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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1835 | |||||||||
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タイトル | The lockwasher state of the Drosophila melanogaster Mcm2-7 complex | |||||||||
![]() | Lockwasher configuration of the Drosophila melanogaster Mcm2-7 | |||||||||
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![]() | DNA replication / Helicase / AAA+ ATPase | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / 解像度: 35.0 Å | |||||||||
![]() | Costa A / Ilves I / Tamberg N / Petojevic T / Nogales E / Botchan MR / Berger JM | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: The structural basis for MCM2-7 helicase activation by GINS and Cdc45. 著者: Alessandro Costa / Ivar Ilves / Nele Tamberg / Tatjana Petojevic / Eva Nogales / Michael R Botchan / James M Berger / ![]() 要旨: Two central steps for initiating eukaryotic DNA replication involve loading of the Mcm2-7 helicase onto double-stranded DNA and its activation by GINS-Cdc45. To better understand these events, we ...Two central steps for initiating eukaryotic DNA replication involve loading of the Mcm2-7 helicase onto double-stranded DNA and its activation by GINS-Cdc45. To better understand these events, we determined the structures of Mcm2-7 and the CMG complex by using single-particle electron microscopy. Mcm2-7 adopts two conformations--a lock-washer-shaped spiral state and a planar, gapped-ring form--in which Mcm2 and Mcm5 flank a breach in the helicase perimeter. GINS and Cdc45 bridge this gap, forming a topologically closed assembly with a large interior channel; nucleotide binding further seals off the discontinuity between Mcm2 and Mcm5, partitioning the channel into two smaller pores. Together, our data help explain how GINS and Cdc45 activate Mcm2-7, indicate that Mcm2-7 loading may be assisted by a natural predisposition of the hexamer to form open rings, and suggest a mechanism by which the CMG complex assists DNA strand separation. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 966.2 KB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 11.7 KB 11.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 120.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Lockwasher configuration of the Drosophila melanogaster Mcm2-7 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Mcm2-7
全体 | 名称: Mcm2-7 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Mcm2-7
超分子 | 名称: Mcm2-7 / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: The sample was monodisperse / 集合状態: Hetero-hexamer / Number unique components: 6 |
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分子量 | 理論値: 540 KDa |
-分子 #1: Mcm2
分子 | 名称: Mcm2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Mcm2 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 100 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-分子 #2: Mcm3
分子 | 名称: Mcm3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Mcm3 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 91 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-分子 #3: Mcm4
分子 | 名称: Mcm4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / Name.synonym: Mcm4 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 97 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-分子 #4: Mcm5
分子 | 名称: Mcm5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / Name.synonym: Mcm5 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 82 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-分子 #5: Mcm6
分子 | 名称: Mcm6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / Name.synonym: Mcm6 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 92 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-分子 #6: Mcm7
分子 | 名称: Mcm7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / Name.synonym: Mcm7 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() 別称: Fruit Fly |
分子量 | 実験値: 81 KDa |
組換発現 | 生物種: Baculovirus infected insect cells |
-実験情報
-構造解析
![]() | 単粒子再構成法 |
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試料の集合状態 | particle |
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試料調製
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 12 |
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撮影 | 平均電子線量: 20 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 30000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC |
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画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 35.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Spider |
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