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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1949 | |||||||||
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タイトル | Human dynamin 1 deltaPRD polymer stabilized with GMPPCP | |||||||||
![]() | Three-dimensional volume of deltaPRD human dynamin 1 polymer | |||||||||
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![]() | dynamin / endocytosis / GTP hydrolysis / membrane remodeling | |||||||||
機能・相同性 | ![]() clathrin coat assembly involved in endocytosis / vesicle scission / synaptic vesicle budding from presynaptic endocytic zone membrane / presynaptic endocytic zone membrane / interleukin-27-mediated signaling pathway / dynamin GTPase / chromaffin granule / regulation of vesicle size / Toll Like Receptor 4 (TLR4) Cascade / Retrograde neurotrophin signalling ...clathrin coat assembly involved in endocytosis / vesicle scission / synaptic vesicle budding from presynaptic endocytic zone membrane / presynaptic endocytic zone membrane / interleukin-27-mediated signaling pathway / dynamin GTPase / chromaffin granule / regulation of vesicle size / Toll Like Receptor 4 (TLR4) Cascade / Retrograde neurotrophin signalling / Formation of annular gap junctions / endosome organization / Gap junction degradation / photoreceptor ribbon synapse / membrane coat / response to type I interferon / negative regulation of viral genome replication / Recycling pathway of L1 / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate binding / antiviral innate immune response / endocytic vesicle / EPH-ephrin mediated repulsion of cells / clathrin-coated pit / phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate binding / MHC class II antigen presentation / photoreceptor inner segment / receptor-mediated endocytosis / cell projection / response to virus / modulation of chemical synaptic transmission / protein homooligomerization / receptor internalization / ISG15 antiviral mechanism / defense response / endocytosis / GDP binding / : / Interferon alpha/beta signaling / presynapse / Clathrin-mediated endocytosis / microtubule binding / nuclear membrane / protein homotetramerization / defense response to virus / microtubule / innate immune response / GTPase activity / glutamatergic synapse / apoptotic process / synapse / endoplasmic reticulum membrane / GTP binding / protein kinase binding / perinuclear region of cytoplasm / signal transduction / protein homodimerization activity / RNA binding / extracellular exosome / identical protein binding / membrane / nucleus / plasma membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 12.2 Å | |||||||||
![]() | Chappie JS / Mears JA / Fang S / Leonard M / Schmid SL / Milligan RA / Hinshaw JE / Dyda F | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: A pseudoatomic model of the dynamin polymer identifies a hydrolysis-dependent powerstroke. 著者: Joshua S Chappie / Jason A Mears / Shunming Fang / Marilyn Leonard / Sandra L Schmid / Ronald A Milligan / Jenny E Hinshaw / Fred Dyda / ![]() 要旨: The GTPase dynamin catalyzes membrane fission by forming a collar around the necks of clathrin-coated pits, but the specific structural interactions and conformational changes that drive this process ...The GTPase dynamin catalyzes membrane fission by forming a collar around the necks of clathrin-coated pits, but the specific structural interactions and conformational changes that drive this process remain a mystery. We present the GMPPCP-bound structures of the truncated human dynamin 1 helical polymer at 12.2 Å and a fusion protein, GG, linking human dynamin 1's catalytic G domain to its GTPase effector domain (GED) at 2.2 Å. The structures reveal the position and connectivity of dynamin fragments in the assembled structure, showing that G domain dimers only form between tetramers in sequential rungs of the dynamin helix. Using chemical crosslinking, we demonstrate that dynamin tetramers are made of two dimers, in which the G domain of one molecule interacts in trans with the GED of another. Structural comparison of GG(GMPPCP) to the GG transition-state complex identifies a hydrolysis-dependent powerstroke that may play a role in membrane-remodeling events necessary for fission. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 7.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 14.8 KB 14.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 360.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 283 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 282.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 6.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | Three-dimensional volume of deltaPRD human dynamin 1 polymer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.26 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : GMPPCP-stablized human dynamin 1 delta PRD polymer
全体 | 名称: GMPPCP-stablized human dynamin 1 delta PRD polymer |
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要素 |
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-超分子 #1000: GMPPCP-stablized human dynamin 1 delta PRD polymer
超分子 | 名称: GMPPCP-stablized human dynamin 1 delta PRD polymer / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Helical assembly of dynamin tetramers / Number unique components: 3 |
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-分子 #1: Human dynamin 1 delta PRD
分子 | 名称: Human dynamin 1 delta PRD / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Human dynamin 1 delta PRD / 詳細: contains bound GMPPCP / 集合状態: Dimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #2: Human dynamin 1 pleckstrin homology domain
分子 | 名称: Human dynamin 1 pleckstrin homology domain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Human dynamin 1 pleckstrin homology domain / 集合状態: Dimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #3: Interferon-induced GTP-binding protein Mx1
分子 | 名称: Interferon-induced GTP-binding protein Mx1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / Name.synonym: Interferon-induced GTP-binding protein Mx1 / 集合状態: Dimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
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試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM Hepes pH 7.5, 50 mM NaCl, 2 mM EGTA, 4 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mg/ml 0.4 um 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (DOPS) liposomes, 2 mM GMPPCP |
グリッド | 詳細: 400 mesh C-flat grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: Manual 手法: Absorbed samples to grids, blotted, washed with 20 mM Hepes pH 7.5, blotted and plunged. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 20 |
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温度 | 最低: 93 K / 最高: 95 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 100,000X magnification |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 平均電子線量: 10 e/Å2 / 詳細: Images were collected on CCD |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan 626 side entry cryo-stage / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
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画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 7.52 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 27.3 ° アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 12.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Spider 詳細: A total of 4,814 helical segments were incorporated by the IHRSR algorithm into the final reconstruction after 50 cycles |
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CTF補正 | 詳細: Each image using ACE2 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Chain ID: A |
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ソフトウェア | 名称: YUP |
詳細 | PDBEntryID_givenInChain. Protocol: Manual and Flexible fitting. Models were initially placed manually and initial positions were refined using the YUP.SCX method of the YUP software package |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-3zys: |
-原子モデル構築 2
初期モデル | PDB ID: Chain - Chain ID: A |
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ソフトウェア | 名称: YUP |
詳細 | PDBEntryID_givenInChain. Protocol: Manual and Flexible fitting. Models were initially placed manually and initial positions were refined using the YUP.SCX method of the YUP software package |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-3zys: |
-原子モデル構築 3
初期モデル | PDB ID: Chain - Chain ID: A |
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ソフトウェア | 名称: YUP |
詳細 | PDBEntryID_givenInChain. Protocol: Manual and Flexible fitting. Models were initially placed manually and initial positions were refined using the YUP.SCX method of the YUP software package |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-3zys: |