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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of the E3 ubiquitin ligase RNF213, determined by cryoEM | |||||||||
![]() | Composite unsharpened cryoEM map of RNF213, produced by a combination of local refinements of sub-domains, and used for model building and refinement | |||||||||
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![]() | E3 ubiquitin ligase / ATPase / carbohydrate-binding domain / RING domain / RZ domain / ANTIMICROBIAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() lipid ubiquitination / negative regulation of non-canonical Wnt signaling pathway / lipid droplet formation / xenophagy / Suppression of apoptosis / 転移酵素; アシル基を移すもの; アミノアシル基を移すもの / sprouting angiogenesis / regulation of lipid metabolic process / protein K63-linked ubiquitination / immune system process ...lipid ubiquitination / negative regulation of non-canonical Wnt signaling pathway / lipid droplet formation / xenophagy / Suppression of apoptosis / 転移酵素; アシル基を移すもの; アミノアシル基を移すもの / sprouting angiogenesis / regulation of lipid metabolic process / protein K63-linked ubiquitination / immune system process / protein autoubiquitination / lipid droplet / RING-type E3 ubiquitin transferase / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / Signaling by ALK fusions and activated point mutants / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / ubiquitin-dependent protein catabolic process / angiogenesis / protein ubiquitination / defense response to bacterium / nucleolus / ATP hydrolysis activity / zinc ion binding / ATP binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
![]() | Naydenova K / Randow F | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Recognition of phylogenetically diverse pathogens through enzymatically amplified recruitment of RNF213. 著者: Ana Crespillo-Casado / Prathyush Pothukuchi / Katerina Naydenova / Matthew C J Yip / Janet M Young / Jerome Boulanger / Vimisha Dharamdasani / Ceara Harper / Pierre-Mehdi Hammoudi / Elsje G ...著者: Ana Crespillo-Casado / Prathyush Pothukuchi / Katerina Naydenova / Matthew C J Yip / Janet M Young / Jerome Boulanger / Vimisha Dharamdasani / Ceara Harper / Pierre-Mehdi Hammoudi / Elsje G Otten / Keith Boyle / Mayuri Gogoi / Harmit S Malik / Felix Randow / ![]() ![]() 要旨: Innate immunity senses microbial ligands known as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs). Except for nucleic acids, PAMPs are exceedingly taxa-specific, thus enabling pattern recognition ...Innate immunity senses microbial ligands known as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs). Except for nucleic acids, PAMPs are exceedingly taxa-specific, thus enabling pattern recognition receptors to detect cognate pathogens while ignoring others. How the E3 ubiquitin ligase RNF213 can respond to phylogenetically distant pathogens, including Gram-negative Salmonella, Gram-positive Listeria, and eukaryotic Toxoplasma, remains unknown. Here we report that the evolutionary history of RNF213 is indicative of repeated adaptation to diverse pathogen target structures, especially in and around its newly identified CBM20 carbohydrate-binding domain, which we have resolved by cryo-EM. We find that RNF213 forms coats on phylogenetically distant pathogens. ATP hydrolysis by RNF213's dynein-like domain is essential for coat formation on all three pathogens studied as is RZ finger-mediated E3 ligase activity for bacteria. Coat formation is not diffusion-limited but instead relies on rate-limiting initiation events and subsequent cooperative incorporation of further RNF213 molecules. We conclude that RNF213 responds to evolutionarily distant pathogens through enzymatically amplified cooperative recruitment. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 467 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 19.8 KB 19.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 103.4 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 9.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8s24MC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite unsharpened cryoEM map of RNF213, produced by a combination of local refinements of sub-domains, and used for model building and refinement | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.921 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Human RNF213
全体 | 名称: Human RNF213 |
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要素 |
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-超分子 #1: Human RNF213
超分子 | 名称: Human RNF213 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 詳細: E3 ubiquitin ligase RNF213, human, N1045D natural variant |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 590 KDa |
-分子 #1: E3 ubiquitin-protein ligase RNF213
分子 | 名称: E3 ubiquitin-protein ligase RNF213 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: N-terminally Strep-II tagged human RNF213, N1045D natural variant コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RING-type E3 ubiquitin transferase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 596.45125 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MASWSHPQFE KGSAGSAAGS GAGWSHPQFE KENLYFQAMS MECPSCQHVS KEETPKFCSQ CGERLPPAAP IADSENNNST MASASEGEM ECGQELKEEG GPCLFPGSDS WQENPEEPCS KASWTVQESK KKKRKKKKKG NKSASSELAS LPLSPASPCH L TLLSNPWP ...文字列: MASWSHPQFE KGSAGSAAGS GAGWSHPQFE KENLYFQAMS MECPSCQHVS KEETPKFCSQ CGERLPPAAP IADSENNNST MASASEGEM ECGQELKEEG GPCLFPGSDS WQENPEEPCS KASWTVQESK KKKRKKKKKG NKSASSELAS LPLSPASPCH L TLLSNPWP QDTALPHSQA QQSGPTGQPS QPPGTATTPL EGDGLSAPTE VGDSPLQAQA LGEAGVATGS EAQSSPQFQD HT EGEDQDA SIPSGGRGLS QEGTGPPTSA GEGHSRTEDA AQELLLPESK GGSSEPGTEL QTTEQQAGAS ASMAVDAVAE PAN AVKGAG KEMKEKTQRM KQPPATTPPF KTHCQEAETK TKDEMAAAEE KVGKNEQGEP EDLKKPEGKN RSAAAVKNEK EQKN QEADV QEVKASTLSP GGGVTVFFHA IISLHFPFNP DLHKVFIRGG EEFGESKWDS NICELHYTRD LGHDRVLVEG IVCIS KKHL DKYIPYKYVI YNGESFEYEF IYKHQQKKGE YVNRCLFIKS SLLGSGDWHQ YYDIVYMKPH GRLQKVMNHI TDGPRK DLV KGKQIAAALM LDSTFSILQT WDTINLNSFF TQFEQFCFVL QQPMIYEGQA QLWTDLQYRE KEVKRYLWQH LKKHVVP LP DGKSTDFLPV DCPVRSKLKT GLIVLFVVEK IELLLEGSLD WLCHLLTSDA SSPDEFHRDL SHILGIPQSW RLYLVNLC Q RCMDTRTYTW LGALPVLHCC MELAPRHKDA WRQPEDTWAA LEGLSFSPFR EQMLDTSSLL QFMREKQHLL SIDEPLFRS WFSLLPLSHL VMYMENFIEH LGRFPAHILD CLSGIYYRLP GLEQVLNTQD VQDVQNVQNI LEMLLRLLDT YRDKIPEEAL SPSYLTVCL KLHEAICSST KLLKFYELPA LSAEIVCRMI RLLSLVDSAG QRDETGNNSV QTVFQGTLAA TKRWLREVFT K NMLTSSGA SFTYVKEIEV WRRLVEIQFP AEHGWKESLL GDMEWRLTKE EPLSQITAYC NSCWDTKGLE DSVAKTFEKC II EAVSSAC QSQTSILQGF SYSDLRKFGI VLSAVITKSW PRTADNFDDI LKHLLTLADV KHVFRLCGTD EKILANVTED AKR LIAVAD SVLTKVVGDL LSGTILVGQL ELIIKHKNQF LDIWQLREKS LSPQDEQCAV EEALDWRREE LLLLKKEKRC VDSL LKMCG NVKHLIQVDF GVLAVRHSQD LSSKRLNDTV TVRLSTSSNS QRATHYHLSS QVQEMAGKID LLRDSHIFQL FWREA AEPL SEPKEDQEAA ELLSEPEEES ERHILELEEV YDYLYQPSYR KFIKLHQDLK SGEVTLAEID VIFKDFVNKY TDLDSE LKI MCTVDHQDQR DWIKDRVEQI KEYHHLHQAV HAAKVILQVK ESLGLNGDFS VLNTLLNFTD NFDDFRRETL DQINQEL IQ AKKLLQDISE ARCKGLQALS LRKEFICWVR EALGGINELK VFVDLASISA GENDIDVDRV ACFHDAVQGY ASLLFKLD P SVDFSAFMKH LKKLWKALDK DQYLPRKLCD SARNLEWLKT VNESHGSVER SSLTLATAIN QRGIYVIQAP KGGQKISPD TVLHLILPES 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IRVENDWHRV YLV RKLSSQ RGMEFVQGLS KPGRPHQWVF PKDVVKQQGL RQDHPGQMDR YLVYGDEYKA LRDAVAKAVL ECKPLGIKTA LKAC KTPQS QQSAYFLLTL FREVAILYRS HNASLHPTPE QCEAVSKFIG ECKILSPPDI SRFATSLVDN SVPLLRAGPS DSNLD GTVT EMAIHAAAVL LCGQNELLEP LKNLAFSPAT MAHAFLPTMP EDLLAQARRW KGLERVHWYT CPNGHPCSVG ECGRPM EQS ICIDCHAPIG GIDHKPRDGF HLVKDKADRT QTGHVLGNPQ RRDVVTCDRG LPPVVFLLIR LLTHLALLLG ASQSSQA LI NIIKPPVRDP KGFLQQHILK DLEQLAKMLG HSADETIGVV HLVLRRLLQE QHQLSSRRLL NFDTELSTKE MRNNWEKE I AAVISPELEH LDKTLPTMNN LISQDKRISS NPVAKIIYGD PVTFLPHLPR KSVVHCSKIW SCRKRITVEY LQHIVEQKN GKERVPILWH FLQKEAELRL VKFLPEILAL QRDLVKQFQN VQQVEYSSIR GFLSKHSSDG LRQLLHNRIT VFLSTWNKLR RSLETNGEI NLPKDYCSTD LDLDTEFEIL LPRRRGLGLC ATALVSYLIR LHNEIVYAVE KLSKENNSYS VDAAEVTELH V ISYEVERD LTPLILSNCQ YQVEEGRETV QEFDLEKIQR QIVSRFLQGK PRLSLKGIPT LVYRHDWNYE HLFMDIKNKM AQ DSLPSSV ISAISGQLQS YSDACEVLSV VEVTLGFLST AGGDPNMQLN VYTQDILQMG DQTIHVLKAL NRCQLKHTIA LWQ FLSAHK SEQLLRLHKE PFGEISSRYK ADLSPENAKL LSTFLNQTGL DAFLLELHEM IILKLKNPQT QTEERFRPQW SLRD TLVSY MQTKESEILP EMASQFPEEI LLASCVSVWK TAAVLKWNRE MR UniProtKB: E3 ubiquitin-protein ligase RNF213 |
-分子 #2: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-ATP: |
-分子 #3: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #4: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 1 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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グリッド | モデル: UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 4.86 sec. / 平均電子線量: 29.8 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 143490 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
得られたモデル | ![]() PDB-8s24: |