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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-21381 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of an acid-sensing ion channel solubilized by styrene maleic acid and in a resting state at high pH | ||||||||||||
マップデータ | Map of an acid-sensing ion channel solubilized by styrene maleic acid and in a resting state at high pH. | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | ligand-gated ion channel / acid-sensing ion channel / ASIC / ASIC1a / proton-gated ion channel / membrane protein / TRANSPORT PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 pH-gated monoatomic ion channel activity / Stimuli-sensing channels / ligand-gated sodium channel activity / cellular response to pH / protein homotrimerization / sodium ion transmembrane transport / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Gallus gallus (ニワトリ) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.65 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Yoder N / Gouaux E | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: The His-Gly motif of acid-sensing ion channels resides in a reentrant 'loop' implicated in gating and ion selectivity. 著者: Nate Yoder / Eric Gouaux / 要旨: Acid-sensing ion channels (ASICs) are proton-gated members of the epithelial sodium channel/degenerin (ENaC/DEG) superfamily of ion channels and are expressed throughout the central and peripheral ...Acid-sensing ion channels (ASICs) are proton-gated members of the epithelial sodium channel/degenerin (ENaC/DEG) superfamily of ion channels and are expressed throughout the central and peripheral nervous systems. The homotrimeric splice variant ASIC1a has been implicated in nociception, fear memory, mood disorders and ischemia. Here, we extract full-length chicken ASIC1 (cASIC1) from cell membranes using styrene maleic acid (SMA) copolymer, elucidating structures of ASIC1 channels in both high pH resting and low pH desensitized conformations by single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM). The structures of resting and desensitized channels reveal a reentrant loop at the amino terminus of ASIC1 that includes the highly conserved 'His-Gly' (HG) motif. The reentrant loop lines the lower ion permeation pathway and buttresses the 'Gly-Ala-Ser' (GAS) constriction, thus providing a structural explanation for the role of the His-Gly dipeptide in the structure and function of ASICs. #1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2020 タイトル: Conserved His-Gly motif of acid-sensing ion channels resides in a reentrant loop implicated in gating and ion selectivity 著者: Yoder N / Gouaux E | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_21381.map.gz | 244.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-21381-v30.xml emd-21381.xml | 13.9 KB 13.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_21381.png | 47.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-21381.cif.gz | 6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-21381 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-21381 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_21381_validation.pdf.gz | 480.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_21381_full_validation.pdf.gz | 480.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_21381_validation.xml.gz | 7.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_21381_validation.cif.gz | 8.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-21381 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-21381 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_21381.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 259.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map of an acid-sensing ion channel solubilized by styrene maleic acid and in a resting state at high pH. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.648 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Acid-sensing ion channel
全体 | 名称: Acid-sensing ion channel |
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要素 |
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-超分子 #1: Acid-sensing ion channel
超分子 | 名称: Acid-sensing ion channel / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Gallus gallus (ニワトリ) |
分子量 | 理論値: 180 KDa |
-分子 #1: Acid-sensing ion channel 1
分子 | 名称: Acid-sensing ion channel 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Gallus gallus (ニワトリ) |
分子量 | 理論値: 60.080324 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MMDLKVDEEE VDSGQPVSIQ AFASSSTLHG ISHIFSYERL SLKRVVWALC FMGSLALLAL VCTNRIQYYF LYPHVTKLDE VAATRLTFP AVTFCNLNEF RFSRVTKNDL YHAGELLALL NNRYEIPDTQ TADEKQLEIL QDKANFRNFK PKPFNMLEFY D RAGHDIRE ...文字列: MMDLKVDEEE VDSGQPVSIQ AFASSSTLHG ISHIFSYERL SLKRVVWALC FMGSLALLAL VCTNRIQYYF LYPHVTKLDE VAATRLTFP AVTFCNLNEF RFSRVTKNDL YHAGELLALL NNRYEIPDTQ TADEKQLEIL QDKANFRNFK PKPFNMLEFY D RAGHDIRE MLLSCFFRGE QCSPEDFKVV FTRYGKCYTF NAGQDGKPRL ITMKGGTGNG LEIMLDIQQD EYLPVWGETD ET SFEAGIK VQIHSQDEPP LIDQLGFGVA PGFQTFVSCQ EQRLIYLPPP WGDCKATTGD SEFYDTYSIT ACRIDCETRY LVE NCNCRM VHMPGDAPYC TPEQYKECAD PALDFLVEKD NEYCVCEMPC NVTRYGKELS MVKIPSKASA KYLAKKYNKS EQYI GENIL VLDIFFEALN YETIEQKKAY EVAGLLGDIG GQMGLFIGAS ILTVLELFDY AYEVIKHRLC RRGKCRKNHK RNNTD KGVA LSMDDVKRHN PCESLRGHPA GMTYAANILP HHPARGTFED FTC UniProtKB: Acid-sensing ion channel 1 |
-分子 #2: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 6 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ChemComp-NAG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.00 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 70 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: Specimen was frozen on a custom-made manual plunge apparatus in a cold room environment maintained at high humidity.. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.65 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2) / 使用した粒子像数: 48338 |
初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2) |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2) |