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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-17625 | |||||||||||||||
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タイトル | cAMP-bound SpSLC9C1 in lipid nanodiscs, protomer state 2 | |||||||||||||||
マップデータ | deepEMhancer sharpened map of cAMP-bound SpSLC9C1, monomeric state 2 | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | SLC9 / NHE / sperm-specific / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 potassium:proton antiporter activity / sperm head / sodium:proton antiporter activity / sodium ion import across plasma membrane / cGMP binding / single fertilization / sperm flagellum / cAMP binding / cAMP-mediated signaling / potassium ion transmembrane transport ...potassium:proton antiporter activity / sperm head / sodium:proton antiporter activity / sodium ion import across plasma membrane / cGMP binding / single fertilization / sperm flagellum / cAMP binding / cAMP-mediated signaling / potassium ion transmembrane transport / regulation of intracellular pH / protein homodimerization activity / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Strongylocentrotus purpuratus (ムラサキウニ) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.74 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Kalienkova V / Peter M / Rheinberger J / Paulino C | |||||||||||||||
資金援助 | オランダ, スイス, 4件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2023 タイトル: Structures of a sperm-specific solute carrier gated by voltage and cAMP. 著者: Valeria Kalienkova / Martin F Peter / Jan Rheinberger / Cristina Paulino / 要旨: The newly characterized sperm-specific Na/H exchanger stands out by its unique tripartite domain composition. It unites a classical solute carrier unit with regulatory domains usually found in ion ...The newly characterized sperm-specific Na/H exchanger stands out by its unique tripartite domain composition. It unites a classical solute carrier unit with regulatory domains usually found in ion channels, namely, a voltage-sensing domain and a cyclic-nucleotide binding domain, which makes it a mechanistic chimera and a secondary-active transporter activated strictly by membrane voltage. Our structures of the sea urchin SpSLC9C1 in the absence and presence of ligands reveal the overall domain arrangement and new structural coupling elements. They allow us to propose a gating model, where movements in the voltage sensor indirectly cause the release of the exchanging unit from a locked state through long-distance allosteric effects transmitted by the newly characterized coupling helices. We further propose that modulation by its ligand cyclic AMP occurs by means of disruption of the cytosolic dimer interface, which lowers the energy barrier for S4 movements in the voltage-sensing domain. As SLC9C1 members have been shown to be essential for male fertility, including in mammals, our structure represents a potential new platform for the development of new on-demand contraceptives. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_17625.map.gz | 92 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-17625-v30.xml emd-17625.xml | 21.1 KB 21.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_17625_fsc.xml | 10.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_17625.png | 79.2 KB | ||
マスクデータ | emd_17625_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-17625.cif.gz | 6.3 KB | ||
その他 | emd_17625_additional_1.map.gz emd_17625_half_map_1.map.gz emd_17625_half_map_2.map.gz | 80.4 MB 80.6 MB 80.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17625 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17625 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_17625_validation.pdf.gz | 632.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_17625_full_validation.pdf.gz | 631.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_17625_validation.xml.gz | 17.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_17625_validation.cif.gz | 23.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17625 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17625 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17625.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | deepEMhancer sharpened map of cAMP-bound SpSLC9C1, monomeric state 2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.022 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_17625_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: refined map of cAMP-bound SpSLC9C1, monomeric state 2
ファイル | emd_17625_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | refined map of cAMP-bound SpSLC9C1, monomeric state 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_17625_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_17625_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : SpSLC9C1
全体 | 名称: SpSLC9C1 |
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要素 |
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-超分子 #1: SpSLC9C1
超分子 | 名称: SpSLC9C1 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Strongylocentrotus purpuratus (ムラサキウニ) |
分子量 | 理論値: 300 KDa |
-分子 #1: SpSLC9C1
分子 | 名称: SpSLC9C1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Strongylocentrotus purpuratus (ムラサキウニ) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MSKKRVVKLR ELVPAVAALA VAVLIQSATG SSGGSGHTPT TQATHADDHD LTTHNGTEEH DDGHDDGHDD LHAHAPKVIV FISGSCLFGA ISRSLFKKLP IPYTVVLLIL GAILGVVASN VPLVEEHTRD VAHMDPHVLL QIFLPVLIFE SAFAMDVHTF MRSFSQVCIL ...文字列: MSKKRVVKLR ELVPAVAALA VAVLIQSATG SSGGSGHTPT TQATHADDHD LTTHNGTEEH DDGHDDGHDD LHAHAPKVIV FISGSCLFGA ISRSLFKKLP IPYTVVLLIL GAILGVVASN VPLVEEHTRD VAHMDPHVLL QIFLPVLIFE SAFAMDVHTF MRSFSQVCIL ALFGLVVASV LTAVLAMNLF NYNWNFSEAM MFGAIMSATD PVAVVALLKD LGASKQLGTI IEGESLLNDG CAIVIFNVFM KMVFFPQLTS TVGQNVLYFL QVAVAGPLWG YAVAKVTVFF LSHIFNDALV EITITLAATY LTYYIGDIWL EVSGVLAVVV LGLIVNAEKT SISPEVEVFL HRFWEMLAYL ANTLIFMMVG VVVTQKALVA VDKMDWFYLI ILYLAITIIR GMVISLFSPI LSRIGYGLTW RNAVIMTWGG LRGAVGLALA LVVENLAGND VIGSKFLFHT AGIVVLTLVI NATTIQTLLR ILGMSDISIP KRLAMAGAVR RIHEGQNRTL NMLKSDRFLA DADWDIATAA CEISDPYSAL SDDENAPADE LTLGERKSVC PGCKAMVPNE PSPREFADMM EEARLRMLKA EKISYWKQFE HGMLAREALR LLVQHAEVAA DEKDQFILVD DLKKSWQIKG IYPWLKRKLE DLISEKKIAA IPMPKYKLGK LMYKICHHMA FEVTINIAIV LNIVPIIMEF VVQDKMASVS TMAAPGSTVS SEPSSLQKIE DALRISNYVF FVIYAIEAIV KILGLGRHYI VSHWNKFDAF ILVVALVDII IAETLLKGSI TINLSSIKVV KLFRLLRGLR MLRLTKALIP KLILVVNGKI NNQLSLGYDV GKGYIIGEEE VGKIIDRMVD NKKILRELKH ISETGRLQVV KELGLLQREH PGIAVSVKTR QAIRTILNHS RETIHELQGA GLLDEMEAHK LELTVEIKMK RLMNAPSSIP PPPPENLLKN VSWLAGDMKL IDFIKARASL LHFDYGEVIV REGDESDGLF LIVSGLVKLY GKSAFLDHDN PPVTAGSEEN EVFEDYLTVG NVIGEMGVLT KKPRNATVTC ETTVQVYFIT AEDMNIAIDT FTLYPSLEYR LWRVVAIRIA TPLIMEQMAF QGWTQEKVKL HLERGYLVDL AESHFQFNID ATLEDVILIN GTAYNAHTRE EIRSPCLISR TVHKLTFQYT ATEEPRLFVV RNAEYNGPIL DGRLDVDSKR SLISITEISS NMCLKHAAEL RQKNSKVMLS RKSSGAAAKE EEDCIPNTSD VEQAAGVSPS VPTKTTPKPK SFLPSLGLSM SKERVNGEAV EESPVKTKQG EETPETEEGA APRVNVALEV LFQ UniProtKB: Sperm-specific sodium:proton exchanger |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 11.46 mg/mL | ||||||||
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緩衝液 | pH: 7.6 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 詳細: at 5 mA | ||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 288.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-60 / 撮影したグリッド数: 4 / 実像数: 25363 / 平均露光時間: 9.0 sec. / 平均電子線量: 52.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |