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- EMDB-26549: CryoEM Structure of an Group II Intron Retroelement (apo-complex) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-26549
タイトルCryoEM Structure of an Group II Intron Retroelement (apo-complex)
マップデータApoRNP Full Consensus Map
試料
  • 複合体: Complex of RNA and protein
    • RNA: E.r IIC Intron
    • タンパク質・ペプチド: Group II intron reverse transcriptase/maturase
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: AMMONIUM ION
キーワードRNA / intron / group II / maturase / splicing / retrotransposition / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


RNA-directed DNA polymerase / RNA-directed DNA polymerase activity
類似検索 - 分子機能
Group II intron, maturase-specific / Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron, maturase-specific domain / Reverse transcriptase (RNA-dependent DNA polymerase) / Reverse transcriptase domain / Reverse transcriptase (RT) catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Group II intron reverse transcriptase/maturase
類似検索 - 構成要素
生物種[Eubacterium] rectale (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å
データ登録者Chung K / Xu L
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Science / 年: 2022
タイトル: Structures of a mobile intron retroelement poised to attack its structured DNA target.
著者: Kevin Chung / Ling Xu / Pengxin Chai / Junhui Peng / Swapnil C Devarkar / Anna Marie Pyle /
要旨: Group II introns are ribozymes that catalyze their self-excision and function as retroelements that invade DNA. As retrotransposons, group II introns form ribonucleoprotein (RNP) complexes that roam ...Group II introns are ribozymes that catalyze their self-excision and function as retroelements that invade DNA. As retrotransposons, group II introns form ribonucleoprotein (RNP) complexes that roam the genome, integrating by reversal of forward splicing. Here we show that retrotransposition is achieved by a tertiary complex between a structurally elaborate ribozyme, its protein mobility factor, and a structured DNA substrate. We solved cryo-electron microscopy structures of an intact group IIC intron-maturase retroelement that was poised for integration into a DNA stem-loop motif. By visualizing the RNP before and after DNA targeting, we show that it is primed for attack and fits perfectly with its DNA target. This study reveals design principles of a prototypical retroelement and reinforces the hypothesis that group II introns are ancient elements of genetic diversification.
履歴
登録2022年3月29日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年11月23日-
マップ公開2022年11月23日-
更新2024年6月12日-
現状2024年6月12日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_26549.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_26549.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈ApoRNP Full Consensus Map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.832 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.12
最小 - 最大-0.14539893 - 0.42524138
平均 (標準偏差)0.0006854515 (±0.014867386)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 319.488 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_26549_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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マスク #2

ファイルemd_26549_msk_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Left) Map

ファイルemd_26549_additional_1.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Left) Map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Right) Map

ファイルemd_26549_additional_2.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Right) Map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Composite Map

ファイルemd_26549_additional_3.map
注釈ApoRNP Composite Map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Left) Half Map A

ファイルemd_26549_additional_4.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Left) Half Map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Left) Half Map B

ファイルemd_26549_additional_5.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Left) Half Map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Right) Half Map A

ファイルemd_26549_additional_6.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Right) Half Map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: ApoRNP Focused Refined (Right) Half Map B

ファイルemd_26549_additional_7.map
注釈ApoRNP Focused Refined (Right) Half Map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: ApoRNP Full Consensus Half Map A

ファイルemd_26549_half_map_1.map
注釈ApoRNP Full Consensus Half Map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: ApoRNP Full Consensus Half Map B

ファイルemd_26549_half_map_2.map
注釈ApoRNP Full Consensus Half Map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Complex of RNA and protein

全体名称: Complex of RNA and protein
要素
  • 複合体: Complex of RNA and protein
    • RNA: E.r IIC Intron
    • タンパク質・ペプチド: Group II intron reverse transcriptase/maturase
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: AMMONIUM ION

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超分子 #1: Complex of RNA and protein

超分子名称: Complex of RNA and protein / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2
由来(天然)生物種: [Eubacterium] rectale (バクテリア)
分子量理論値: 250 KDa

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分子 #1: E.r IIC Intron

分子名称: E.r IIC Intron / タイプ: rna / ID: 1 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: [Eubacterium] rectale (バクテリア)
分子量理論値: 206.779859 KDa
配列文字列: GUUUGCGCGC CAUGGGCGCG CUCUAACGGG UGUAAGUCCC GAACAUGCCC AGGUAGUGGG AAAUGUAUAG CCGAACAGCA AGGGUGUCU ACUGUGAGGU GGAAUCUGAA GGAAGCUGUA AGCGAAUCUC UGGUCCGACG GACAGAAAUC GCAUAUAAGG C UAGGCUUC ...文字列:
GUUUGCGCGC CAUGGGCGCG CUCUAACGGG UGUAAGUCCC GAACAUGCCC AGGUAGUGGG AAAUGUAUAG CCGAACAGCA AGGGUGUCU ACUGUGAGGU GGAAUCUGAA GGAAGCUGUA AGCGAAUCUC UGGUCCGACG GACAGAAAUC GCAUAUAAGG C UAGGCUUC GAGUGAUAAG CUGGCAAAGA ACAGUGAAGU CUAAUAACUA CCACGUUUGU AGAAGCAGAG UAAAUGCGGC GG AUAUAUG GAGAGAAAGA GCGUGCACCU UAAGCGUGGA GGUCUCACAG AGGUUUCAUU AGCCUAGUAA CAACGAACUG UGA GAAGUC AGCCGAGCCC AUAGUAGUGA AGAAGUCUCU GUAAUGGGGA UGGAGCGAAG GGGCGAACAA UCAUUCAGUU UGAG AAUGU CUCGUAUUGC AGAAAUGACA ACAUCUGCCG UAACCAAUCG GGUAAAAGGU GGUCAAAUCA AGCGAGACGG AAAGG AAAG AACGCAUGGA CACAAGUAAU CUAAUUUCGG UUAGAUUACU ACAUCGAAAA GUGUGUUACU UGUUAAGUUG AUUGAA CCG CCGUAUACGG AACCGUACGU ACGGUGGUGU GAGAGGUCGG AAUUUCUCAA UUAAGAGAAA UUCUUCCUAC UCGAU

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分子 #2: Group II intron reverse transcriptase/maturase

分子名称: Group II intron reverse transcriptase/maturase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed DNA polymerase
由来(天然)生物種: [Eubacterium] rectale (バクテリア)
分子量理論値: 49.083914 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MDTSNLMEQI LSSDNLNRAY LQVVRNKGAE GVDGMKYTEL KEHLAKNGET IKGQLRTRKY KPQPARRVEI PKPDGGVRNL GVPTVTDRF IQQAIAQVLT PIYEEQFHDH SYGFRPNRCA QQAILTALNI MNDGNDWIVD IDLEKFFDTV NHDKLMTLIG R TIKDGDVI ...文字列:
MDTSNLMEQI LSSDNLNRAY LQVVRNKGAE GVDGMKYTEL KEHLAKNGET IKGQLRTRKY KPQPARRVEI PKPDGGVRNL GVPTVTDRF IQQAIAQVLT PIYEEQFHDH SYGFRPNRCA QQAILTALNI MNDGNDWIVD IDLEKFFDTV NHDKLMTLIG R TIKDGDVI SIVRKYLVSG IMIDDEYEDS IVGTPQGGNL SPLLANIMLN ELDKEMEKRG LNFVRYADDC IIMVGSEMSA NR VMRNISR FIEEKLGLKV NMTKSKVDRP SGLKYLGFGF YFDPRAHQFK AKPHAKSVAK FKKRMKELTC RSWGVSNSYK VEK LNQLIR GWINYFKIGS MKTLCKELDS RIRYRLRMCI WKQWKTPQNQ EKNLVKLGID RNTARRVAYT GKRIAYVCNK GAVN VAISN KRLASFGLIS MLDYYIEKCV TC

UniProtKB: Group II intron reverse transcriptase/maturase

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分子 #3: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 13 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

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分子 #4: AMMONIUM ION

分子名称: AMMONIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: NH4
分子量理論値: 18.038 Da
Chemical component information

ChemComp-NH4:
AMMONIUM ION / アンモニウム

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 5 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 297 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.3 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:

3eoh

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 434467
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3.1)
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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