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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-25928 | ||||||||||||
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タイトル | S. cerevisiae ORC bound to 84 bp ARS1 DNA and Cdc6 (state 2) with docked Orc6 N-terminal domain | ||||||||||||
マップデータ | unsharpened cryo-EM map | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | initiator / helicase loader / AAA+ ATPase / REPLICATION-DNA complex | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MCM complex loading / CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear origin of replication recognition complex / Activation of the pre-replicative complex / nucleosome organization / nuclear pre-replicative complex ...MCM complex loading / CDC6 association with the ORC:origin complex / Cul8-RING ubiquitin ligase complex / maintenance of rDNA / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear origin of replication recognition complex / Activation of the pre-replicative complex / nucleosome organization / nuclear pre-replicative complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA replication preinitiation complex / cyclin-dependent protein serine/threonine kinase inhibitor activity / mitotic DNA replication checkpoint signaling / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / silent mating-type cassette heterochromatin formation / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / Orc1 removal from chromatin / regulation of DNA replication / DNA replication origin binding / nucleosome binding / DNA replication initiation / subtelomeric heterochromatin formation / G1/S transition of mitotic cell cycle / chromosome / chromosome, telomeric region / cell division / GTPase activity / chromatin binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Schmidt JM / Yang R | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: A mechanism of origin licensing control through autoinhibition of S. cerevisiae ORC·DNA·Cdc6. 著者: Jan Marten Schmidt / Ran Yang / Ashish Kumar / Olivia Hunker / Jan Seebacher / Franziska Bleichert / 要旨: The coordinated action of multiple replicative helicase loading factors is needed for the licensing of replication origins prior to DNA replication. Binding of the Origin Recognition Complex (ORC) to ...The coordinated action of multiple replicative helicase loading factors is needed for the licensing of replication origins prior to DNA replication. Binding of the Origin Recognition Complex (ORC) to DNA initiates the ATP-dependent recruitment of Cdc6, Cdt1 and Mcm2-7 loading, but the structural details for timely ATPase site regulation and for how loading can be impeded by inhibitory signals, such as cyclin-dependent kinase phosphorylation, are unknown. Using cryo-electron microscopy, we have determined several structures of S. cerevisiae ORC·DNA·Cdc6 intermediates at 2.5-2.7 Å resolution. These structures reveal distinct ring conformations of the initiator·co-loader assembly and inactive ATPase site configurations for ORC and Cdc6. The Orc6 N-terminal domain laterally engages the ORC·Cdc6 ring in a manner that is incompatible with productive Mcm2-7 docking, while deletion of this Orc6 region alleviates the CDK-mediated inhibition of Mcm7 recruitment. Our findings support a model in which Orc6 promotes the assembly of an autoinhibited ORC·DNA·Cdc6 intermediate to block origin licensing in response to CDK phosphorylation and to avert DNA re-replication. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_25928.map.gz | 80.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-25928-v30.xml emd-25928.xml | 32.4 KB 32.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_25928_fsc.xml | 10.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_25928.png | 106.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-25928.cif.gz | 9 KB | ||
その他 | emd_25928_additional_1.map.gz emd_25928_additional_2.map.gz emd_25928_half_map_1.map.gz emd_25928_half_map_2.map.gz | 10 MB 13.6 MB 80.9 MB 81.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25928 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-25928 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_25928_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_25928_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_25928_validation.xml.gz | 17.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_25928_validation.cif.gz | 23.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25928 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-25928 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_25928.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | unsharpened cryo-EM map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.86 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: sharpened, masked cryo-EM map
ファイル | emd_25928_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | sharpened, masked cryo-EM map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: density modified cryo-EM map
ファイル | emd_25928_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | density modified cryo-EM map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map
ファイル | emd_25928_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map
ファイル | emd_25928_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : ORC in complex with ARS1 DNA and Cdc6
+超分子 #1: ORC in complex with ARS1 DNA and Cdc6
+分子 #1: Origin recognition complex subunit 1
+分子 #2: Origin recognition complex subunit 2
+分子 #3: Origin recognition complex subunit 3
+分子 #4: Origin recognition complex subunit 4
+分子 #5: Origin recognition complex subunit 5
+分子 #6: Origin recognition complex subunit 6
+分子 #9: Cell division control protein 6
+分子 #7: DNA, 84 bp ARS1
+分子 #8: DNA, 84 bp ARS1
+分子 #10: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #11: MAGNESIUM ION
+分子 #12: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 6.6 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |