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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24379 | ||||||||||||
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タイトル | Composite map of axonemal microtubule doublet in 16 nm repeat from Tetrahymena thermophila | ||||||||||||
マップデータ | Composite map of axonemal microtubule doublet in 16 nm repeat from Tetrahymena thermophila | ||||||||||||
試料 |
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生物種 | Tetrahymena thermophila (真核生物) | ||||||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.2 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Li S / Fernandez JJ / Fabritius A / Agard DA / Winey M | ||||||||||||
資金援助 | 米国, スペイン, 3件
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引用 | ジャーナル: Life Sci Alliance / 年: 2022 タイトル: Electron cryo-tomography structure of axonemal doublet microtubule from . 著者: Sam Li / Jose-Jesus Fernandez / Amy S Fabritius / David A Agard / Mark Winey / 要旨: Doublet microtubules (DMTs) provide a scaffold for axoneme assembly in motile cilia. Aside from α/β tubulins, the DMT comprises a large number of non-tubulin proteins in the luminal wall of DMTs, ...Doublet microtubules (DMTs) provide a scaffold for axoneme assembly in motile cilia. Aside from α/β tubulins, the DMT comprises a large number of non-tubulin proteins in the luminal wall of DMTs, collectively named the microtubule inner proteins (MIPs). We used cryoET to study axoneme DMT isolated from We present the structures of DMT at nanometer and sub-nanometer resolution. The structures confirm that MIP RIB72A/B binds to the luminal wall of DMT by multiple DM10 domains. We found FAP115, an MIP-containing multiple EF-hand domains, located at the interface of four-tubulin dimers in the lumen of A-tubule. It contacts both lateral and longitudinal tubulin interfaces and playing a critical role in DMT stability. We observed substantial structure heterogeneity in DMT in an knockout strain, showing extensive structural defects beyond the FAP115-binding site. The defects propagate along the axoneme. Finally, by comparing DMT structures from and , we have identified a number of conserved MIPs as well as MIPs that are unique to each organism. This conservation and diversity of the DMT structures might be linked to their specific functions. Our work provides structural insights essential for understanding the roles of MIPs during motile cilium assembly and function, as well as their relationships to human ciliopathies. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24379.map.gz | 29.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-24379-v30.xml emd-24379.xml | 11.1 KB 11.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_24379.png | 77.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24379 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24379 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_24379_validation.pdf.gz | 305.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_24379_full_validation.pdf.gz | 305 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_24379_validation.xml.gz | 4.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_24379_validation.cif.gz | 5.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24379 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24379 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24379.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 45.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite map of axonemal microtubule doublet in 16 nm repeat from Tetrahymena thermophila | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.65 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Axonemal microtubule doublet from Tetrahymena thermophile
全体 | 名称: Axonemal microtubule doublet from Tetrahymena thermophile |
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要素 |
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-超分子 #1: Axonemal microtubule doublet from Tetrahymena thermophile
超分子 | 名称: Axonemal microtubule doublet from Tetrahymena thermophile タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Tetrahymena thermophila (真核生物) / 株: B2086_2 / Organelle: Flagellum / 細胞中の位置: Cell Surface |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER/RHODIUM / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均露光時間: 0.36 sec. / 平均電子線量: 1.31 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 2.0 µm / 倍率(補正後): 18868 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 33000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.2 Å / 解像度の算出法: OTHER 詳細: This is a composite map of two constituent maps - EMD-24364 and EMD-24366 The resolution by FSC is not directly assessed 使用したサブトモグラム数: 16125 |
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抽出 | トモグラム数: 49 / 使用した粒子像数: 18762 |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |