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基本情報
| 登録情報 | ![]() | ||||||||||||
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| タイトル | Closed state of RFC:PCNA bound to a nicked dsDNA | ||||||||||||
マップデータ | Map | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | REPLICATION-DNA complex | ||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報positive regulation of DNA metabolic process / Rad17 RFC-like complex / Mismatch repair (MMR) directed by MSH2:MSH6 (MutSalpha) / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in GG-NER / meiotic mismatch repair / Processive synthesis on the lagging strand / Elg1 RFC-like complex / Removal of the Flap Intermediate / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex ...positive regulation of DNA metabolic process / Rad17 RFC-like complex / Mismatch repair (MMR) directed by MSH2:MSH6 (MutSalpha) / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in GG-NER / meiotic mismatch repair / Processive synthesis on the lagging strand / Elg1 RFC-like complex / Removal of the Flap Intermediate / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex / Polymerase switching / E3 ubiquitin ligases ubiquitinate target proteins / maintenance of DNA trinucleotide repeats / DNA clamp loader activity / SUMOylation of DNA replication proteins / Translesion synthesis by REV1 / Translesion synthesis by POLK / Translesion synthesis by POLI / Translesion Synthesis by POLH / DNA replication checkpoint signaling / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / Termination of translesion DNA synthesis / Activation of ATR in response to replication stress / PCNA complex / lagging strand elongation / DNA damage tolerance / silent mating-type cassette heterochromatin formation / sister chromatid cohesion / mitotic sister chromatid cohesion / error-free translesion synthesis / DNA polymerase processivity factor activity / leading strand elongation / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / Dual incision in TC-NER / subtelomeric heterochromatin formation / translesion synthesis / mismatch repair / positive regulation of DNA repair / DNA damage checkpoint signaling / positive regulation of DNA replication / replication fork / nucleotide-excision repair / DNA-templated DNA replication / mitotic cell cycle / chromosome, telomeric region / cell division / DNA repair / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / nucleus / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.39 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Schrecker M / Hite RK | ||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2022タイトル: Multistep loading of a DNA sliding clamp onto DNA by replication factor C. 著者: Marina Schrecker / Juan C Castaneda / Sujan Devbhandari / Charanya Kumar / Dirk Remus / Richard K Hite / ![]() 要旨: The DNA sliding clamp proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is an essential co-factor for many eukaryotic DNA metabolic enzymes. PCNA is loaded around DNA by the ATP-dependent clamp loader ...The DNA sliding clamp proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is an essential co-factor for many eukaryotic DNA metabolic enzymes. PCNA is loaded around DNA by the ATP-dependent clamp loader replication factor C (RFC), which acts at single-stranded (ss)/double-stranded DNA (dsDNA) junctions harboring a recessed 3' end (3' ss/dsDNA junctions) and at DNA nicks. To illuminate the loading mechanism we have investigated the structure of RFC:PCNA bound to ATPγS and 3' ss/dsDNA junctions or nicked DNA using cryogenic electron microscopy. Unexpectedly, we observe open and closed PCNA conformations in the RFC:PCNA:DNA complex, revealing that PCNA can adopt an open, planar conformation that allows direct insertion of dsDNA, and raising the question of whether PCNA ring closure is mechanistically coupled to ATP hydrolysis. By resolving multiple DNA-bound states of RFC:PCNA we observe that partial melting facilitates lateral insertion into the central channel formed by RFC:PCNA. We also resolve the Rfc1 N-terminal domain and demonstrate that its single BRCT domain participates in coordinating DNA prior to insertion into the central RFC channel, which promotes PCNA loading on the lagging strand of replication forks in vitro. Combined, our data suggest a comprehensive and fundamentally revised model for the RFC-catalyzed loading of PCNA onto DNA. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_27672.map.gz | 108.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-27672-v30.xml emd-27672.xml | 30.9 KB 30.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_27672_fsc.xml | 12.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_27672.png | 178.7 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-27672.cif.gz | 8.2 KB | ||
| その他 | emd_27672_additional_1.map.gz emd_27672_half_map_1.map.gz emd_27672_half_map_2.map.gz | 676.4 MB 200.4 MB 200.4 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27672 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27672 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_27672_validation.pdf.gz | 915.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_27672_full_validation.pdf.gz | 915.3 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_27672_validation.xml.gz | 21.7 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_27672_validation.cif.gz | 28.1 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27672 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27672 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 8dr6MC ![]() 8dqwC ![]() 8dqxC ![]() 8dqzC ![]() 8dr0C ![]() 8dr1C ![]() 8dr3C ![]() 8dr4C ![]() 8dr5C ![]() 8dr7C C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_27672.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.826 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Density modified and 1.5x resampled
| ファイル | emd_27672_additional_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Density modified and 1.5x resampled | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map A
| ファイル | emd_27672_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Half map A | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map B
| ファイル | emd_27672_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Half map B | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : Closed state of RFC:PCNA bound to a nicked dsDNA
+超分子 #1: Closed state of RFC:PCNA bound to a nicked dsDNA
+分子 #1: Replication factor C subunit 1
+分子 #2: Replication factor C subunit 4
+分子 #3: Replication factor C subunit 3
+分子 #4: Replication factor C subunit 2
+分子 #5: Replication factor C subunit 5
+分子 #6: Proliferating cell nuclear antigen
+分子 #7: DNA (32-MER)
+分子 #8: DNA (5'-D(P*CP*CP*CP*CP*CP*CP*GP*GP*CP*CP*CP*CP*CP*CP*CP*GP*GP*C)-3')
+分子 #9: DNA (5'-D(P*TP*TP*AP*GP*GP*GP*GP*GP*GP*GP*GP*GP*A)-3')
+分子 #10: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER
+分子 #11: MAGNESIUM ION
+分子 #12: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #13: water
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 1.0 mg/mL | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.6 構成要素:
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| グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GRAPHENE OXIDE / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS | ||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 297 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 66.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
ムービー
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キーワード
データ登録者
米国, 3件
引用

























Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)















































解析
FIELD EMISSION GUN

