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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of EC+EC (leading EC-focused) | |||||||||
![]() | Leading EC_map_with_sharpening by postprocesssed in Relion | |||||||||
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![]() | pol II / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | ![]() : / : / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of translational initiation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / transcription-coupled nucleotide-excision repair / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III ...: / : / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of translational initiation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / transcription-coupled nucleotide-excision repair / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / translation initiation factor binding / : / : / : / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / P-body / DNA-directed RNA polymerase activity / ribonucleoside binding / DNA-directed RNA polymerase / single-stranded DNA binding / nucleic acid binding / single-stranded RNA binding / protein dimerization activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / nucleolus / DNA binding / zinc ion binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.54 Å | |||||||||
![]() | Yang C / Murakami K | |||||||||
資金援助 | 1件
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![]() | ![]() タイトル: Structural visualization of de novo transcription initiation by Saccharomyces cerevisiae RNA polymerase II. 著者: Chun Yang / Rina Fujiwara / Hee Jong Kim / Pratik Basnet / Yunye Zhu / Jose J Gorbea Colón / Stefan Steimle / Benjamin A Garcia / Craig D Kaplan / Kenji Murakami / ![]() 要旨: Previous structural studies of the initiation-elongation transition of RNA polymerase II (pol II) transcription have relied on the use of synthetic oligonucleotides, often artificially discontinuous ...Previous structural studies of the initiation-elongation transition of RNA polymerase II (pol II) transcription have relied on the use of synthetic oligonucleotides, often artificially discontinuous to capture pol II in the initiating state. Here, we report multiple structures of initiation complexes converted de novo from a 33-subunit yeast pre-initiation complex (PIC) through catalytic activities and subsequently stalled at different template positions. We determine that PICs in the initially transcribing complex (ITC) can synthesize a transcript of ∼26 nucleotides before transitioning to an elongation complex (EC) as determined by the loss of general transcription factors (GTFs). Unexpectedly, transition to an EC was greatly accelerated when an ITC encountered a downstream EC stalled at promoter proximal regions and resulted in a collided head-to-end dimeric EC complex. Our structural analysis reveals a dynamic state of TFIIH, the largest of GTFs, in PIC/ITC with distinct functional consequences at multiple steps on the pathway to elongation. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 9.9 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 35.8 KB 35.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 7.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 67.9 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 40.6 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 9.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 31.2 MB 31.3 MB 31.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 870.8 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 870.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 13.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 19.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 7mkaMC ![]() 7meiC ![]() 7mk9C ![]() 7ml0C ![]() 7ml1C ![]() 7ml2C ![]() 7ml3C ![]() 7ml4C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Leading EC_map_with_sharpening by postprocesssed in Relion | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Leading EC map without sharpening
ファイル | emd_23888_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Leading EC_map_without_sharpening | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: EC+EC (leading EC-focused) half map 1
ファイル | emd_23888_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | EC+EC (leading EC-focused) half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: EC+EC (leading EC-focused) half map 2
ファイル | emd_23888_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | EC+EC (leading EC-focused) half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : The leading EC of complex EC+EC
+超分子 #1: The leading EC of complex EC+EC
+分子 #1: DNA (40-MER)
+分子 #2: DNA (40-MER)
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB3
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB4
+分子 #7: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC1
+分子 #8: DNA-directed RNA polymerases I,II,and III subunit RPABC2
+分子 #9: DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB7
+分子 #10: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC3
+分子 #11: DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB9
+分子 #12: DNA-directed RNA polymerases II subunit RPABC5
+分子 #13: DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB11
+分子 #14: DNA-directed RNA polymerases II subunit RPABC4
+分子 #15: RNA (5'-R(P*AP*AP*CP*UP*AP*GP*UP*UP*AP*AP*GP*AP*GP*GP*UP*U)-3')
+分子 #16: ZINC ION
+分子 #17: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 1.0 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.6 / 詳細: 20 mM HEPES PH 7.6 50 mM KoAc 5 mM DTT 2 mM MgoAc |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: LEICA EM CPC |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 1.25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.75 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.75 µm / 倍率(公称値): 81000 |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |