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- EMDB-29441: C11 symmetry applied MS-ring -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-29441
タイトルC11 symmetry applied MS-ring
マップデータ
試料
  • 複合体: MS-ring of the flagellar complex
キーワードflagellar / 11-fold / ring-building motif / MS-ring / FliF / MOTOR PROTEIN / membrane spanning helices
生物種Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (サルモネラ菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å
データ登録者Singh PS / Nakagawa T / Cecchini G / Iverson TM
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/John E. Fogarty International Center (NIH/FIC)GM61606 米国
引用ジャーナル: PLoS One / 年: 2023
タイトル: CryoEM structure of a post-assembly MS-ring reveals plasticity in stoichiometry and conformation.
著者: Prashant K Singh / Gary Cecchini / Terunaga Nakagawa / T M Iverson /
要旨: The flagellar motor supports bacterial chemotaxis, a process that allows bacteria to move in response to their environment. A central feature of this motor is the MS-ring, which is composed entirely ...The flagellar motor supports bacterial chemotaxis, a process that allows bacteria to move in response to their environment. A central feature of this motor is the MS-ring, which is composed entirely of repeats of the FliF subunit. This MS-ring is critical for the assembly and stability of the flagellar switch and the entire flagellum. Despite multiple independent cryoEM structures of the MS-ring, there remains a debate about the stoichiometry and organization of the ring-building motifs (RBMs). Here, we report the cryoEM structure of a Salmonella MS-ring that was purified from the assembled flagellar switch complex (MSC-ring). We term this the 'post-assembly' state. Using 2D class averages, we show that under these conditions, the post-assembly MS-ring can contain 32, 33, or 34 FliF subunits, with 33 being the most common. RBM3 has a single location with C32, C33, or C34 symmetry. RBM2 is found in two locations with RBM2inner having C21 or C22 symmetry and an RBM2outer-RBM1 having C11 symmetry. Comparison to previously reported structures identifies several differences. Most strikingly, we find that the membrane domain forms 11 regions of discrete density at the base of the structure rather than a contiguous ring, although density could not be unambiguously interpreted. We further find density in some previously unresolved areas, and we assigned amino acids to those regions. Finally, we find differences in interdomain angles in RBM3 that affect the diameter of the ring. Together, these investigations support a model of the flagellum with structural plasticity, which may be important for flagellar assembly and function.
履歴
登録2023年1月12日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年5月31日-
マップ公開2023年5月31日-
更新2023年5月31日-
現状2023年5月31日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_29441.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_29441.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.36 Å/pix.
x 400 pix.
= 544. Å		1.36 Å/pix.
x 400 pix.
= 544. Å		1.36 Å/pix.
x 400 pix.
= 544. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.36 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.148
最小 - 最大-0.53043073 - 1.6003981
平均 (標準偏差)-0.00014363303 (±0.042458266)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 544.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_29441_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_29441_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_29441_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : MS-ring of the flagellar complex

全体名称: MS-ring of the flagellar complex
要素
  • 複合体: MS-ring of the flagellar complex

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超分子 #1: MS-ring of the flagellar complex

超分子名称: MS-ring of the flagellar complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: CryoEM strucutre of the 33-mer RBM3 region of the Salmonella MS-ring
由来(天然)生物種: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (サルモネラ菌)
分子量理論値: 2.5 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度名称式
50.0 mMTris-HCl
100.0 mMSodium ChlorideNaCl
0.1 Percentn-Dodecyl-N,N-Dimethylamine-N-Oxide (LDAO)

詳細: 50 mM Tris-HCl pH 7.5, 100 mM NaCl, 0.1 % Ana-grade LDAO
グリッドモデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GRAPHENE OXIDE / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細: Purified MS-rings were added to each grid at 277.15K at 100% humidity. After 30 sec of incubation, blotting was performed for 12 sec. The grid was then plunged into liquid ethane using a ...詳細: Purified MS-rings were added to each grid at 277.15K at 100% humidity. After 30 sec of incubation, blotting was performed for 12 sec. The grid was then plunged into liquid ethane using a Vitrobot Mark IV system (Thermo Fisher).

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

10143

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.0.1) / 使用した粒子像数: 33903
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15)
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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