+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 6xTEL DNA template | |||||||||
![]() | Merged map from three separately local refined domains as described in the manuscript. | |||||||||
![]() |
| |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.69 Å | |||||||||
![]() | He Q / Lin X / Chavez BL / Agrawal S / Lusk BL / Lim C | |||||||||
資金援助 | ![]()
| |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structures of the human CST-Polα-primase complex bound to telomere templates. 著者: Qixiang He / Xiuhua Lin / Bianca L Chavez / Sourav Agrawal / Benjamin L Lusk / Ci Ji Lim / ![]() 要旨: The mammalian DNA polymerase-α-primase (Polα-primase) complex is essential for DNA metabolism, providing the de novo RNA-DNA primer for several DNA replication pathways such as lagging-strand ...The mammalian DNA polymerase-α-primase (Polα-primase) complex is essential for DNA metabolism, providing the de novo RNA-DNA primer for several DNA replication pathways such as lagging-strand synthesis and telomere C-strand fill-in. The physical mechanism underlying how Polα-primase, alone or in partnership with accessory proteins, performs its complicated multistep primer synthesis function is unknown. Here we show that CST, a single-stranded DNA-binding accessory protein complex for Polα-primase, physically organizes the enzyme for efficient primer synthesis. Cryogenic electron microscopy structures of the CST-Polα-primase preinitiation complex (PIC) bound to various types of telomere overhang reveal that template-bound CST partitions the DNA and RNA catalytic centres of Polα-primase into two separate domains and effectively arranges them in RNA-DNA synthesis order. The architecture of the PIC provides a single solution for the multiple structural requirements for the synthesis of RNA-DNA primers by Polα-primase. Several insights into the template-binding specificity of CST, template requirement for assembly of the CST-Polα-primase PIC and activation are also revealed in this study. | |||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
添付画像 |
---|
-
ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 6.4 MB | ![]() | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 29.9 KB 29.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 18.3 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 66.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() | 122.5 MB 230.5 MB 226.4 MB 226.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
---|
-
マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Merged map from three separately local refined domains as described in the manuscript. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-追加マップ: Unsharpened consensus map
ファイル | emd_27109_additional_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Unsharpened consensus map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened consensus map
ファイル | emd_27109_additional_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Sharpened consensus map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map A
ファイル | emd_27109_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map B
ファイル | emd_27109_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-
試料の構成要素
-全体 : Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex boun...
全体 | 名称: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 6xTEL DNA template |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex boun...
超分子 | 名称: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 6xTEL DNA template タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 540 KDa |
-分子 #1: CTC1
分子 | 名称: CTC1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MGDYKDHDGD YKDHDIDYKD DDDKSGGSLE AAGRAQVPSS EQAWLEDAQV FIQKTLCPAV KEPNVQLTPL VIDCVKTVWL SQGRNQGSTL PLSYSFVSVQ DLKTHQRLPC CSHLSWSSSA YQAWAQEAGP NGNPLPREQL LLLGTLTDLS ADLEQECRNG SLYVRDNTGV ...文字列: MGDYKDHDGD YKDHDIDYKD DDDKSGGSLE AAGRAQVPSS EQAWLEDAQV FIQKTLCPAV KEPNVQLTPL VIDCVKTVWL SQGRNQGSTL PLSYSFVSVQ DLKTHQRLPC CSHLSWSSSA YQAWAQEAGP NGNPLPREQL LLLGTLTDLS ADLEQECRNG SLYVRDNTGV LSCELIDLDL SWLGHLFLFP RWSYLPPARW NSSGEGHLEL WDAPVPVFPL TISPGPVTPI PVLYPESASC LLRLRNKLRG VQRNLAGSLV RLSALVKSKQ KAYFILSLGR SHPAVTHVSI IVQVPAQLVW HRALRPGTAY VLTELRVSKI RGQRQHVWMT SQSSRLLLLK PECVQELELE LEGPLLEADP KPLPMPSNSE DKKDPESLVR YSRLLSYSGA VTGVLNEPAG LYELDGQLGL CLAYQQFRGL RRVMRPGVCL QLQDVHLLQS VGGGTRRPVL APCLRGAVLL QSFSRQKPGA HSSRQAYGAS LYEQLVWERQ LGLPLYLWAT KALEELACKL CPHVLRHHQF LQHSSPGSPS LGLQLLAPTL DLLAPPGSPV RNAHNEILEE PHHCPLQKYT RLQTPSSFPT LATLKEEGQR KAWASFDPKA LLPLPEASYL PSCQLNRRLA WSWLCLLPSA FCPAQVLLGV LVASSHKGCL QLRDQSGSLP CLLLAKHSQP LSDPRLIGCL VRAERFQLIV ERDVRSSFPS WKELSMPGFI QKQQARVYVQ FFLADALILP VPRPCLHSAT PSTPQTDPTG PEGPHLGQSR LFLLCHKEAL MKRNFCVPPG ASPEVPKPAL SFYVLGSWLG GTQRKEGTGW GLPEPQGNDD NDQKVHLIFF GSSVRWFEFL HPGQVYRLVA PGPATPMLFE KDGSSCISRR PLELAGCASC LTVQDNWTLE LESSQDIQDV LDANKSLPES SLTDLLSDNF TDSLVSFSAE ILSRTLCEPL VASLWMKLGN TGAMRRCVKL TVALETAECE FPPHLDVYIE DPHLPPSLGL LPGARVHFSQ LEKRVSRSHN VYCCFRSSTY VQVLSFPPET TISVPLPHIY LAELLQGGQS PFQATASCHI VSVFSLQLFW VCAYCTSICR QGKCTRLGST CPTQTAISQA IIRLLVEDGT AEAVVTCRNH HVAAALGLCP REWASLLDFV QVPGRVVLQF AGPGAQLESS ARVDEPMTMF LWTLCTSPSV LRPIVLSFEL ERKPSKIVPL EPPRLQRFQC GELPFLTHVN PRLRLSCLSI RESEYSSSLG ILASSC |
-分子 #2: STN1
分子 | 名称: STN1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MHHHHHHQPG SSRCEEETPS LLWGLDPVFL AFAKLYIRDI LDMKESRQVP GVFLYNGHPI KQVDVLGTVI GVRERDAFYS YGVDDSTGVI NCICWKKLNT ESVSAAPSAA RELSLTSQLK KLQETIEQKT KIEIGDTIRV RGSIRTYREE REIHATTYYK VDDPVWNIQI ...文字列: MHHHHHHQPG SSRCEEETPS LLWGLDPVFL AFAKLYIRDI LDMKESRQVP GVFLYNGHPI KQVDVLGTVI GVRERDAFYS YGVDDSTGVI NCICWKKLNT ESVSAAPSAA RELSLTSQLK KLQETIEQKT KIEIGDTIRV RGSIRTYREE REIHATTYYK VDDPVWNIQI ARMLELPTIY RKVYDQPFHS SALEKEEALS NPGALDLPSL TSLLSEKAKE FLMENRVQSF YQQELEMVES LLSLANQPVI HSASSDQVNF KKDTTSKAIH SIFKNAIQLL QEKGLVFQKD DGFDNLYYVT REDKDLHRKI HRIIQQDCQK PNHMEKGCHF LHILACARLS IRPGLSEAVL QQVLELLEDQ SDIVSTMEHY YTAF |
-分子 #3: TEN1
分子 | 名称: TEN1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MSYYHHHHHH DYDIPTTENL YFQGAMGSGI QLPKPGTYYL PWEVSAGQVP DGSTLRTFGR LCLYDMIQSR VTLMAQHGSD QHQVLVCTKL VEPFHAQVGS LYIVLGELQH QQDRGSVVKA RVLTCVEGMN LPLLEQAIRE QRLYKQERGG SQ |
-分子 #4: PRIM1
分子 | 名称: PRIM1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MGHHHHHHGS GSGSGETFDP TELPELLKLY YRRLFPYSQY YRWLNYGGVI KNYFQHREFS FTLKDDIYIR YQSFNNQSDL EKEMQKMNPY KIDIGAVYSH RPNQHNTVKL GAFQAQEKEL VFDIDMTDYD DVRRCCSSAD ICPKCWTLMT MAIRIIDRAL KEDFGFKHRL ...文字列: MGHHHHHHGS GSGSGETFDP TELPELLKLY YRRLFPYSQY YRWLNYGGVI KNYFQHREFS FTLKDDIYIR YQSFNNQSDL EKEMQKMNPY KIDIGAVYSH RPNQHNTVKL GAFQAQEKEL VFDIDMTDYD DVRRCCSSAD ICPKCWTLMT MAIRIIDRAL KEDFGFKHRL WVYSGRRGVH CWVCDESVRK LSSAVRSGIV EYLSLVKGGQ DVKKKVHLSE KIHPFIRKSI NIIKKYFEEY ALVNQDILEN KESWDKILAL VPETIHDELQ QSFQKSHNSL QRWEHLKKVA SRYQNNIKND KYGPWLEWEI MLQYCFPRLD INVSKGINHL LKSPFSVHPK TGRISVPIDL QKVDQFDPFT VPTISFICRE LDAISTNEEE KEENEAESDV KHRTRDYKKT SLAPYVKVFE HFLENLDKSR KGELLKKSDL QKDF |
-分子 #5: PRIM2
分子 | 名称: PRIM2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MGHHHHHHGS GSGSGEFSGR KWRKLRLAGD QRNASYPHCL QFYLQPPSEN ISLIEFENLA IDRVKLLKSV ENLGVSYVKG TEQYQSKLES ELRKLKFSYR ENLEDEYEPR RRDHISHFIL RLAYCQSEEL RRWFIQQEMD LLRFRFSILP KDKIQDFLKD SQLQFEAISD ...文字列: MGHHHHHHGS GSGSGEFSGR KWRKLRLAGD QRNASYPHCL QFYLQPPSEN ISLIEFENLA IDRVKLLKSV ENLGVSYVKG TEQYQSKLES ELRKLKFSYR ENLEDEYEPR RRDHISHFIL RLAYCQSEEL RRWFIQQEMD LLRFRFSILP KDKIQDFLKD SQLQFEAISD EEKTLREQEI VASSPSLSGL KLGFESIYKI PFADALDLFR GRKVYLEDGF AYVPLKDIVA IILNEFRAKL SKALALTARS LPAVQSDERL QPLLNHLSHS YTGQDYSTQG NVGKISLDQI DLLSTKSFPP CMRQLHKALR ENHHLRHGGR MQYGLFLKGI GLTLEQALQF WKQEFIKGKM DPDKFDKGYS YNIRHSFGKE GKRTDYTPFS CLKIILSNPP SQGDYHGCPF RHSDPELLKQ KLQSYKISPG GISQILDLVK GTHYQVACQK YFEMIHNVDD CGFSLNHPNQ FFCESQRILN GGKDIKKEPI QPETPQPKPS VQKTKDASSA LASLNSSLEM DMEGLEDYFS EDS |
-分子 #6: POLA1
分子 | 名称: POLA1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MGGSAGDYKD HDGDYKDHDI DYKDDDDKGA SSAWSHPQFE KGGGSGGGSG GSAWSHPQFE KGAGSAPVHG DDSLSDSGSF VSSRARREKK SKKGRQEALE RLKKAKAGEK YKYEVEDFTG VYEEVDEEQY SKLVQARQDD DWIVDDDGIG YVEDGREIFD DDLEDDALDA ...文字列: MGGSAGDYKD HDGDYKDHDI DYKDDDDKGA SSAWSHPQFE KGGGSGGGSG GSAWSHPQFE KGAGSAPVHG DDSLSDSGSF VSSRARREKK SKKGRQEALE RLKKAKAGEK YKYEVEDFTG VYEEVDEEQY SKLVQARQDD DWIVDDDGIG YVEDGREIFD DDLEDDALDA DEKGKDGKAR NKDKRNVKKL AVTKPNNIKS MFIACAGKKT ADKAVDLSKD GLLGDILQDL NTETPQITPP PVMILKKKRS IGASPNPFSV HTATAVPSGK IASPVSRKEP PLTPVPLKRA EFAGDDVQVE STEEEQESGA MEFEDGDFDE PMEVEEVDLE PMAAKAWDKE SEPAEEVKQE ADSGKGTVSY LGSFLPDVSC WDIDQEGDSS FSVQEVQVDS SHLPLVKGAD EEQVFHFYWL DAYEDQYNQP GVVFLFGKVW IESAETHVSC CVMVKNIERT LYFLPREMKI DLNTGKETGT PISMKDVYEE FDEKIATKYK IMKFKSKPVE KNYAFEIPDV PEKSEYLEVK YSAEMPQLPQ DLKGETFSHV FGTNTSSLEL FLMNRKIKGP CWLEVKSPQL LNQPVSWCKV EAMALKPDLV NVIKDVSPPP LVVMAFSMKT MQNAKNHQNE IIAMAALVHH SFALDKAAPK PPFQSHFCVV SKPKDCIFPY AFKEVIEKKN VKVEVAATER TLLGFFLAKV HKIDPDIIVG HNIYGFELEV LLQRINVCKA PHWSKIGRLK RSNMPKLGGR SGFGERNATC GRMICDVEIS AKELIRCKSY HLSELVQQIL KTERVVIPME NIQNMYSESS QLLYLLEHTW KDAKFILQIM CELNVLPLAL QITNIAGNIM SRTLMGGRSE RNEFLLLHAF YENNYIVPDK QIFRKPQQKL GDEDEEIDGD TNKYKKGRKK AAYAGGLVLD PKVGFYDKFI LLLDFNSLYP SIIQEFNICF TTVQRVASEA QKVTEDGEQE QIPELPDPSL EMGILPREIR KLVERRKQVK QLMKQQDLNP DLILQYDIRQ KALKLTANSM YGCLGFSYSR FYAKPLAALV TYKGREILMH TKEMVQKMNL EVIYGDTDSI MINTNSTNLE EVFKLGNKVK SEVNKLYKLL EIDIDGVFKS LLLLKKKKYA ALVVEPTSDG NYVTKQELKG LDIVRRDWCD LAKDTGNFVI GQILSDQSRD TIVENIQKRL IEIGENVLNG SVPVSQFEIN KALTKDPQDY PDKKSLPHVH VALWINSQGG RKVKAGDTVS YVICQDGSNL TASQRAYAPE QLQKQDNLTI DTQYYLAQQI HPVVARICEP IDGIDAVLIA TWLGLDPTQF RVHHYHKDEE NDALLGGPAQ LTDEEKYRDC ERFKCPCPTC GTENIYDNVF DGSGTDMEPS LYRCSNIDCK ASPLTFTVQL SNKLIMDIRR FIKKYYDGWL ICEEPTCRNR TRHLPLQFSR TGPLCPACMK ATLQPEYSDK SLYTQLCFYR YIFDAECALE KLTTDHEKDK LKKQFFTPKV LQDYRKLKNT AEQFLSRSGY SEVNLSKLFA GCAVKSV |
-分子 #7: POLA2
分子 | 名称: POLA2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MGHHHHHHGS GSGSGSASAQ QLAEELQIFG LDCEEALIEK LVELCVQYGQ NEEGMVGELI AFCTSTHKVG LTSEILNSFE HEFLSKRLSK ARHSTCKDSG HAGARDIVSI QELIEVEEEE EILLNSYTTP SKGSQKRAIS TPETPLTKRS VSTRSPHQLL SPSSFSPSAT ...文字列: MGHHHHHHGS GSGSGSASAQ QLAEELQIFG LDCEEALIEK LVELCVQYGQ NEEGMVGELI AFCTSTHKVG LTSEILNSFE HEFLSKRLSK ARHSTCKDSG HAGARDIVSI QELIEVEEEE EILLNSYTTP SKGSQKRAIS TPETPLTKRS VSTRSPHQLL SPSSFSPSAT PSQKYNSRSN RGEVVTSFGL AQGVSWSGRG GAGNISLKVL GCPEALTGSY KSMFQKLPDI REVLTCKIEE LGSELKEHYK IEAFTPLLAP AQEPVTLLGQ IGCDSNGKLN NKSVILEGDR EHSSGAQIPV DLSELKEYSL FPGQVVIMEG INTTGRKLVA TKLYEGVPLP FYQPTEEDAD FEQSMVLVAC GPYTTSDSIT YDPLLDLIAV INHDRPDVCI LFGPFLDAKH EQVENCLLTS PFEDIFKQCL RTIIEGTRSS GSHLVFVPSL RDVHHEPVYP QPPFSYSDLS REDKKQVQFV SEPCSLSING VIFGLTSTDL LFHLGAEEIS SSSGTSDRFS RILKHILTQR SYYPLYPPQE DMAIDYESFY VYAQLPVTPD VLIIPSELRY FVKDVLGCVC VNPGRLTKGQ VGGTFARLYL RRPAADGAER QSPCIAVQVV RI |
-分子 #8: C-6xTEL
分子 | 名称: C-6xTEL / タイプ: protein_or_peptide / ID: 8 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: CTTAGGGTTA GGGTTAGGGT TAGGGTTAGG GTTAGGG |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
濃度 | 5 mg/mL | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: CHAPSO is only added just before sample vitrification. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7794 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |