gz | 215.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-30885-v30.xml emd-30885.xml | 15 KB 15 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_30885.png | 191 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-30885 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-30885 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_30885_validation.pdf.gz | 329.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_30885_full_validation.pdf.gz | 328.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_30885_validation.xml.gz | 8.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-30885 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-30885 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_30885.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | CryoEM map of DENV2 strain PVP94/07 in complex with Fab 1C19 at 37 deg C | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.71 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 in complex with human ant...
全体 | 名称: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 in complex with human antibody 1C19 Fab |
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要素 |
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-超分子 #1: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 in complex with human ant...
超分子 | 名称: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 in complex with human antibody 1C19 Fab タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 was grown in Aedes albopictus C6/36 cells. |
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由来(天然) | 生物種: Dengue virus 2 (デング熱ウイルス) / 株: PVP94/07 |
-超分子 #2: Dengue virus 2
超分子 | 名称: Dengue virus 2 / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 / 詳細: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-超分子 #3: human antibody 1C19 Fab
超分子 | 名称: human antibody 1C19 Fab / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3-#4 / 詳細: antibody |
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-分子 #1: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 envelope protein
分子 | 名称: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 envelope protein タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Dengue virus 2 (デング熱ウイルス) / 株: PVP94/07 |
配列 | 文字列: MRCIGISNRD FVEGVSGGSW VDIVLEHGSC VTTMAKNKPT LDFELIKTEA KHPATLRKYC VEAKLTNTTT ASRCPTQGEP SLNEEQDKRF VCKHSMVDRG WGNGCGLFGK GGIVTCAMFT CKKNMEGKVV QPENLEYTIV ITPHSGEENA VGNDTGKHGK EIKVTPQSSI ...文字列: MRCIGISNRD FVEGVSGGSW VDIVLEHGSC VTTMAKNKPT LDFELIKTEA KHPATLRKYC VEAKLTNTTT ASRCPTQGEP SLNEEQDKRF VCKHSMVDRG WGNGCGLFGK GGIVTCAMFT CKKNMEGKVV QPENLEYTIV ITPHSGEENA VGNDTGKHGK EIKVTPQSSI TEAELTGYGT VTMECSPRTG LDFNEMVLLQ MENKAWLVHR QWFLDLPLPW LPGADTQGSN WIQKETLVTF KNPHAKKQDV VVLGSQEGAM HTALTGATEI QMSSGNLLFT GHLKCRLRMD KLQLKGMSYS MCTGKFKVVK EIAETQHGTI VIRVQYEGDG SPCKIPFEIM DLEKRHVLGR LITVNPIVTE KDSPVNIEAE PPFGDSYIII GVEPGQLKLS WFKKGSSIGQ MFETTMRGAK RMAILGDTAW DFGSLGGVFT SIGKALHQVF GAIYGAAFSG VSWTMKILIG VVITWIGMNS RSTSLSVSLV LVGVVTLYLG VMVQA |
-分子 #2: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 membrane protein
分子 | 名称: Dengue virus serotype 2 strain PVP94/07 membrane protein タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Dengue virus 2 (デング熱ウイルス) / 株: PVP94/07 |
配列 | 文字列: SVALVPHVGM GLETRTETWM SSEGAWKHAQ RIETWILRHP GFTIMAAILA YTIGTTYFQR VLIFILLTAV TP |
-分子 #3: Anti-dengue virus human monoclonal antibody 1C19 Fab heavy chain
分子 | 名称: Anti-dengue virus human monoclonal antibody 1C19 Fab heavy chain タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFIFS NYGMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSDKRY ADSVRGRFT ISRDNSKNTL FLQVTSLRAE DTAVYYCAKE LSGYDPGFEY WGQGTPVTVS S |
-分子 #4: Anti-dengue virus human monoclonal antibody 1C19 Fab light chain
分子 | 名称: Anti-dengue virus human monoclonal antibody 1C19 Fab light chain タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: DIQMTQSPST LSASVGDRVT ITCRASQSIN TWLAWYQQKP GKAPKLLIYK ASSLESGVPS RFSGSGSGT EFTLTISSLQ PDDFATYYCQ QYESYATFGQ GTKVDIK |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 詳細: NTE buffer (12 mM Tris-HCl pH 8.0, 120 mM NaCl and 1 mM EDTA) |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | The purified virus was incubated with Fab 1C19 at 37 deg C for 30 min with a molar ratio of one Fab for every E-protein and followed by incubation at 4 deg C for 2 h. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 18.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |