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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-30637 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the activated spliceosome (Bact complex) at an atomic resolution of 2.5 angstrom | |||||||||
マップデータ | overall EM map of the yeast activated spliceosome (Bact complex) at the average resolution of 2.5 angstrom | |||||||||
試料 |
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キーワード | RNA splicing / spliceosome / Bact complex / Prp2 / Spp2 / ATPase/helicase / activation / SPLICING | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 maintenance of RNA location / RES complex / snoRNA splicing / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / Prp19 complex / ATP-dependent activity, acting on RNA / U2-type catalytic step 1 spliceosome ...maintenance of RNA location / RES complex / snoRNA splicing / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / Prp19 complex / ATP-dependent activity, acting on RNA / U2-type catalytic step 1 spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / pre-mRNA binding / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / spliceosomal complex assembly / regulation of RNA splicing / mRNA 5'-splice site recognition / ATPase activator activity / U5 snRNA binding / U5 snRNP / mRNA export from nucleus / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / RNA splicing / helicase activity / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA processing / nucleic acid binding / RNA helicase activity / RNA helicase / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Bai R / Wan R | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2021 タイトル: Mechanism of spliceosome remodeling by the ATPase/helicase Prp2 and its coactivator Spp2. 著者: Rui Bai / Ruixue Wan / Chuangye Yan / Qi Jia / Jianlin Lei / Yigong Shi / 要旨: Spliceosome remodeling, executed by conserved adenosine triphosphatase (ATPase)/helicases including Prp2, enables precursor messenger RNA (pre-mRNA) splicing. However, the structural basis for the ...Spliceosome remodeling, executed by conserved adenosine triphosphatase (ATPase)/helicases including Prp2, enables precursor messenger RNA (pre-mRNA) splicing. However, the structural basis for the function of the ATPase/helicases remains poorly understood. Here, we report atomic structures of Prp2 in isolation, Prp2 complexed with its coactivator Spp2, and Prp2-loaded activated spliceosome and the results of structure-guided biochemical analysis. Prp2 weakly associates with the spliceosome and cannot function without Spp2, which stably associates with Prp2 and anchors on the spliceosome, thus tethering Prp2 to the activated spliceosome and allowing Prp2 to function. Pre-mRNA is loaded into a featured channel between the N and C halves of Prp2, where Leu from the N half and Arg from the C half prevent backward sliding of pre-mRNA toward its 5'-end. Adenosine 5'-triphosphate binding and hydrolysis trigger interdomain movement in Prp2, which drives unidirectional stepwise translocation of pre-mRNA toward its 3'-end. These conserved mechanisms explain the coupling of spliceosome remodeling to pre-mRNA splicing. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_30637.map.gz | 226.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-30637-v30.xml emd-30637.xml | 73.6 KB 73.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_30637.png | 103 KB | ||
Filedesc metadata | emd-30637.cif.gz | 20.4 KB | ||
その他 | emd_30637_additional_1.map.gz | 221.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-30637 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-30637 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_30637_validation.pdf.gz | 613.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_30637_full_validation.pdf.gz | 613 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_30637_validation.xml.gz | 6.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_30637_validation.cif.gz | 7.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-30637 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-30637 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_30637.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | overall EM map of the yeast activated spliceosome (Bact complex) at the average resolution of 2.5 angstrom | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: EM map of Prp2 region in the Bact complex
ファイル | emd_30637_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | EM map of Prp2 region in the Bact complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : the activated spliceosome Bact complex
+超分子 #1: the activated spliceosome Bact complex
+分子 #1: PRP8 isoform 1
+分子 #3: SNU114 isoform 1
+分子 #4: BRR2 isoform 1
+分子 #5: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #6: BJ4_G0014900.mRNA.1.CDS.1
+分子 #7: SMD1 isoform 1
+分子 #8: BJ4_G0037700.mRNA.1.CDS.1
+分子 #9: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #10: Sm protein F
+分子 #11: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #15: HLJ1_G0053790.mRNA.1.CDS.1
+分子 #16: BJ4_G0027490.mRNA.1.CDS.1
+分子 #17: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #18: PRP9 isoform 1
+分子 #19: Pre-mRNA-splicing factor PRP21
+分子 #20: PRP11 isoform 1
+分子 #21: HSH155 isoform 1
+分子 #22: HLJ1_G0043010.mRNA.1.CDS.1
+分子 #23: RSE1 isoform 1
+分子 #24: HSH49 isoform 1
+分子 #25: BJ4_G0056610.mRNA.1.CDS.1
+分子 #26: RDS3 complex subunit 10
+分子 #27: Pre-mRNA-splicing factor CEF1
+分子 #28: Pre-mRNA-processing factor 19
+分子 #29: SNT309 isoform 1
+分子 #30: BUD31 isoform 1
+分子 #31: HLJ1_G0054350.mRNA.1.CDS.1
+分子 #32: Pre-mRNA-processing protein 45
+分子 #33: Pre-mRNA-splicing factor SLT11
+分子 #34: Pre-mRNA-splicing factor CWC2
+分子 #35: Pre-mRNA-splicing factor CWC15
+分子 #36: Pre-mRNA leakage protein 1
+分子 #37: SX2_G0027210.mRNA.1.CDS.1
+分子 #38: Pre-mRNA-splicing factor CWC26
+分子 #39: CDC40 isoform 1
+分子 #40: Pre-mRNA-splicing factor CWC21
+分子 #41: CWC22 isoform 1
+分子 #42: Pre-mRNA-splicing factor CWC24
+分子 #43: CWC27 isoform 1
+分子 #44: Pre-mRNA-splicing factor SPP2
+分子 #45: CLF1 isoform 1
+分子 #46: SYF1 isoform 1
+分子 #47: Pre-mRNA-splicing factor ATP-dependent RNA helicase-like protein PRP2
+分子 #2: U5 snRNA
+分子 #12: U6 snRNA
+分子 #13: pre-mRNA
+分子 #14: U2 snRNA
+分子 #48: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #49: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #50: MAGNESIUM ION
+分子 #51: CALCIUM ION
+分子 #52: ZINC ION
+分子 #53: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 |
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グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: GOLD / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: GRAPHENE / 支持フィルム - #0 - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - #2 - Film type ID: 3 / 支持フィルム - #2 - トポロジー: HOLEY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 705371 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |