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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1786 | |||||||||
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タイトル | The subvolume averaged map of a Sec13-31 Tubule | |||||||||
![]() | This is a subvolume aveaged map corresponding to Sec13-31 tubule | |||||||||
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![]() | Secretory pathway / Cryo-electron microscopy / Cryo-electron tomography / COPII / cargo / Subvolume averaging | |||||||||
機能・相同性 | intracellular protein transport / WD40 repeat![]() | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 85.0 Å | |||||||||
![]() | ODonnell J / Maddox K / Stagg S | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: The structure of a COPII tubule. 著者: Jason O'Donnell / Kerry Maddox / Scott Stagg / ![]() 要旨: Nearly a third of all eukaryotic proteins are transported from the ER to the Golgi apparatus through the secretory pathway using COPII coated vesicles. Evidence suggests that this transport occurs ...Nearly a third of all eukaryotic proteins are transported from the ER to the Golgi apparatus through the secretory pathway using COPII coated vesicles. Evidence suggests that this transport occurs via 500-900 Å vesicles that bud from the ER membrane. It has been shown that procollagen molecules utilize the COPII proteins for transport, but it is unclear how the COPII coat can accommodate these ∼3000 Å long molecules. We now present a cryogenic electron tomographic reconstruction of a Sec13/31 tubule that is approximately 3300 Å long containing a hollow cylindrical interior that is 300 Å in diameter, dimensions that are consistent with those that are required to encapsulate a procollagen molecule wrapped in a membrane and accessory COPII components. This structure suggests a novel mechanism that the COPII coat may employ to transport elongated cargo. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 3.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 9.8 KB 9.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 55.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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注釈 | This is a subvolume aveaged map corresponding to Sec13-31 tubule | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 9.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Sec13-31 Tubule
全体 | 名称: Sec13-31 Tubule |
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要素 |
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-超分子 #1000: Sec13-31 Tubule
超分子 | 名称: Sec13-31 Tubule / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 8.1 MDa |
-分子 #1: SEC13R
分子 | 名称: SEC13R / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Sec13 / コピー数: 12 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | GO: intracellular protein transport / InterPro: WD40 repeat |
-分子 #2: SEC31L1
分子 | 名称: SEC31L1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Sec31 / コピー数: 12 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | GO: intracellular protein transport / InterPro: WD40 repeat |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | サブトモグラム平均法 |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM Tris-Cl, pH 7.5, 700 mM KOAc, 1mM MgOAc, 10mM DTT |
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グリッド | 詳細: Quantifoil 2/2, 400 mesh copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: OTHER 詳細: Vitrification instrument: FEI Vitrobot. Grid plasma cleaned for 30s with Fischione 1020 plasma cleaner using a ratio of 75-25 of Argon to oxygen, respectively. 手法: Temperature of chamber was 4 degrees C. 0 seconds drain time. Single blot. 0 mm offset. 4 ul sample applied to grid. Blot for 2.5 seconds before plunging. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM300FEG/T |
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撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 64 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 24000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Max angle: 64 ° |
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画像解析
詳細 | The subvolume motifs were selected by the program PROTOMO. Average number of tilts used in the 3D reconstructions: 250. Average tomographic tilt angle increment: 2. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 85.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: PROTOMO 詳細: The subvolume averaged Tubule was averaged from 8 motifs |