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- EMDB-18596: nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-18596
タイトルnicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane
マップデータMap of acetylcholine receptor in membrane obtained from aligned volumes in helical reconstructions of tubular vesicles having different diameters and symmetry (see e.g. EMD-14942)
試料
  • 細胞器官・細胞要素: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit alphaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit deltaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit betaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit gammaアセチルコリン受容体
キーワードIon channel (イオンチャネル) / MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質)
機能・相同性
機能・相同性情報


acetylcholine-gated monoatomic cation-selective channel activity / transmembrane signaling receptor activity / postsynaptic membrane
類似検索 - 分子機能
Nicotinic acetylcholine receptor / Neurotransmitter-gated ion-channel, conserved site / Neurotransmitter-gated ion-channels signature. / Neurotransmitter-gated ion-channel transmembrane domain / Neurotransmitter-gated ion-channel transmembrane region / Neurotransmitter-gated ion-channel transmembrane domain superfamily / Neuronal acetylcholine receptor / Neurotransmitter-gated ion-channel / Neurotransmitter-gated ion-channel ligand-binding domain / Neurotransmitter-gated ion-channel ligand-binding domain superfamily / Neurotransmitter-gated ion-channel ligand binding domain
類似検索 - ドメイン・相同性
Acetylcholine receptor subunit alpha / Acetylcholine receptor subunit beta / Acetylcholine receptor subunit gamma / Acetylcholine receptor subunit delta
類似検索 - 構成要素
生物種Torpedo marmorata (エイ) / Tetronarce californica (ゴマフシビレエイ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å
データ登録者Unwin N
資金援助 英国, 1件
OrganizationGrant number
UK Research and Innovation (UKRI)MC_U105184294 英国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / : 2024
タイトル: Influence of lipid bilayer on the structure of the muscle-type nicotinic acetylcholine receptor.
著者: Nigel Unwin /
要旨: The muscle-type nicotinic acetylcholine receptor is a transmitter-gated ion channel residing in the plasma membrane of electrocytes and striated muscle cells. It is present predominantly at synaptic ...The muscle-type nicotinic acetylcholine receptor is a transmitter-gated ion channel residing in the plasma membrane of electrocytes and striated muscle cells. It is present predominantly at synaptic junctions, where it effects rapid depolarization of the postsynaptic membrane in response to acetylcholine released into the synaptic cleft. Previously, cryo-EM of intact membrane from revealed that the lipid bilayer surrounding the junctional receptor has a uniquely asymmetric and ordered structure, due to a high concentration of cholesterol. It is now shown that this special lipid environment influences the transmembrane (TM) folding of the protein. All five submembrane MX helices of the membrane-intact junctional receptor align parallel to the surface of the cholesterol-ordered lipids in the inner leaflet of the bilayer; also, the TM helices in the outer leaflet are splayed apart. However in the structure obtained from the same protein after extraction and incorporation in nanodiscs, the MX helices do not align to a planar surface, and the TM helices arrange compactly in the outer leaflet. Realignment of the MX helices of the nanodisc-solved structure to a planar surface converts their adjoining TM helices into an obligatory splayed configuration, characteristic of the junctional receptor. Thus, the form of the receptor sustained by the special lipid environment of the synaptic junction is the one that mediates fast synaptic transmission; whereas, the nanodisc-embedded protein may be like the extrajunctional form, existing in a disordered lipid environment.
履歴
登録2023年10月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年5月8日-
マップ公開2024年5月8日-
更新2024年5月8日-
現状2024年5月8日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_18596.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Map of acetylcholine receptor in membrane obtained from aligned volumes in helical reconstructions of tubular vesicles having different diameters and symmetry (see e.g. EMD-14942)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.34 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0005
最小 - 最大-0.0007659927 - 0.0014821306
平均 (標準偏差)0.000031837724 (±0.00016353911)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin2985670
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 268.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: First half map

ファイルemd_18596_half_map_1.map
注釈First half map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Second half map

ファイルemd_18596_half_map_2.map
注釈Second half map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic m...

全体名称: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane
要素
  • 細胞器官・細胞要素: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit alphaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit deltaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit betaアセチルコリン受容体
    • タンパク質・ペプチド: Acetylcholine receptor subunit gammaアセチルコリン受容体

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超分子 #1: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic m...

超分子名称: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane
タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: Postsynaptic membranes were isolated from fresh electric organ and incubated in low salt buffer to form ordered arrays of acetylcholine receptors in tubular vesicles
由来(天然)生物種: Torpedo marmorata (エイ)
分子量理論値: 290 KDa

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分子 #1: Acetylcholine receptor subunit alpha

分子名称: Acetylcholine receptor subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1
詳細: The extracellular domain is excluded from this analysis
コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Tetronarce californica (ゴマフシビレエイ)
分子量理論値: 50.168164 KDa
配列文字列: SEHETRLVAN LLENYNKVIR PVEHHTHFVD ITVGLQLIQL ISVDEVNQIV ETNVRLRQQW IDVRLRWNPA DYGGIKKIRL PSDDVWLPD LVLYNNADGD FAIVHMTKLL LDYTGKIMWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDQ QNCTMKLGIW TYDGTKVSIS P ESDRPDLS ...文字列:
SEHETRLVAN LLENYNKVIR PVEHHTHFVD ITVGLQLIQL ISVDEVNQIV ETNVRLRQQW IDVRLRWNPA DYGGIKKIRL PSDDVWLPD LVLYNNADGD FAIVHMTKLL LDYTGKIMWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDQ QNCTMKLGIW TYDGTKVSIS P ESDRPDLS TFMESGEWVM KDYRGWKHWV YYTCCPDTPY LDITYHFIMQ RIPLYFVVNV IIPCLLFSFL TGLVFYLPTD SG EKMTLSI SVLLSLTVFL LVIVELIPST SSAVPLIGKY MLFTMIFVIS SIIITVVVIN THHRSPSTHT MPQWVRKIFI DTI PNVMFF STMKRASKEK QENKIFADDI DISDISGKQV TGEVIFQTPL IKNPDVKSAI EGVKYIAEHM KSDEESSNAA EEWK YVAMV IDHILLCVFM LICIIGTVSV FAGRLIELSQ EG

UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit alpha

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分子 #2: Acetylcholine receptor subunit delta

分子名称: Acetylcholine receptor subunit delta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2
詳細: The extracellular domain is excluded from this analysis
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Tetronarce californica (ゴマフシビレエイ)
分子量理論値: 57.625711 KDa
配列文字列: VNEEERLIND LLIVNKYNKH VRPVKHNNEV VNIALSLTLS NLISLKETDE TLTSNVWMDH AWYDHRLTWN ASEYSDISIL RLPPELVWI PDIVLQNNND GQYHVAYFCN VLVRPNGYVT WLPPAIFRSS CPINVLYFPF DWQNCSLKFT ALNYDANEIT M DLMTDTID ...文字列:
VNEEERLIND LLIVNKYNKH VRPVKHNNEV VNIALSLTLS NLISLKETDE TLTSNVWMDH AWYDHRLTWN ASEYSDISIL RLPPELVWI PDIVLQNNND GQYHVAYFCN VLVRPNGYVT WLPPAIFRSS CPINVLYFPF DWQNCSLKFT ALNYDANEIT M DLMTDTID GKDYPIEWII IDPEAFTENG EWEIIHKPAK KNIYPDKFPN GTNYQDVTFY LIIRRKPLFY VINFITPCVL IS FLASLAF YLPAESGEKM STAISVLLAQ AVFLLLTSQR LPETALAVPL IGKYLMFIMS LVTGVIVNCG IVLNFHFRTP STH VLSTRV KQIFLEKLPR ILHMSRADES EQPDWQNDLK LRRSSSVGYI SKAQEYFNIK SRSELMFEKQ SERHGLVPRV TPRI GFGNN NENIAASDQL HDEIKSGIDS TNYIVKQIKE KNAYDEEVGN WNLVGQTIDR LSMFIITPVM VLGTIFIFVM GNFNH PPAK PFEGDPFDYS SDHPRCA

UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit delta

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分子 #3: Acetylcholine receptor subunit beta

分子名称: Acetylcholine receptor subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3
詳細: The extracellular domain is excluded from this analysis
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Tetronarce californica (ゴマフシビレエイ)
分子量理論値: 53.731773 KDa
配列文字列: SVMEDTLLSV LFETYNPKVR PAQTVGDKVT VRVGLTLTNL LILNEKIEEM TTNVFLNLAW TDYRLQWDPA AYEGIKDLRI PSSDVWQPD IVLMNNNDGS FEITLHVNVL VQHTGAVSWQ PSAIYRSSCT IKVMYFPFDW QNCTMVFKSY TYDTSEVTLQ H ALDAKGER ...文字列:
SVMEDTLLSV LFETYNPKVR PAQTVGDKVT VRVGLTLTNL LILNEKIEEM TTNVFLNLAW TDYRLQWDPA AYEGIKDLRI PSSDVWQPD IVLMNNNDGS FEITLHVNVL VQHTGAVSWQ PSAIYRSSCT IKVMYFPFDW QNCTMVFKSY TYDTSEVTLQ H ALDAKGER EVKEIVINKD AFTENGQWSI EHKPSRKNWR SDDPSYEDVT FYLIIQRKPL FYIVYTIIPC ILISILAILV FY LPPDAGE KMSLSISALL AVTVFLLLLA DKVPETSLSV PIIIRYLMFI MILVAFSVIL SVVVLNLHHR SPNTHTMPNW IRQ IFIETL PPFLWIQRPV TTPSPDSKPT IISRANDEYF IRKPAGDFVC PVDNARVAVQ PERLFSEMKW HLNGLTQPVT LPQD LKEAV EAIKYIAEQL ESASEFDDLK KDWQYVAMVA DRLFLYVFFV ICSIGTFSIF LDASHNVPPD NPFA

UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit beta

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分子 #4: Acetylcholine receptor subunit gamma

分子名称: Acetylcholine receptor subunit gamma / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4
詳細: The extracellular domain is excluded from this analysis
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Tetronarce californica (ゴマフシビレエイ)
分子量理論値: 56.335684 KDa
配列文字列: ENEEGRLIEK LLGDYDKRII PAKTLDHIID VTLKLTLTNL ISLNEKEEAL TTNVWIEIQW NDYRLSWNTS EYEGIDLVRI PSELLWLPD VVLENNVDGQ FEVAYYANVL VYNDGSMYWL PPAIYRSTCP IAVTYFPFDW QNCSLVFRSQ TYNAHEVNLQ L SAEEGEAV ...文字列:
ENEEGRLIEK LLGDYDKRII PAKTLDHIID VTLKLTLTNL ISLNEKEEAL TTNVWIEIQW NDYRLSWNTS EYEGIDLVRI PSELLWLPD VVLENNVDGQ FEVAYYANVL VYNDGSMYWL PPAIYRSTCP IAVTYFPFDW QNCSLVFRSQ TYNAHEVNLQ L SAEEGEAV EWIHIDPEDF TENGEWTIRH RPAKKNYNWQ LTKDDTDFQE IIFFLIIQRK PLFYIINIIA PCVLISSLVV LV YFLPAQA GGQKCTLSIS VLLAQTIFLF LIAQKVPETS LNVPLIGKYL IFVMFVSMLI VMNCVIVLNV SLRTPNTHSL SEK IKHLFL GFLPKYLGMQ LEPSEETPEK PQPRRRSSFG IMIKAEEYIL KKPRSELMFE EQKDRHGLKR VNKMTSDIDI GTTV DLYKD LANFAPEIKS CVEACNFIAK STKEQNDSGS ENENWVLIGK VIDKACFWIA LLLFSIGTLA IFLTGHFNQV PEFPF PGDP RKYVP

UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit gamma

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態helical array

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試料調製

緩衝液pH: 7
構成要素:
濃度名称
100.0 mMC2H7AsO2sodium cacodylate
1.0 mMCaCl2calcium chloride
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 支持フィルム - Film thickness: 20 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AMYLAMINE
詳細: Grids were washed extensively in chloroform and coated with additional carbon before use
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER
詳細Specimen comprises tubular vesicles which are imaged in thin ice over holes in the support film

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm
最大 デフォーカス(補正後): 2.8000000000000003 µm
最小 デフォーカス(補正後): 1.2 µm / 倍率(補正後): 104478 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm
最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm
最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 59000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
温度最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K
詳細All images taken manually: by searching at low magnification for long straight and narrow tubes, then recording in integrating mode
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 200 / 実像数: 4045 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2
詳細: Images were collected in integrating mode, 2 seconds exposure
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 160652
詳細: 160652 tube segments from 4045 selected micrographs were reduced to 107524 tube segments after 2D classification
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
詳細: Original model was a map of the tube obtained by Fourier-Bessel reconstruction
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 3次元分類クラス数: 34 / 平均メンバー数/クラス: 3162 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1)
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 再構成使用したクラス数: 34 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1)
詳細: The volumes for FSC determination were cut out from helical reconstructions of each class average
使用した粒子像数: 107524
詳細Images of appropriate helical families were selected on the basis of their FFTs, then drift-corrected and dose-weighted

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain詳細

chain_id: A, residue_range: 212-433, source_name: PDB, initial_model_type: experimental modelinitial model is of complete protein, PDB entry 7smm

chain_id: B, residue_range: 226-479, source_name: PDB, initial_model_type: experimental modelinitial model is of complete protein, PDB entry 7smm

chain_id: C, residue_range: 218-460, source_name: PDB, initial_model_type: experimental modelinitial model is of complete protein, PDB entry 7smm

chain_id: D, residue_range: 212-433, source_name: PDB, initial_model_type: experimental modelinitial model is of complete protein, PDB entry 7smm

chain_id: E, residue_range: 220-472, source_name: PDB, initial_model_type: experimental modelinitial model is of complete protein, PDB entry 7smm
詳細Refinement parameters were chosen to minimise changes to the original secondary structure
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 350
得られたモデル

PDB-8qqm:
nicotinic acetylcholine receptor in intact synaptic membrane

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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