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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2503 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM Structure of Isomeric Molluscan Hemocyanin Type 1 triggered by viral infection | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of isomeric Halitotis diversicolor hemocyanin type 1 triggered by AbSV | |||||||||
試料 |
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キーワード | isomeric molluscan hemocyanin / viral infection / AbSV / phenoloxidase | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Haliotis diversicolor (無脊椎動物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhu HT / Zhuang J / Feng HL / Liang RF / Wang JY / Xie LH / Zhu P | |||||||||
引用 | ジャーナル: PLoS One / 年: 2014 タイトル: Cryo-EM structure of isomeric molluscan hemocyanin triggered by viral infection. 著者: Hongtao Zhu / Jun Zhuang / Hongli Feng / Rongfeng Liang / Jiangyong Wang / Lianhui Xie / Ping Zhu / 要旨: Hemocyanins (Hcs) of arthropods and mollusks function not only as oxygen transporters, but also as phenoloxidases (POs). In invertebrates, PO is an important component in the innate immune cascade, ...Hemocyanins (Hcs) of arthropods and mollusks function not only as oxygen transporters, but also as phenoloxidases (POs). In invertebrates, PO is an important component in the innate immune cascade, where it functions as the initiator of melanin synthesis, a pigment involved in encapsulating and killing of pathogenic microbes. Although structures of Hc from several species of invertebrates have been reported, the structural basis for how PO activity is triggered by structural changes of Hc in vivo remains poorly understood. Here, we report a 6.8 Å cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of the isomeric form of hemocyanin, which was isolated from Abalone Shriveling syndrome-associated Virus (AbSV) infected abalone (Halitotis diversicolor), and build a pseudoatomic model of isomeric H. diversicolor hemocyanin 1 (HdH1). Our results show that, compared with native form of HdH1, the architecture of isomeric HdH1 turns into a more relaxed form. The interactions between certain functional units (FUs) present in the native form of Hc either decreased or were totally abolished in the isomeric form of Hc. As a result of that, native state Hc switches to its isomeric form, enabling it to play its role in innate immune responses against invading pathogens. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2503.map.gz | 226.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2503-v30.xml emd-2503.xml | 9.3 KB 9.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | EMD-2503.png | 311.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2503 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2503 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2503_validation.pdf.gz | 335 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2503_full_validation.pdf.gz | 334.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2503_validation.xml.gz | 7.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2503 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2503 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2503.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 238.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of isomeric Halitotis diversicolor hemocyanin type 1 triggered by AbSV | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.196 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Isomeric Molluscan Hemocyanin triggered by AbSV infection
全体 | 名称: Isomeric Molluscan Hemocyanin triggered by AbSV infection |
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要素 |
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-超分子 #1000: Isomeric Molluscan Hemocyanin triggered by AbSV infection
超分子 | 名称: Isomeric Molluscan Hemocyanin triggered by AbSV infection タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 8 MDa |
-分子 #1: isomeric hemocyanin type 1
分子 | 名称: isomeric hemocyanin type 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: HdH1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Haliotis diversicolor (無脊椎動物) |
分子量 | 理論値: 8 MDa |
配列 | UniProtKB: Hemocyanin isoform 1 / GO: GO: 0055114 / InterPro: Di-copper centre-containing domain superfamily |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.8 / 詳細: 20mM phosphate buffer, containing 2.5mM MgCl2 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: Blot for 4 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 125418 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: FEI |
日付 | 2012年12月1日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 2379 / 平均電子線量: 18 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 125418 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 75000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | EMAN2 was initially used for particle picking, 2D classification, projection refinement and 3D reconstruction for both normal and isomeric hemocyanins with C5 symmetry imposed. Subsequently, 57,043 isomeric hemocyanin particles were imported to Relion-1.1 for further refinement and reconstruction by applying D5 symmetry, using the reconstructed map from EMAN2 as the initial model. Xmipp-2.4 was used for the? bfactor correction to generate the final 3D reconstruction map of isomeric hemocyanin. |
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CTF補正 | 詳細: Each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: D5 (2回x5回 2面回転対称) アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.8 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, Relion-1.1, Xmipp-2.4 / 使用した粒子像数: 57043 |