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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1901 | |||||||||
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タイトル | Insights into the structure of the CCR4-NOT Complex by electron microscopy | |||||||||
![]() | Map of the stained Ccr4Not core-complex. | |||||||||
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![]() | Ccr4Not core-complex / regulation of gene-expression / deadenylation | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 33.0 Å | |||||||||
![]() | Nasertorabi F / Batisse C / Diepholz M / Suck D / Bottcher B | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Insights into the structure of the CCR4-NOT complex by electron microscopy. 著者: Fariborz Nasertorabi / Claire Batisse / Meikel Diepholz / Dietrich Suck / Bettina Böttcher / ![]() 要旨: The CCR4-NOT complex is a deadenylation complex, which plays a major role for mRNA stability. The complex is conserved from yeast to human and consists of nine proteins NOT1-NOT5, CCR4, CAF1, CAF40 ...The CCR4-NOT complex is a deadenylation complex, which plays a major role for mRNA stability. The complex is conserved from yeast to human and consists of nine proteins NOT1-NOT5, CCR4, CAF1, CAF40 and CAF130. We have successfully isolated the complex using a Protein A tag on NOT1, followed by cross-linking on a glycerol gradient. All components of the complex were identified by mass spectrometry. Electron microscopy of negatively stained particles followed by image reconstruction revealed an L-shaped complex with two arms of similar length. The arms form an accessible cavity, which we think could provide an extensive interface for RNA-deadenylation. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 980.9 KB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 8.5 KB 8.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 135 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 205.8 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 204.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 4.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map of the stained Ccr4Not core-complex. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Ccr4Not core-complex
全体 | 名称: Ccr4Not core-complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: Ccr4Not core-complex
超分子 | 名称: Ccr4Not core-complex / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: Sample was fixed (Grafix) / 集合状態: Heterononamer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 800 KDa |
-分子 #1: Ccr4Not complex
分子 | 名称: Ccr4Not complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Ccr4Not complex / 詳細: The sample was fixed (Grafix) / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: Sandwich negative staining with 2% uranyl acetate |
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グリッド | 詳細: 400 mesh copper grid |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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温度 | 平均: 295 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Corrected at 200,000 times magnification |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GENERIC CCD / デジタル化 - サンプリング間隔: 14.5 µm / 実像数: 312 詳細: Micrographs were taken in pairs for random-conical tilt reconstruction ビット/ピクセル: 12 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 倍率(公称値): 27500 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt angle min: -55 |
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画像解析
詳細 | Initial reconstruction from random conical tilt data |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 33.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Spider, imagic, xmipp / 使用した粒子像数: 7000 |