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- EMDB-28044: Human ABCA7 in BPL/Ch nanodiscs (Map 2) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-28044
タイトルHuman ABCA7 in BPL/Ch nanodiscs (Map 2)
マップデータhuman ABCA7 in BPL/Ch nanodiscs, alternative 3D class Map
試料
  • 複合体: Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å
データ登録者Alam A / Le LTM / Thompson JR
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute on Aging (NIH/NIA)1R21AG069180 米国
引用ジャーナル: EMBO J / 年: 2023
タイトル: Cryo-EM structures of human ABCA7 provide insights into its phospholipid translocation mechanisms.
著者: Le Thi My Le / James Robert Thompson / Sepehr Dehghani-Ghahnaviyeh / Shashank Pant / Phuoc Xuan Dang / Jarrod Bradley French / Takahisa Kanikeyo / Emad Tajkhorshid / Amer Alam /
要旨: Phospholipid extrusion by ABC subfamily A (ABCA) exporters is central to cellular physiology, although the specifics of the underlying substrate interactions and transport mechanisms remain poorly ...Phospholipid extrusion by ABC subfamily A (ABCA) exporters is central to cellular physiology, although the specifics of the underlying substrate interactions and transport mechanisms remain poorly resolved at the molecular level. Here we report cryo-EM structures of lipid-embedded human ABCA7 in an open state and in a nucleotide-bound, closed state at resolutions between 3.6 and 4.0 Å. The former reveals an ordered patch of bilayer lipids traversing the transmembrane domain (TMD), while the latter reveals a lipid-free, closed TMD with a small extracellular opening. These structures offer a structural framework for both substrate entry and exit from the ABCA7 TMD and highlight conserved rigid-body motions that underlie the associated conformational transitions. Combined with functional analysis and molecular dynamics (MD) simulations, our data also shed light on lipid partitioning into the ABCA7 TMD and localized membrane perturbations that underlie ABCA7 function and have broader implications for other ABCA family transporters.
履歴
登録2022年9月6日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年12月21日-
マップ公開2022年12月21日-
更新2023年2月15日-
現状2023年2月15日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_28044.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_28044.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈human ABCA7 in BPL/Ch nanodiscs, alternative 3D class Map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.9 Å/pix.
x 384 pix.
= 343.68 Å		0.9 Å/pix.
x 384 pix.
= 343.68 Å		0.9 Å/pix.
x 384 pix.
= 343.68 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.895 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.006
最小 - 最大-0.06953939 - 0.12262618
平均 (標準偏差)5.5167075e-06 (±0.0023811436)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 343.68 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: Refinement half map1

ファイルemd_28044_half_map_1.map
注釈Refinement half map1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Refinement half map2

ファイルemd_28044_half_map_2.map
注釈Refinement half map2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs

全体名称: Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs
要素
  • 複合体: Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs

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超分子 #1: Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs

超分子名称: Human ABCA7 in Porcine BPL/Ch/MSP1D1 nanodiscs / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
詳細: Human ABCA7 recombinantly expressed in HEK293 TREX cell line and reconstituted in MSP1D1 nanodiscs comprising 4:1 mixture of Porcine Brain Polar Lipids:Cholesterol
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 234.35 KDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
詳細: 25mM HEPES pH 7.5, 150mM NaCl, 5mM ATP gammaS, 10mM Magnesium Chloride
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 平均露光時間: 60.0 sec. / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.4 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

9791

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1/4.0) / 使用した粒子像数: 124114
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 3次元分類クラス数: 1 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

6jbj

精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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