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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29401 | ||||||||||||
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タイトル | Acinetobacter baylyi LptB2FG bound to lipopolysaccharide. | ||||||||||||
マップデータ | Acinetobacter baylyi LptB2FG bound to LPS. | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | lipopolysaccharide / ABC / ATPase / antibiotic / macrocyclic peptide / gram-negative bacteria / ESKAPE / LIPID TRANSPORT | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 lipopolysaccharide transport / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / ATP hydrolysis activity / ATP binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Acinetobacter baylyi ADP1 (バクテリア) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.14 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Pahil KS / Gilman MSA / Kruse AC / Kahne D | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: A new antibiotic traps lipopolysaccharide in its intermembrane transporter. 著者: Karanbir S Pahil / Morgan S A Gilman / Vadim Baidin / Thomas Clairfeuille / Patrizio Mattei / Christoph Bieniossek / Fabian Dey / Dieter Muri / Remo Baettig / Michael Lobritz / Kenneth ...著者: Karanbir S Pahil / Morgan S A Gilman / Vadim Baidin / Thomas Clairfeuille / Patrizio Mattei / Christoph Bieniossek / Fabian Dey / Dieter Muri / Remo Baettig / Michael Lobritz / Kenneth Bradley / Andrew C Kruse / Daniel Kahne / 要旨: Gram-negative bacteria are extraordinarily difficult to kill because their cytoplasmic membrane is surrounded by an outer membrane that blocks the entry of most antibiotics. The impenetrable nature ...Gram-negative bacteria are extraordinarily difficult to kill because their cytoplasmic membrane is surrounded by an outer membrane that blocks the entry of most antibiotics. The impenetrable nature of the outer membrane is due to the presence of a large, amphipathic glycolipid called lipopolysaccharide (LPS) in its outer leaflet. Assembly of the outer membrane requires transport of LPS across a protein bridge that spans from the cytoplasmic membrane to the cell surface. Maintaining outer membrane integrity is essential for bacterial cell viability, and its disruption can increase susceptibility to other antibiotics. Thus, inhibitors of the seven lipopolysaccharide transport (Lpt) proteins that form this transenvelope transporter have long been sought. A new class of antibiotics that targets the LPS transport machine in Acinetobacter was recently identified. Here, using structural, biochemical and genetic approaches, we show that these antibiotics trap a substrate-bound conformation of the LPS transporter that stalls this machine. The inhibitors accomplish this by recognizing a composite binding site made up of both the Lpt transporter and its LPS substrate. Collectively, our findings identify an unusual mechanism of lipid transport inhibition, reveal a druggable conformation of the Lpt transporter and provide the foundation for extending this class of antibiotics to other Gram-negative pathogens. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29401.map.gz | 122.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-29401-v30.xml emd-29401.xml | 24.9 KB 24.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_29401_fsc.xml | 11.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_29401.png | 71.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-29401.cif.gz | 7.1 KB | ||
その他 | emd_29401_additional_1.map.gz emd_29401_half_map_1.map.gz emd_29401_half_map_2.map.gz | 122.4 MB 120.5 MB 120.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29401 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29401 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8frmMC 8frlC 8frnC 8froC 8frpC 8ufgC 8ufhC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29401.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 129.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Acinetobacter baylyi LptB2FG bound to LPS. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.825 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Acinetobacter baylyi LptB2FG bound to LPS with the...
ファイル | emd_29401_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Acinetobacter baylyi LptB2FG bound to LPS with the detergent micelle and periplasmic domains masked out. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Second half map.
ファイル | emd_29401_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Second half map. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: First half map.
ファイル | emd_29401_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | First half map. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Inner membrane lipopolysaccharide transporter composed of LptF, L...
全体 | 名称: Inner membrane lipopolysaccharide transporter composed of LptF, LptG and two molecules of LptB in complex with lipopolysaccharide. |
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要素 |
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-超分子 #1: Inner membrane lipopolysaccharide transporter composed of LptF, L...
超分子 | 名称: Inner membrane lipopolysaccharide transporter composed of LptF, LptG and two molecules of LptB in complex with lipopolysaccharide. タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baylyi ADP1 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 139.483 KDa |
-分子 #1: Lipopolysaccharide export system ATP-binding protein LptB
分子 | 名称: Lipopolysaccharide export system ATP-binding protein LptB タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baylyi ADP1 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 29.032344 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MHHHHHHHME QIAQQQPQTL CIKHLAKNYS KRWVVKDVSF EMQSGQIVGL LGPNGAGKTT SFYMVVGLVR MDKGEIHLDN LDLSDLAMH ERARKGIGYL PQEASIFRKL TIAENIMAIL ETRKDLNKQQ RQQRLQELLN DFKITHIKDS LGMSVSGGER R RAEIARAL ...文字列: MHHHHHHHME QIAQQQPQTL CIKHLAKNYS KRWVVKDVSF EMQSGQIVGL LGPNGAGKTT SFYMVVGLVR MDKGEIHLDN LDLSDLAMH ERARKGIGYL PQEASIFRKL TIAENIMAIL ETRKDLNKQQ RQQRLQELLN DFKITHIKDS LGMSVSGGER R RAEIARAL AADPKFMLLD EPFAGVDPIS VGDIKDIIRN LKDRGIGVLI TDHNVRETLA ICEHAYIVSE GAVIAEGSPQ DI LENEQVR KVYLGDDFTV UniProtKB: Lipopolysaccharide export system ATP-binding protein LptB |
-分子 #2: Lipopolysaccharide export system permease protein LptF
分子 | 名称: Lipopolysaccharide export system permease protein LptF タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baylyi ADP1 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 41.564273 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MIIRRYLVKQ VVSTSLVVIA LLTLIMMGGR LIKYFGVAAQ GRLDAGVLFS IIGYRMPEFL TLILPLGFFI GLMLVFGRLY VDHEMAVLN GSGISRIRLG QLLIPLALVF LVIQGILMLW MTPWGLRQFD QLSSSQAVRT GFDLVRPKEF ISSGPYTIYA G DLSEDRKN ...文字列: MIIRRYLVKQ VVSTSLVVIA LLTLIMMGGR LIKYFGVAAQ GRLDAGVLFS IIGYRMPEFL TLILPLGFFI GLMLVFGRLY VDHEMAVLN GSGISRIRLG QLLIPLALVF LVIQGILMLW MTPWGLRQFD QLSSSQAVRT GFDLVRPKEF ISSGPYTIYA G DLSEDRKN LKDIFFYQRA QKEGKPDVMI LAKEATRVVM ENETANVVDL IQGRRYEIYP GKAKYSQAEF QRYRLRLEND KS ATFETDK VEALPSSKLW NKWNDPVIAS EMGWRVFGPF TIVIALMMAV ALCEVSPRQG RYYRLIPAIF IFASLIVLLI AIR TRISRD ELGVWAYPAA LAVYGIAAAL FSRKQKLAPK IKKQIKRVRA UniProtKB: Lipopolysaccharide export system permease protein LptF |
-分子 #3: LPS export ABC transporter permease LptG
分子 | 名称: LPS export ABC transporter permease LptG / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Acinetobacter baylyi ADP1 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 40.080621 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLARRIVAKH VTKTTALAML GTTIVLVILQ VLFTYLGELS NLKADYSAWQ AFLYVLWGAP RYLYEILPIS ALIGAILGLG TLASNSELI VMRSVGISLW RIVGWVIRSA LVLVLLSFAL SEWVVPYTNE RANSVKSHQS VAALGEVRGY WSREGQRFIY V DYANSQGQ ...文字列: MLARRIVAKH VTKTTALAML GTTIVLVILQ VLFTYLGELS NLKADYSAWQ AFLYVLWGAP RYLYEILPIS ALIGAILGLG TLASNSELI VMRSVGISLW RIVGWVIRSA LVLVLLSFAL SEWVVPYTNE RANSVKSHQS VAALGEVRGY WSREGQRFIY V DYANSQGQ LKRIQVVDFD DNYRLKSVTN AEQGQFVKDG QWLLNHSQQM AIQGQGDAVL ANAAKQPFSL ALQPKYVHMV TI DPEDLSF SQLVSFMNYM REYSQVPKTY QLAFWKKVAS PFALITLVLV ACSFIFGPLR QQSMGFRLVI ALFIGLGFYY LQD FLGYAS LVYNPSPAWF VLGPIVLMFV AGSYLLYRAR UniProtKB: Permease |
-分子 #4: (2~{R},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{R})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-2-[(...
分子 | 名称: (2~{R},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{R})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-2-[(2~{R},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{R})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-5-[(2~{S},3~{S},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{S})-1,2-bis(oxidanyl) ...名称: (2~{R},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{R})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-2-[(2~{R},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{R})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-5-[(2~{S},3~{S},4~{R},5~{R},6~{R})-6-[(1~{S})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-4-[(2~{R},3~{S},4~{R},5~{S},6~{R})-6-[(1~{S})-2-[(2~{S},3~{S},4~{S},5~{S},6~{R})-6-[(1~{S})-1,2-bis(oxidanyl)ethyl]-3,4,5-tris(oxidanyl)oxan-2-yl]oxy-1-oxidanyl-ethyl]-3,4-bis(oxidanyl)-5-phosphonooxy-oxan-2-yl]oxy-3-oxidanyl-5-phosphonooxy-oxan-2-yl]oxy-2-carboxy-2-[[(2~{R},3~{S},4~{R},5~{R},6~{R})-5-[[(3~{R})-3-dodecanoyloxytetradecanoyl]amino]-6-[[(2~{R},3~{S},4~{R},5~{R},6~{R})-3-oxidanyl-5-[[(3~{R})-3-oxidanyltetradecanoyl]amino]-4-[(3~{R})-3-oxidanyltetradecanoyl]oxy-6-phosphonooxy-oxan-2-yl]methoxy]-3-phosphonooxy-4-[(3~{R})-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]oxy-oxan-2-yl]methoxy]oxan-4-yl]oxy-4,5-bis(oxidanyl)oxane-2-carboxylic acid タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 1 / 式: JSG |
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分子量 | 理論値: 2.975178 KDa |
Chemical component information | ChemComp-JSG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 7.5 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: 300 mM NaCl, 20 mM Tris [pH 7.4], 0.02% GDN, 0.25 mM tris(hydroxypropyl)phosphine | |||||||||||||||
グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | |||||||||||||||
詳細 | This sample was monodisperse as determined by SEC. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 51.2 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |