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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1763 | |||||||||
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タイトル | 3D reconstruction of the type ii secretin GspD from Vibrio cholera | |||||||||
![]() | cryoEM 3D reconstruction of the type ii secretin GspD from vibrio cholera | |||||||||
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![]() | Secretin / GspD / EpsD / type 2 secretion system / T2SS / outermembrane channel | |||||||||
機能・相同性 | Type II secretion system protein GspD, conserved site / protein secretion![]() | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 19.0 Å | |||||||||
![]() | Reichow SL / Korotkov KV / Hol WGJ / Gonen T | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structure of the cholera toxin secretion channel in its closed state. 著者: Steve L Reichow / Konstantin V Korotkov / Wim G J Hol / Tamir Gonen / ![]() 要旨: The type II secretion system (T2SS) is a macromolecular complex spanning the inner and outer membranes of Gram-negative bacteria. Remarkably, the T2SS secretes folded proteins, including multimeric ...The type II secretion system (T2SS) is a macromolecular complex spanning the inner and outer membranes of Gram-negative bacteria. Remarkably, the T2SS secretes folded proteins, including multimeric assemblies such as cholera toxin and heat-labile enterotoxin from Vibrio cholerae and enterotoxigenic Escherichia coli, respectively. The major outer membrane T2SS protein is the 'secretin' GspD. Cryo-EM reconstruction of the V. cholerae secretin at 19-Å resolution reveals a dodecameric structure reminiscent of a barrel, with a large channel at its center that contains a closed periplasmic gate. The GspD periplasmic domain forms a vestibule with a conserved constriction, and it binds to a pentameric exoprotein and to the trimeric tip of the T2SS pseudopilus. By combining our results with structures of the cholera toxin and T2SS pseudopilus tip, we provide a structural basis for a possible secretion mechanism of the T2SS. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 10.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 9 KB 9 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() ![]() | 52.9 KB 35.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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注釈 | cryoEM 3D reconstruction of the type ii secretin GspD from vibrio cholera | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.54 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Type ii secretin GspD from Vibrio cholera
全体 | 名称: Type ii secretin GspD from Vibrio cholera |
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要素 |
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-超分子 #1000: Type ii secretin GspD from Vibrio cholera
超分子 | 名称: Type ii secretin GspD from Vibrio cholera / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Dodecamer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 900 KDa / 理論値: 900 KDa / 手法: Size-exclusion chromatography |
-分子 #1: General Secretion Protein D
分子 | 名称: General Secretion Protein D / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: GspD / コピー数: 12 / 集合状態: Dodecamer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 実験値: 900 KDa / 理論値: 900 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | GO: protein secretion InterPro: Type II secretion system protein GspD, conserved site |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.05 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.8 詳細: 20mM Tris-HCl pH 7.8, 300mM NaCl, N-dodecyl-N,N-dimethylammonio-1-propanesulfonate (SB3-12) |
グリッド | 詳細: Holey carbon grid with cont. carbon overlayed |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot / 手法: Blot with filter paper and plunge to liquid ethane |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM デジタル化 - スキャナー: NIKON SUPER COOLSCAN 9000 デジタル化 - サンプリング間隔: 6.9 µm 詳細: Images were binned 2 times after scanning to yield a final pixel size of 2.54 angstrom |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 51159 / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | Particles were selected by hand |
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CTF補正 | 詳細: CTFTILT |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C12 (12回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 19.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: FREALIGN / 使用した粒子像数: 10000 |