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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 4xTEL-foldback template | |||||||||
![]() | Merged map using three separately refined domains | |||||||||
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![]() | telomere / C-strand / complex / 4xTEL-foldback DNA template / REPLICATION-DNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() CST complex / : / DNA primase AEP / ribonucleotide binding / telomerase inhibitor activity / DNA replication initiation / telomere maintenance via telomere lengthening / Telomere C-strand synthesis initiation / DNA/RNA hybrid binding / Inhibition of replication initiation of damaged DNA by RB1/E2F1 ...CST complex / : / DNA primase AEP / ribonucleotide binding / telomerase inhibitor activity / DNA replication initiation / telomere maintenance via telomere lengthening / Telomere C-strand synthesis initiation / DNA/RNA hybrid binding / Inhibition of replication initiation of damaged DNA by RB1/E2F1 / regulation of type I interferon production / alpha DNA polymerase:primase complex / Polymerase switching / single-stranded telomeric DNA binding / : / Processive synthesis on the lagging strand / G-rich strand telomeric DNA binding / telomere capping / DNA replication, synthesis of primer / lagging strand elongation / intermediate filament cytoskeleton / Removal of the Flap Intermediate / Polymerase switching on the C-strand of the telomere / mitotic DNA replication initiation / bone marrow development / DNA synthesis involved in DNA repair / DNA strand elongation involved in DNA replication / telomeric DNA binding / hematopoietic stem cell proliferation / leading strand elongation / G1/S-Specific Transcription / negative regulation of telomere maintenance via telomerase / DNA replication origin binding / replicative senescence / Activation of the pre-replicative complex / DNA replication initiation / spleen development / regulation of G2/M transition of mitotic cell cycle / telomere maintenance / thymus development / Defective pyroptosis / positive regulation of DNA replication / multicellular organism growth / double-strand break repair via nonhomologous end joining / nuclear matrix / fibrillar center / positive regulation of fibroblast proliferation / protein import into nucleus / nuclear envelope / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / chromosome, telomeric region / DNA replication / ciliary basal body / DNA repair / nucleotide binding / intracellular membrane-bounded organelle / DNA damage response / chromatin binding / protein kinase binding / chromatin / nucleolus / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / metal ion binding / nucleus / membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.43 Å | |||||||||
![]() | He Q / Lin X / Chavez BL / Agrawal S / Lusk BL / Lim C | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures of the human CST-Polα-primase complex bound to telomere templates. 著者: Qixiang He / Xiuhua Lin / Bianca L Chavez / Sourav Agrawal / Benjamin L Lusk / Ci Ji Lim / ![]() 要旨: The mammalian DNA polymerase-α-primase (Polα-primase) complex is essential for DNA metabolism, providing the de novo RNA-DNA primer for several DNA replication pathways such as lagging-strand ...The mammalian DNA polymerase-α-primase (Polα-primase) complex is essential for DNA metabolism, providing the de novo RNA-DNA primer for several DNA replication pathways such as lagging-strand synthesis and telomere C-strand fill-in. The physical mechanism underlying how Polα-primase, alone or in partnership with accessory proteins, performs its complicated multistep primer synthesis function is unknown. Here we show that CST, a single-stranded DNA-binding accessory protein complex for Polα-primase, physically organizes the enzyme for efficient primer synthesis. Cryogenic electron microscopy structures of the CST-Polα-primase preinitiation complex (PIC) bound to various types of telomere overhang reveal that template-bound CST partitions the DNA and RNA catalytic centres of Polα-primase into two separate domains and effectively arranges them in RNA-DNA synthesis order. The architecture of the PIC provides a single solution for the multiple structural requirements for the synthesis of RNA-DNA primers by Polα-primase. Several insights into the template-binding specificity of CST, template requirement for assembly of the CST-Polα-primase PIC and activation are also revealed in this study. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 210.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 29.4 KB 29.4 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 18.3 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 152.6 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 8.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 122.7 MB 226.4 MB 226.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8d0bMC ![]() 8d0kC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Merged map using three separately refined domains | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Consensus map
ファイル | emd_27104_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Consensus half map 2
ファイル | emd_27104_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Consensus half map 1
ファイル | emd_27104_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex boun...
全体 | 名称: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 4xTEL-foldback DNA template |
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要素 |
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-超分子 #1: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex boun...
超分子 | 名称: Human CST-DNA polymerase alpha/primase preinitiation complex bound to 4xTEL-foldback DNA template タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: Fold-back double-stranded DNA region of the DNA template and PRIM2 C-term domain are not modeled due to structural flexibility. |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 540 KDa |
-分子 #1: CST complex subunit CTC1
分子 | 名称: CST complex subunit CTC1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 133.938094 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: PSSEQAWLED AQVFIQKTLC PAVKEPNVQL TPLVIDCVKT VWLSQGRNQG STLPLSYSFV SVQDLKTHQR LPCCSHLSWS SSAYQAWAQ EAGPNGNPLP REQLLLLGTL TDLSADLEQE CRNGSLYVRD NTGVLSCELI DLDLSWLGHL FLFPRWSYLP P ARWNSSGE ...文字列: PSSEQAWLED AQVFIQKTLC PAVKEPNVQL TPLVIDCVKT VWLSQGRNQG STLPLSYSFV SVQDLKTHQR LPCCSHLSWS SSAYQAWAQ EAGPNGNPLP REQLLLLGTL TDLSADLEQE CRNGSLYVRD NTGVLSCELI DLDLSWLGHL FLFPRWSYLP P ARWNSSGE GHLELWDAPV PVFPLTISPG PVTPIPVLYP ESASCLLRLR NKLRGVQRNL AGSLVRLSAL VKSKQKAYFI LS LGRSHPA VTHVSIIVQV PAQLVWHRAL RPGTAYVLTE LRVSKIRGQR QHVWMTSQSS RLLLLKPECV QELELELEGP LLE ADPKPL PMPSNSEDKK DPESLVRYSR LLSYSGAVTG VLNEPAGLYE LDGQLGLCLA YQQFRGLRRV MRPGVCLQLQ DVHL LQSVG GGTRRPVLAP CLRGAVLLQS FSRQKPGAHS SRQAYGASLY EQLVWERQLG LPLYLWATKA LEELACKLCP HVLRH HQFL QHSSPGSPSL GLQLLAPTLD LLAPPGSPVR NAHNEILEEP HHCPLQKYTR LQTPSSFPTL ATLKEEGQRK AWASFD PKA LLPLPEASYL PSCQLNRRLA WSWLCLLPSA FCPAQVLLGV LVASSHKGCL QLRDQSGSLP CLLLAKHSQP LSDPRLI GC LVRAERFQLI VERDVRSSFP SWKELSMPGF IQKQQARVYV QFFLADALIL PVPRPCLHSA TPSTPQTDPT GPEGPHLG Q SRLFLLCHKE ALMKRNFCVP PGASPEVPKP ALSFYVLGSW LGGTQRKEGT GWGLPEPQGN DDNDQKVHLI FFGSSVRWF EFLHPGQVYR LVAPGPATPM LFEKDGSSCI SRRPLELAGC ASCLTVQDNW TLELESSQDI QDVLDANKSL PESSLTDLLS DNFTDSLVS FSAEILSRTL CEPLVASLWM KLGNTGAMRR CVKLTVALET AECEFPPHLD VYIEDPHLPP SLGLLPGARV H FSQLEKRV SRSHNVYCCF RSSTYVQVLS FPPETTISVP LPHIYLAELL QGGQSPFQAT ASCHIVSVFS LQLFWVCAYC TS ICRQGKC TRLGSTCPTQ TAISQAIIRL LVEDGTAEAV VTCRNHHVAA ALGLCPREWA SLLDFVQVPG RVVLQFAGPG AQL ESSARV DEPMTMFLWT LCTSPSVLRP IVLSFELERK PSKIVPLEPP RLQRFQCGEL PFLTHVNPRL RLSCLSIRES EYSS SLGIL ASSC UniProtKB: CST complex subunit CTC1 |
-分子 #2: CST complex subunit STN1
分子 | 名称: CST complex subunit STN1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 41.585305 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: RCEEETPSLL WGLDPVFLAF AKLYIRDILD MKESRQVPGV FLYNGHPIKQ VDVLGTVIGV RERDAFYSYG VDDSTGVINC ICWKKLNTE SVSAAPSAAR ELSLTSQLKK LQETIEQKTK IEIGDTIRVR GSIRTYREER EIHATTYYKV DDPVWNIQIA R MLELPTIY ...文字列: RCEEETPSLL WGLDPVFLAF AKLYIRDILD MKESRQVPGV FLYNGHPIKQ VDVLGTVIGV RERDAFYSYG VDDSTGVINC ICWKKLNTE SVSAAPSAAR ELSLTSQLKK LQETIEQKTK IEIGDTIRVR GSIRTYREER EIHATTYYKV DDPVWNIQIA R MLELPTIY RKVYDQPFHS SALEKEEALS NPGALDLPSL TSLLSEKAKE FLMENRVQSF YQQELEMVES LLSLANQPVI HS ASSDQVN FKKDTTSKAI HSIFKNAIQL LQEKGLVFQK DDGFDNLYYV TREDKDLHRK IHRIIQQDCQ KPNHMEKGCH FLH ILACAR LSIRPGLSEA VLQQVLELLE DQSDIVSTME HYYTAF UniProtKB: CST complex subunit STN1 |
-分子 #3: CST complex subunit TEN1
分子 | 名称: CST complex subunit TEN1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 13.609621 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: LPKPGTYYLP WEVSAGQVPD GSTLRTFGRL CLYDMIQSRV TLMAQHGSDQ HQVLVCTKLV EPFHAQVGSL YIVLGELQHQ QDRGSVVKA RVLTCVEGMN LPLLEQAIRE QRLYKQERGG SQ UniProtKB: CST complex subunit TEN1 |
-分子 #4: DNA primase small subunit
分子 | 名称: DNA primase small subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA primase AEP |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 49.849812 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: ETFDPTELPE LLKLYYRRLF PYSQYYRWLN YGGVIKNYFQ HREFSFTLKD DIYIRYQSFN NQSDLEKEMQ KMNPYKIDIG AVYSHRPNQ HNTVKLGAFQ AQEKELVFDI DMTDYDDVRR CCSSADICPK CWTLMTMAIR IIDRALKEDF GFKHRLWVYS G RRGVHCWV ...文字列: ETFDPTELPE LLKLYYRRLF PYSQYYRWLN YGGVIKNYFQ HREFSFTLKD DIYIRYQSFN NQSDLEKEMQ KMNPYKIDIG AVYSHRPNQ HNTVKLGAFQ AQEKELVFDI DMTDYDDVRR CCSSADICPK CWTLMTMAIR IIDRALKEDF GFKHRLWVYS G RRGVHCWV CDESVRKLSS AVRSGIVEYL SLVKGGQDVK KKVHLSEKIH PFIRKSINII KKYFEEYALV NQDILENKES WD KILALVP ETIHDELQQS FQKSHNSLQR WEHLKKVASR YQNNIKNDKY GPWLEWEIML QYCFPRLDIN VSKGINHLLK SPF SVHPKT GRISVPIDLQ KVDQFDPFTV PTISFICREL DAISTNEEEK EENEAESDVK HRTRDYKKTS LAPYVKVFEH FLEN LDKSR KGELLKKSDL QKDF UniProtKB: DNA primase small subunit |
-分子 #5: DNA primase large subunit
分子 | 名称: DNA primase large subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 28.272275 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: DQRNASYPHC LQFYLQPPSE NISLIEFENL AIDRVKLLKS VENLGVSYVK GTEQYQSKLE SELRKLKFSY RENLEDEYEP RRRDHISHF ILRLAYCQSE ELRRWFIQQE MDLLRFRFSI LPKDKIQDFL KDSQLQFEAI SDEEKTLREQ EIVASSPSLS G LKLGFESI ...文字列: DQRNASYPHC LQFYLQPPSE NISLIEFENL AIDRVKLLKS VENLGVSYVK GTEQYQSKLE SELRKLKFSY RENLEDEYEP RRRDHISHF ILRLAYCQSE ELRRWFIQQE MDLLRFRFSI LPKDKIQDFL KDSQLQFEAI SDEEKTLREQ EIVASSPSLS G LKLGFESI YKIPFADALD LFRGRKVYLE DGFAYVPLKD IVAIILNEFR AKLSKALALT ARSLPAVQSD ERLQPLLNHL SH S UniProtKB: DNA primase large subunit |
-分子 #6: DNA polymerase alpha catalytic subunit
分子 | 名称: DNA polymerase alpha catalytic subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed DNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 130.472156 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: VDSSHLPLVK GADEEQVFHF YWLDAYEDQY NQPGVVFLFG KVWIESAETH VSCCVMVKNI ERTLYFLPRE MKIDLNTGKE TGTPISMKD VYEEFDEKIA TKYKIMKFKS KPVEKNYAFE IPDVPEKSEY LEVKYSAEMP QLPQDLKGET FSHVFGTNTS S LELFLMNR ...文字列: VDSSHLPLVK GADEEQVFHF YWLDAYEDQY NQPGVVFLFG KVWIESAETH VSCCVMVKNI ERTLYFLPRE MKIDLNTGKE TGTPISMKD VYEEFDEKIA TKYKIMKFKS KPVEKNYAFE IPDVPEKSEY LEVKYSAEMP QLPQDLKGET FSHVFGTNTS S LELFLMNR KIKGPCWLEV KSPQLLNQPV SWCKVEAMAL KPDLVNVIKD VSPPPLVVMA FSMKTMQNAK NHQNEIIAMA AL VHHSFAL DKAAPKPPFQ SHFCVVSKPK DCIFPYAFKE VIEKKNVKVE VAATERTLLG FFLAKVHKID PDIIVGHNIY GFE LEVLLQ RINVCKAPHW SKIGRLKRSN MPKLGGRSGF GERNATCGRM ICDVEISAKE LIRCKSYHLS ELVQQILKTE RVVI PMENI QNMYSESSQL LYLLEHTWKD AKFILQIMCE LNVLPLALQI TNIAGNIMSR TLMGGRSERN EFLLLHAFYE NNYIV PDKQ IFRKPQQKLG DEDEEIDGDT NKYKKGRKKA AYAGGLVLDP KVGFYDKFIL LLDFNSLYPS IIQEFNICFT TVQRVA SEA QKVTEDGEQE QIPELPDPSL EMGILPREIR KLVERRKQVK QLMKQQDLNP DLILQYDIRQ KALKLTANSM YGCLGFS YS RFYAKPLAAL VTYKGREILM HTKEMVQKMN LEVIYGDTDS IMINTNSTNL EEVFKLGNKV KSEVNKLYKL LEIDIDGV F KSLLLLKKKK YAALVVEPTS DGNYVTKQEL KGLDIVRRDW CDLAKDTGNF VIGQILSDQS RDTIVENIQK RLIEIGENV LNGSVPVSQF EINKALTKDP QDYPDKKSLP HVHVALWINS QGGRKVKAGD TVSYVICQDG SNLTASQRAY APEQLQKQDN LTIDTQYYL AQQIHPVVAR ICEPIDGIDA VLIATWLGLD PTQFRVHHYH KDEENDALLG GPAQLTDEEK YRDCERFKCP C PTCGTENI YDNVFDGSGT DMEPSLYRCS NIDCKASPLT FTVQLSNKLI MDIRRFIKKY YDGWLICEEP TCRNRTRHLP LQ FSRTGPL CPACMKATLQ PEYSDKSLYT QLCFYRYIFD AECALEKLTT DHEKDKLKKQ FFTPKVLQDY RKLKNTAEQF LSR SGYSEV NLSKLFAGCA VKS UniProtKB: DNA polymerase alpha catalytic subunit |
-分子 #7: DNA polymerase alpha subunit B
分子 | 名称: DNA polymerase alpha subunit B / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 50.343969 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: HQLLSPSSFS PSATPSQKYN SRSNRGEVVT SFGLAQGVSW SGRGGAGNIS LKVLGCPEAL TGSYKSMFQK LPDIREVLTC KIEELGSEL KEHYKIEAFT PLLAPAQEPV TLLGQIGCDS NGKLNNKSVI LEGDREHSSG AQIPVDLSEL KEYSLFPGQV V IMEGINTT ...文字列: HQLLSPSSFS PSATPSQKYN SRSNRGEVVT SFGLAQGVSW SGRGGAGNIS LKVLGCPEAL TGSYKSMFQK LPDIREVLTC KIEELGSEL KEHYKIEAFT PLLAPAQEPV TLLGQIGCDS NGKLNNKSVI LEGDREHSSG AQIPVDLSEL KEYSLFPGQV V IMEGINTT GRKLVATKLY EGVPLPFYQP TEEDADFEQS MVLVACGPYT TSDSITYDPL LDLIAVINHD RPDVCILFGP FL DAKHEQV ENCLLTSPFE DIFKQCLRTI IEGTRSSGSH LVFVPSLRDV HHEPVYPQPP FSYSDLSRED KKQVQFVSEP CSL SINGVI FGLTSTDLLF HLGAEEISSS SGTSDRFSRI LKHILTQRSY YPLYPPQEDM AIDYESFYVY AQLPVTPDVL IIPS ELRYF VKDVLGCVCV NPGRLTKGQV GGTFARLYLR RPAADGAERQ SPCIAVQVVR I UniProtKB: DNA polymerase alpha subunit B |
-分子 #8: DNA (5'-D(P*TP*AP*GP*GP*GP*TP*TP*AP*GP*GP*GP*TP*TP*AP*G)-3')
分子 | 名称: DNA (5'-D(P*TP*AP*GP*GP*GP*TP*TP*AP*GP*GP*GP*TP*TP*AP*G)-3') タイプ: dna / ID: 8 詳細: Residue 1-35 forms the DNA double-stranded hairpin foldback. The rest of the DNA forms the single-stranded DNA template for the enzyme to bind. コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 4.720067 KDa |
配列 | 文字列: (DT)(DA)(DG)(DG)(DG)(DT)(DT)(DA)(DG)(DG) (DG)(DT)(DT)(DA)(DG) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 5 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: CHAPSO is only added just before sample vitrification. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7794 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+
画像解析
-原子モデル構築 1
詳細 | Alphafold models were used to dock into the map before coot adjustments and phenix refinement. |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: cross coefficient |
得られたモデル | ![]() PDB-8d0b: |