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- EMDB-29885: CLC-ec1 R230C/L249C/C85A at pH 4.5 100mM Cl Turn -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-29885
タイトルCLC-ec1 R230C/L249C/C85A at pH 4.5 100mM Cl Turn
マップデータ
試料
  • 細胞: Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl
    • タンパク質・ペプチド: H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA
  • リガンド: CHLORIDE ION
キーワードCLC-ec1 / ecCLC / eriC / CLC transporter / chloride proton antiporter / TRANSPORT PROTEIN
機能・相同性Chloride channel, ClcA / Chloride channel, voltage gated / Chloride channel, core / Voltage gated chloride channel / voltage-gated chloride channel activity / antiporter activity / plasma membrane / H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA
機能・相同性情報
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å
データ登録者Fortea E / Lee S / Argyos Y / Chadda R / Ciftci D / Huysmans G / Robertson JL / Boudker O / Accardi A
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01 GM128420 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2024
タイトル: Structural basis of pH-dependent activation in a CLC transporter.
著者: Eva Fortea / Sangyun Lee / Rahul Chadda / Yiorgos Argyros / Priyanka Sandal / Robyn Mahoney-Kruszka / Hatice Didar Ciftci / Maria E Falzone / Gerard Huysmans / Janice L Robertson / Olga ...著者: Eva Fortea / Sangyun Lee / Rahul Chadda / Yiorgos Argyros / Priyanka Sandal / Robyn Mahoney-Kruszka / Hatice Didar Ciftci / Maria E Falzone / Gerard Huysmans / Janice L Robertson / Olga Boudker / Alessio Accardi /
要旨: CLCs are dimeric chloride channels and anion/proton exchangers that regulate processes such as muscle contraction and endo-lysosome acidification. Common gating controls their activity; its closure ...CLCs are dimeric chloride channels and anion/proton exchangers that regulate processes such as muscle contraction and endo-lysosome acidification. Common gating controls their activity; its closure simultaneously silences both protomers, and its opening allows them to independently transport ions. Mutations affecting common gating in human CLCs cause dominant genetic disorders. The structural rearrangements underlying common gating are unknown. Here, using single-particle cryo-electron microscopy, we show that the prototypical Escherichia coli CLC-ec1 undergoes large-scale rearrangements in activating conditions. The slow, pH-dependent remodeling of the dimer interface leads to the concerted opening of the intracellular H pathways and is required for transport. The more frequent formation of short water wires in the open H pathway enables Cl pore openings. Mutations at disease-causing sites favor CLC-ec1 activation and accelerate common gate opening in the human CLC-7 exchanger. We suggest that the pH activation mechanism of CLC-ec1 is related to the common gating of CLC-7.
履歴
登録2023年2月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年2月7日-
マップ公開2024年2月7日-
更新2024年10月16日-
現状2024年10月16日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_29885.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_29885.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.83 Å/pix.
x 256 pix.
= 211.2 Å		0.83 Å/pix.
x 256 pix.
= 211.2 Å		0.83 Å/pix.
x 256 pix.
= 211.2 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.825 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.4
最小 - 最大-2.6387243 - 3.708055
平均 (標準偏差)0.004840137 (±0.09022804)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 211.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_29885_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_29885_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl

全体名称: Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl
要素
  • 細胞: Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl
    • タンパク質・ペプチド: H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA
  • リガンド: CHLORIDE ION

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超分子 #1: Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl

超分子名称: Structure of ecCLC-R230C/L249C/C85A mutant at pH 4.5 in 100mM Cl
タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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分子 #1: H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA

分子名称: H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 49.118027 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKTDTPSLET PQAARLRRRQ LIRQLLERDK TPLAILFMAA VVGTLVGLAA VAFDKGVAWL QNQRMGALVH TADNYPLLLT VAFLASAVL AMFGYFLVRK YAPEAGGSGI PEIEGALEDQ RPVRWWRVLP VKFFGGLGTL GGGMVLGREG PTVQIGGNIG R MVLDIFRL ...文字列:
MKTDTPSLET PQAARLRRRQ LIRQLLERDK TPLAILFMAA VVGTLVGLAA VAFDKGVAWL QNQRMGALVH TADNYPLLLT VAFLASAVL AMFGYFLVRK YAPEAGGSGI PEIEGALEDQ RPVRWWRVLP VKFFGGLGTL GGGMVLGREG PTVQIGGNIG R MVLDIFRL KGDEARHTLL ATGAAAGLAA AFNAPLAGIL FIIEEMRPQF RYTLISIKAV FIGVIMSTIM YCIFNHEVAL ID VGKLSDA PCNTLWLYLI LGIIFGIFGP IFNKWVLGMQ DLLHRVHGGN ITKWVLMGGA IGGLCGLLGF VAPATSGGGF NLI PIATAG NFSMGMLVFI FVARVITTLL CFSSGAPGGI FAPMLALGTV LGTAFGMVAV ELFPQYHLEA GTFAIAGMGA LLAA SIRAP LTGIILVLEM TDNYQLILPM IITGLGATLL AQFTGGKPLY SAILARTLAK QEAEQL

UniProtKB: H(+)/Cl(-) exchange transporter ClcA

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分子 #2: CHLORIDE ION

分子名称: CHLORIDE ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 4 / 式: CL
分子量理論値: 35.453 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 4.5
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 56.11 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm
最小 デフォーカス（公称値）: 0.7000000000000001 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 235275
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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