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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20464 | |||||||||
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タイトル | Escherichia coli RNA polymerase promoter unwinding intermediate (TRPi2) with TraR and rpsT P2 promoter | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / transcription-dna complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility ...sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / DNA-directed RNA polymerase complex / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen J / Chiu CE | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2020 タイトル: Stepwise Promoter Melting by Bacterial RNA Polymerase. 著者: James Chen / Courtney Chiu / Saumya Gopalkrishnan / Albert Y Chen / Paul Dominic B Olinares / Ruth M Saecker / Jared T Winkelman / Michael F Maloney / Brian T Chait / Wilma Ross / Richard L ...著者: James Chen / Courtney Chiu / Saumya Gopalkrishnan / Albert Y Chen / Paul Dominic B Olinares / Ruth M Saecker / Jared T Winkelman / Michael F Maloney / Brian T Chait / Wilma Ross / Richard L Gourse / Elizabeth A Campbell / Seth A Darst / 要旨: Transcription initiation requires formation of the open promoter complex (RPo). To generate RPo, RNA polymerase (RNAP) unwinds the DNA duplex to form the transcription bubble and loads the DNA into ...Transcription initiation requires formation of the open promoter complex (RPo). To generate RPo, RNA polymerase (RNAP) unwinds the DNA duplex to form the transcription bubble and loads the DNA into the RNAP active site. RPo formation is a multi-step process with transient intermediates of unknown structure. We use single-particle cryoelectron microscopy to visualize seven intermediates containing Escherichia coli RNAP with the transcription factor TraR en route to forming RPo. The structures span the RPo formation pathway from initial recognition of the duplex promoter in a closed complex to the final RPo. The structures and supporting biochemical data define RNAP and promoter DNA conformational changes that delineate steps on the pathway, including previously undetected transient promoter-RNAP interactions that contribute to populating the intermediates but do not occur in RPo. Our work provides a structural basis for understanding RPo formation and its regulation, a major checkpoint in gene expression throughout evolution. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20464.map.gz | 60 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-20464-v30.xml emd-20464.xml | 21.7 KB 21.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_20464_fsc.xml | 9.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_20464.png | 60 KB | ||
Filedesc metadata | emd-20464.cif.gz | 8.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20464 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20464 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_20464_validation.pdf.gz | 681.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_20464_full_validation.pdf.gz | 681 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_20464_validation.xml.gz | 10.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_20464_validation.cif.gz | 13.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20464 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20464 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20464.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Escherichia coli sigma70-holoenzyme bound to TraR and Wildtype rp...
+超分子 #1: Escherichia coli sigma70-holoenzyme bound to TraR and Wildtype rp...
+分子 #1: Protein TraR
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #6: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #7: DNA (85-MER)
+分子 #8: DNA (85-MER)
+分子 #9: ZINC ION
+分子 #10: CHAPSO
+分子 #11: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 80.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |