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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-18182 | |||||||||
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タイトル | Closed conformation of the g-tubulin ring complex nucleating microtubules | |||||||||
マップデータ | Refined map of the closed gTuRC conformation | |||||||||
試料 |
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キーワード | Microtubule / cytoskeleton / g-tubulin ring complex / tubulin / STRUCTURAL PROTEIN | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.39 Å | |||||||||
データ登録者 | Llorca O / Serna M | |||||||||
資金援助 | スペイン, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2024 タイトル: Transition of human γ-tubulin ring complex into a closed conformation during microtubule nucleation. 著者: Cláudia Brito / Marina Serna / Pablo Guerra / Oscar Llorca / Thomas Surrey / 要旨: Microtubules are essential for intracellular organization and chromosome segregation. They are nucleated by the γ-tubulin ring complex (γTuRC). However, isolated vertebrate γTuRC adopts an open ...Microtubules are essential for intracellular organization and chromosome segregation. They are nucleated by the γ-tubulin ring complex (γTuRC). However, isolated vertebrate γTuRC adopts an open conformation that deviates from the microtubule structure, raising the question of the nucleation mechanism. In this study, we determined cryo-electron microscopy structures of human γTuRC bound to a nascent microtubule. Structural changes of the complex into a closed conformation ensure that γTuRC templates the 13-protofilament microtubules that exist in human cells. Closure is mediated by a latch that interacts with incorporating tubulin, making it part of the closing mechanism. Further rearrangements involve all γTuRC subunits and the removal of the actin-containing luminal bridge. Our proposed mechanism of microtubule nucleation by human γTuRC relies on large-scale structural changes that are likely the target of regulation in cells. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_18182.map.gz | 205 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-18182-v30.xml emd-18182.xml | 28.1 KB 28.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_18182_fsc.xml | 14.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_18182.png | 131.2 KB | ||
マスクデータ | emd_18182_msk_1.map | 259.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-18182.cif.gz | 9 KB | ||
その他 | emd_18182_additional_1.map.gz emd_18182_half_map_1.map.gz emd_18182_half_map_2.map.gz | 223.7 MB 205.8 MB 205.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18182 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18182 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_18182_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_18182_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_18182_validation.xml.gz | 22 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_18182_validation.cif.gz | 29.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18182 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18182 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_18182.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 259.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Refined map of the closed gTuRC conformation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.36754 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_18182_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened map of the closed gTuRC conformation
ファイル | emd_18182_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened map of the closed gTuRC conformation | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half 2 map of the refined closed gTuRC conformation structure
ファイル | emd_18182_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half 2 map of the refined closed gTuRC conformation structure | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half 1 map of the refined closed gTuRC conformation structure
ファイル | emd_18182_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half 1 map of the refined closed gTuRC conformation structure | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : gamma-tubulin ring complex
全体 | 名称: gamma-tubulin ring complex |
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要素 |
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-超分子 #1: gamma-tubulin ring complex
超分子 | 名称: gamma-tubulin ring complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: GCP2
分子 | 名称: GCP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MSEFRIHHDV NELLSLLRVH GGDGAEVYID LLQKNRTPYV TTTVSAHSAK VKIAEFSRTP EDFLKKYDE LKSKNTRNLD PLVYLLSKLT EDKETLQYLQ QNAKERAELA AAAVGSSTTS I NVPAAASK ISMQELEELR KQLGSVATGS TLQQSLELKR KMLRDKQNKK ...文字列: MSEFRIHHDV NELLSLLRVH GGDGAEVYID LLQKNRTPYV TTTVSAHSAK VKIAEFSRTP EDFLKKYDE LKSKNTRNLD PLVYLLSKLT EDKETLQYLQ QNAKERAELA AAAVGSSTTS I NVPAAASK ISMQELEELR KQLGSVATGS TLQQSLELKR KMLRDKQNKK NSGQHLPIFP AW VYERPAL IGDFLIGAGI STDTALPIGT LPLASQESAV VEDLLYVLVG VDGRYVSAQP LAG RQSRTF LVDPNLDLSI RELVHRILPV AASYSAVTRF IEEKSSFEYG QVNHALAAAM RTLV KEHLI LVSQLEQLHR QGLLSLQKLW FYIQPAMRTM DILASLATSV DKGECLGGST LSLLH DRSF SYTGDSQAQE LCLYLTKAAS APYFEVLEKW IYRGIIHDPY SEFMVEEHEL RKERIQ EDY NDKYWDQRYT IVQQQIPSFL QKMADKILST GKYLNVVREC GHDVTCPVAK EIIYTLK ER AYVEQIEKAF NYASKVLLDF LMEEKELVAH LRSIKRYFLM DQGDFFVHFM DLAEEELR K PVEDITPPRL EALLELALRM STANTDPFKD DLKIDLMPHD LITQLLRVLA IETKQEKAM AHADPTELAL SGLEAFSFDY IVKWPLSLII NRKALTRYQM LFRHMFYCKH VERQLCSVWI SNKTAKQHS LHSAQWFAGA FTLRQRMLNF VQNIQYYMMF EVMEPTWHIL EKNLKSASNI D DVLGHHTG FLDTCLKDCM LTNPELLKVF SKLMSVCVMF TNCMQKFTQS MKLDGELGGQ TL EHSTVLG LPAGAEERAR KELARKHLAE HADTVQLVSG FEATINKFDK NFSAHLLDLL ARL SIYSTS DCEHGMASVI SRLDFNGFYT ERLERLSAER SQKATPQVPV LRGPPAPAPR VAVT AQ |
-分子 #2: GCP3
分子 | 名称: GCP3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MATPDQKSPN VLLQNLCCRI LGRSEADVAQ QFQYAVRVIG SNFAPTVERD EFLVAEKIKK ELIRQRREA DAALFSELHR KLHSQGVLKN KWSILYLLLS LSEDPRRQPS KVSSYATLFA Q ALPRDAHS TPYYYARPQT LPLSYQDRSA QSAQSSGSVG SSGISSIGLC ...文字列: MATPDQKSPN VLLQNLCCRI LGRSEADVAQ QFQYAVRVIG SNFAPTVERD EFLVAEKIKK ELIRQRREA DAALFSELHR KLHSQGVLKN KWSILYLLLS LSEDPRRQPS KVSSYATLFA Q ALPRDAHS TPYYYARPQT LPLSYQDRSA QSAQSSGSVG SSGISSIGLC ALSGPAPAPQ SL LPGQSNQ APGVGDCLRQ QLGSRLAWTL TANQPSSQAT TSKGVPSAVS RNMTRSRREG DTG GTMEIT EAALVRDILY VFQGIDGKNI KMNNTENCYK VEGKANLSRS LRDTAVRLSE LGWL HNKIR RYTDQRSLDR SFGLVGQSFC AALHQELREY YRLLSVLHSQ LQLEDDQGVN LGLES SLTL RRLLVWTYDP KIRLKTLAAL VDHCQGRKGG ELASAVHAYT KTGDPYMRSL VQHILS LVS HPVLSFLYRW IYDGELEDTY HEFFVASDPT VKTDRLWHDK YTLRKSMIPS FMTMDQS RK VLLIGKSINF LHQVCHDQTP TTKMIAVTKS AESPQDAADL FTDLENAFQG KIDAAYFE T SKYLLDVLNK KYSLLDHMQA MRRYLLLGQG DFIRHLMDLL KPELVRPATT LYQHNLTGI LETAVRATNA QFDSPEILRR LDVRLLEVSP GDTGWDVFSL DYHVDGPIAT VFTRECMSHY LRVFNFLWR AKRMEYILTD IRKGHMCNAK LLRNMPEFSG VLHQCHILAS EMVHFIHQMQ Y YITFEVLE CSWDELWNKV QQAQDLDHII AAHEVFLDTI ISRCLLDSDS RALLNQLRAV FD QIIELQN AQDAIYRAAL EELQRRLQFE EKKKQREIEG QWGVTAAEEE EENKRIGEFK ESI PKMCSQ LRILTHFYQG IVQQFLVLLT TSSDESLRFL SFRLDFNEHY KAREPRLRVS LGTR GRRSS HT |
-分子 #3: GCP4
分子 | 名称: GCP4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MIHELLLALS GYPGSIFTWN KRSGLQVSQD FPFLHPSETS VLNRLCRLGT DYIRFTEFIE QYTGHVQQQ DHHPSQQGQG GLHGIYLRAF CTGLDSVLQP YRQALLDLEQ EFLGDPHLSI S HVNYFLDQ FQLLFPSVMV VVEQIKSQKI HGCQILETVY KHSCGGLPPV ...文字列: MIHELLLALS GYPGSIFTWN KRSGLQVSQD FPFLHPSETS VLNRLCRLGT DYIRFTEFIE QYTGHVQQQ DHHPSQQGQG GLHGIYLRAF CTGLDSVLQP YRQALLDLEQ EFLGDPHLSI S HVNYFLDQ FQLLFPSVMV VVEQIKSQKI HGCQILETVY KHSCGGLPPV RSALEKILAV CH GVMYKQL SAWMLHGLLL DQHEEFFIKQ GPSSGNVSAQ PEEDEEDLGI GGLTGKQLRE LQD LRLIEE ENMLAPSLKQ FSLRVEILPS YIPVRVAEKI LFVGESVQMF ENQNVNLTRK GSIL KNQED TFAAELHRLK QQPLFSLVDF EQVVDRIRST VAEHLWKLMV EESDLLGQLK IIKDF YLLG RGELFQAFID TAQHMLKTPP TAVTEHDVNV AFQQSAHKVL LDDDNLLPLL HLTIEY HGK EHKADATQAR EGPSRETSPR EAPASGWAAL GLSYKVQWPL HILFTPAVLE KYNVVFK YL LSVRRVQAEL QHCWALQMQR KHLKSNQTDA IKWRLRNHMA FLVDNLQYYL QVDVLESQ F SQLLHQINST RDFESIRLAH DHFLSNLLAQ SFILLKPVFH CLNEILDLCH SFCSLVSQN LGPLDERGAA QLSILVKGFS RQSSLLFKIL SSVRNHQINS DLAQLLLRLD YNKYYTQAGG TLGSFGM |
-分子 #4: GCP5
分子 | 名称: GCP5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MARHGPPWSR LDAQQERDVR ELVRGVAGLQ DEADPNFQLA LNFAWSNFRF HRFLDVNSHK IEKTIEGIY EKFVIHSDLS KAASWKRLTE EFLNAPLPSI KEIKTDAHYS ILSLLLCLSD S PSNSSYVE TPRNKEVEKK DDFDWGKYLM EDEEMDIGPY MDTPNWSEES ...文字列: MARHGPPWSR LDAQQERDVR ELVRGVAGLQ DEADPNFQLA LNFAWSNFRF HRFLDVNSHK IEKTIEGIY EKFVIHSDLS KAASWKRLTE EFLNAPLPSI KEIKTDAHYS ILSLLLCLSD S PSNSSYVE TPRNKEVEKK DDFDWGKYLM EDEEMDIGPY MDTPNWSEES EEENDQQPLS RE DSGIQVD RTPLEEQDQN RKLDPCISWK DEPDDRSWLE HHVVHQYWTA RPSQFPHSLH LHS NLAAVW DQHLYSSDPL YVPDDRVLVT ETQVIRETLW LLSGVKKLFI FQLIDGKVTV RNNI IVTHL THSCLRSVLE QIAAYGQVVF RLQEFIDEVM GHSSESMLPG SGSVPKKSTE APFRT YQAF MWALYKYFIS FKEELAEIEK CIINNDTTIT LAIVVDKLAP RLSQLKVLHK VFSTGV AEV PPDTRNVVRA SHLLNTLYKA ILEYDNVGEA SEQTVSLLFS LWVETVRPYL QTVDEWI VH GHLWDGAREF IIQRNKNVPV NHRDFWYATY TLYSVSEKTE NEEKMSDNAS ASSGSDQG P SSRQHTMVSF LKPVLKQIIM AGKSMQLLKN LQCAESTTCQ AGARDAERKS LYTLFLESV QSRLRHGEDS TPQVLTEQQA TKENLMKMQS IAESHLELDD VHDPLLAINF ARMYLEQSDF HEKFAGGDV CVDRSSESVT CQTFELTLRS CLYPHIDKQY LDCCGNLMQT LKKDYRLVEY L QAMRNFFL MEGGDTMYDF YTSIFDKIRE KETWQNVSFL NVQLQEAVGQ RYPEDSSRLS IS FENVDTA KKKLPVHILD GLTLSYKVPW PVDIVISLEC QKIYNQVFLL LLQIKWAKYS LDV LLFGEL VSTAEKPRLK EGLIHEQDTV AQFGPQKEPV RQQIHRMFLL RVKLMHFVNS LHNY IMTRI LHSTGLEFQH QVEEAKDLDQ LIKIHYRYLS TIHDRCLLRE KVSFVKEAIM KVLNL ALMF ADGWQAGLGT WRMESIEKME SDFKNCHMFL VTILNKAVCR GSFPHLESLA LSLMAG MEQ S |
-分子 #5: GCP6
分子 | 名称: GCP6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MASITQLFDD LCEALLPAAK THLGQRSVNR KRAKRSLKKV AYNALFTNLF QDETQQLQPD MSKLPARNK ILMLSFDLRV GGLGPKADRL EELVEELEAA PCCPLLEVGS VLDLLVQLAG S GPPQVLPR KRDYFLNNKH VGRNVPYSGY DCDDLSVFEM DVQSLISREE ...文字列: MASITQLFDD LCEALLPAAK THLGQRSVNR KRAKRSLKKV AYNALFTNLF QDETQQLQPD MSKLPARNK ILMLSFDLRV GGLGPKADRL EELVEELEAA PCCPLLEVGS VLDLLVQLAG S GPPQVLPR KRDYFLNNKH VGRNVPYSGY DCDDLSVFEM DVQSLISREE CLCHSMIQET LQ VMEAAPG TGLPTVGLFS FGDPCGDRFE RDTRVSLFGA LVHSRTYDMD VRLGLPPVPD NAD LSGLAI KVPPSVDQWE DEGFQSASNL TPDSQSEPSV TPDVDLWEAA LTYEASKRRC WERV GCPPG HREEPYLTEA GRDAFDKFCR LHQGELQLLA GGVLQAPQPV LVKECELVKD VLNVL IGVV SATFSLCQPA QAFVVKRGVH VSGASPESIS SLLSEVAEYG TCYTRLSHFS LQPVLD SLY SKGLVFQAFT SGLRRYLQYY RACVLSTPPT LSLLTIGFLF KKLGRQLRYL AELCGVG AV LPGTCGGGPR AAFPTGVKLL SYLYQEALHN CSNEHYPVLL SLLKTSCEPY TRFIHDWV Y SGVFRDAYGE FMIQVNHEYL SFRDKLYWTH GYVLISKEVE DCVPVFLKHI AHDIYVCGK TINLLKLCCP RHYLCWSDVP VPRISVIFSL EELKEIEKDC AVYVGRMERV ARHSSVSKEE KELRMEIAK QELIAHAREA ASRVLSALSD RQMSERMALD ARKREQFQRL KEQFVKDQER R QAARQEEL DDDFSYAREL RDRERRLKSL EEELERKARQ ALVDHYSKLS AEAARREQKA LW RIQRHRL ESARLRFLLE DEKHIQEMLK AVSEAHQPQE PPDVLLSVHP QVTSPGPEHP EGG QGCDSG SAEQHSPAWD GWNRPGLLTP QPLKPLAVGA GGRGLQQAEG ARPFSDSLSI GDFL PVGPG AEPSVQTGMV PLLEVALQTI NLDLPPSAPG EAPAAASTQP SRPQEYDFST VLRPA VATS PAPGPLQAAE CSLGSSGLQL WEDSCGKMDA CGSASRETLL PSHPPRRAAL EEGSSQ PTE RLFGQVSGGG LPTGDYASEI APTRPRWNTH GHVSDASIRV GENVSDVAPT QPRWNTH GH VSNASISLGE SVSDVAPTRP RWNIHGHVSN ASIRVGENVS DVAPTRPRWN THGHVSNA S IRVGENVSDV APTRPRWNTH GHVSDASISL GESVSDMAPA RPRWNTHGHV SDASISLGE SVSDMAPTRP RWNTHGHVSD TSIRVGENVS DVAPIRSRCN THGHVSDASI SLGEPVSDVV STRPRWNTH VPIPPPHMVL GALSPEAEPN TPRPQQSPPG HTSQSALSLG AQSTVLDCGP R LPVEVGPS LSSPSSGCGE GSISVGENVS DVAPTQPWWP NTPGDSVSEE LGPGRSGDTE DL SPNWPLN SQEDTAAQSS PGRGEEAEAS AAEAQGGEQA YLAGLAGQYH LERYPDSYES MSE PPIAHL LRPVLPRAFA FPVDPQVQSA ADETAVQLSE LLTLPVLMKR SITAPLAAHI SLVN KAAVD YFFVELHLEA HYEALRHFLL MEDGEFAQSL SDLLFEKLGA GQTPGELLNP LVLNS VLSK ALQCSLHGDT PHASNLSLAL KYLPEVFAPN APDVLSCLEL RYKVDWPLNI VITEGC VSK YSGVFSFLLQ LKLMMWALKD VCFHLKRTAL LSHMAGSVQF RQLQLFKHEM QHFVKVI QG YIANQILHVT WCEFRARLAT VGDLEEIQRA HAEYLHKAVF RGLLTEKAAP VMNVIHSI F SLVLKFRSQL ISQAWGPPGG PRGAEHPNFA LMQQSYNTFK YYSHFLFKVV TKLVNRGYQ PHLEDFLLRI NFNNYYQDA |
-分子 #6: gamma-tubulin
分子 | 名称: gamma-tubulin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MPREIITLQL GQCGNQIGFE FWKQLCAEHG ISPEGIVEEF ATEGTDRKDV FFYQADDEHY IPRAVLLDL EPRVIHSILN SPYAKLYNPE NIYLSEHGGG AGNNWASGFS QGEKIHEDIF D IIDREADG SDSLEGFVLC HSIAGGTGSG LGSYLLERLN DRYPKKLVQT ...文字列: MPREIITLQL GQCGNQIGFE FWKQLCAEHG ISPEGIVEEF ATEGTDRKDV FFYQADDEHY IPRAVLLDL EPRVIHSILN SPYAKLYNPE NIYLSEHGGG AGNNWASGFS QGEKIHEDIF D IIDREADG SDSLEGFVLC HSIAGGTGSG LGSYLLERLN DRYPKKLVQT YSVFPNQDEM SD VVVQPYN SLLTLKRLTQ NADCVVVLDN TALNRIATDR LHIQNPSFSQ INQLVSTIMS AST TTLRYP GYMNNDLIGL IASLIPTPRL HFLMTGYTPL TTDQSVASVR KTTVLDVMRR LLQP KNVMV STGRDRQTNH CYIAILNIIQ GEVDPTQVHK SLQRIRERKL ANFIPWGPAS IQVAL SRKS PYLPSAHRVS GLMMANHTSI SSLFERTCRQ YDKLRKREAF LEQFRKEDMF KDNFDE MDT SREIVQQLID EYHAATRPDY ISWGTQEQ |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.9 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 310 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 46276 / 平均露光時間: 1.3 sec. / 平均電子線量: 46.276 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |