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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-17440 | |||||||||
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タイトル | Photorhabdus luminescens Makes caterpillars floppy (Mcf) toxin | |||||||||
マップデータ | Composite map used for model building | |||||||||
試料 |
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キーワード | Bacterial toxin / TOXIN | |||||||||
機能・相同性 | TcdA/TcdB toxin, pore forming domain / TcdA/TcdB pore forming domain / Toxin protein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Photorhabdus luminescens (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Belyy A / Heilen P / Hofnagel O / Raunser S | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Structure and activation mechanism of the Makes caterpillars floppy 1 toxin. 著者: Alexander Belyy / Philipp Heilen / Philine Hagel / Oliver Hofnagel / Stefan Raunser / 要旨: The bacterial Makes caterpillars floppy 1 (Mcf1) toxin promotes apoptosis in insects, leading to loss of body turgor and death. The molecular mechanism underlying Mcf1 intoxication is poorly ...The bacterial Makes caterpillars floppy 1 (Mcf1) toxin promotes apoptosis in insects, leading to loss of body turgor and death. The molecular mechanism underlying Mcf1 intoxication is poorly understood. Here, we present the cryo-EM structure of Mcf1 from Photorhabdus luminescens, revealing a seahorse-like shape with a head and tail. While the three head domains contain two effectors, as well as an activator-binding domain (ABD) and an autoprotease, the tail consists of two putative translocation and three putative receptor-binding domains. Rearrangement of the tail moves the C-terminus away from the ABD and allows binding of the host cell ADP-ribosylation factor 3, inducing conformational changes that position the cleavage site closer to the protease. This distinct activation mechanism that is based on a hook-loop interaction results in three autocleavage reactions and the release of two toxic effectors. Unexpectedly, the BH3-like domain containing ABD is not an active effector. Our findings allow us to understand key steps of Mcf1 intoxication at the molecular level. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_17440.map.gz | 10.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-17440-v30.xml emd-17440.xml | 16.2 KB 16.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_17440.png | 64.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-17440.cif.gz | 7.2 KB | ||
その他 | emd_17440_additional_1.map.gz | 124.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17440 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17440 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_17440_validation.pdf.gz | 349 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_17440_full_validation.pdf.gz | 348.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_17440_validation.xml.gz | 4.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_17440_validation.cif.gz | 4.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17440 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17440 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8p52MC 8p50C 8p51C C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17440.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 236.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite map used for model building | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.9 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: DeepEMhanced composite map
ファイル | emd_17440_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | DeepEMhanced composite map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Photorhabdus luminescens Makes caterpillars floppy (Mcf) toxin
全体 | 名称: Photorhabdus luminescens Makes caterpillars floppy (Mcf) toxin |
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要素 |
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-超分子 #1: Photorhabdus luminescens Makes caterpillars floppy (Mcf) toxin
超分子 | 名称: Photorhabdus luminescens Makes caterpillars floppy (Mcf) toxin タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Photorhabdus luminescens (バクテリア) |
-分子 #1: Toxin protein
分子 | 名称: Toxin protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Photorhabdus luminescens (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 329.440219 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH SEQKLISEED LSMASISKDF TNLLNTLIDG QIGAASRQTE WFNMSPDERT DYIKQVDERL QEMQQSTLS VLAAQHFQMQ DNPVSVGDQL QTLQKRRQQM TDVPGTPAIN AYKQQLDRDI LLYRRQQTAM THFDSTWRKV L VMLGPDDS ...文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH SEQKLISEED LSMASISKDF TNLLNTLIDG QIGAASRQTE WFNMSPDERT DYIKQVDERL QEMQQSTLS VLAAQHFQMQ DNPVSVGDQL QTLQKRRQQM TDVPGTPAIN AYKQQLDRDI LLYRRQQTAM THFDSTWRKV L VMLGPDDS KPLNATTLRE NAVDKQAKLD TEIKRLEQQL TIQVADSTFS QKYVTLFSEL QAYKDVNARY NALLKASATE EA AALGALT KVPQASDDLP VNISLLMMEE RPGYIRMNVA LVNASTDGRF KDFFLENGRL VVLTDGVLNF SFGTAARSLA WQQ QYRLKS EPPSFRSPTY TPIRSVLVKT EFVEKYFANY LVSESTLRGG FKAQLLGNGR KMLLTSVDRK VPNQIGIQVS GQAP NTTIT REVPLASALS DLINQNADIA SFRTIGLEGF RQSSYHPDRD GLFVNIHELE RSVGFAGRQY LLEMPQDNDY LSATP FGVM SVDGDKVSSS HLSKAQTDTL YQYNAAFFEK LEQLRSGGMK ASRLFEGSIE RTAFVQQLVR LLERNHITPA GVLAPE YPR DNMRDIKGNN LNKVLWEQAF AASVWRSRDN DPLLFRLATR LVKNPAVVKV LQNGYVQSDI AQARELLAPL YEQWRTR AV EAETQRVASA NAAQHPSNPK VHVFDQAEVE RSLDDKLLIL LLTGPQSLEG TDVQLRPMVE AALLSNEGRS LRKQILFH A LRPVADSFSK AAAPVNPHAE LGVGKIMINN RLNQPDPYLI LNTSSEEQAY RDGSYLIKDD KYRSYNQFRP DFKNDATRY MNDLDTPFVG GISGTTQTVS NVLTELFGGA LSVKQYWQFQ MANAAFMIRN GYHSFFETFY VAARYEPEGA DSIGKEMLQM FDKYRVEGS KKALQGKLYD GVMARVLPII NQGLSAADEF HPPRFTRIGP RPALLGQAVK DLELKAGLTS VGDGFEPRQG S ADIHQFVT DPVLFAKTHT VSAEALVRSG RLPAEGSAQL VKVGSGLYEL EYTEQSANDI SSSSIPAYFL GYNGPNQANA VP AYVDIPK RTIAGNFLFT GTLSGGSLVV TSLDANTFRV YHDGRVNSSL LYDNVVMAVD YKDYQIAGTA EGLAAAYMQY VNH EWQLVL QRQEYQRDGQ MLRLRLRDDE EPLSIQVADS QVVERNQAQF VAYREQIHQQ LKKVATQFEV SISGVSDGVY TEGE FSPDH PAIAAWAKLC AEVYDRINAD TKQLVDKRNK LYENRRNTIR RDLINQQIKQ LNITLEYYKA QYDTVLREAG FVEQS WLWQ QIKAKNGSAA VVRIDDTAIQ GGGKQRTDSV GERYAISEAY QRGARGTGFS DGLRNFREIE IPGVDDKMSA LEMKRL FLE GKLTSEQQGA LSGRITETSR AEYIDKVLRQ TAVFSEDFHD AGSVFDRLVP QDFYLSLVGD RSGGRCYPLV RAMTVAL AS GGEAGINSLV QKLFFASADP QAGSSTLLRN SLIKLHSNVE AVQASTELGQ FGLSEVVSRL AATTGTSMFA LNTQNHSM M VGSTVTTEGR RYYFYDPNVG IFAFDNTKSL SRAMEQHLVG RRLAVHYGSF GSKSAPAFNL IEIDTGKMAE VPVGNGLNV ADLTRFEELS SVIGQRRQVE QVMSAQERIT EDLQLSTALQ AFDAEQWGAR FEAASTRLAQ EHQLDSRWLP IIATTEEQGE GRYRVQFIN RDQPEQTRWL DTDDSTFVEF RRFVDEHMSV LNEHFTLESG RMRPRGGVGE AAPVDGLNAG FAVQALIQWF S DKNRHDAA NGMASPDLAT ALKVHSYLNF VQMVHGGVQD VIKVTALVRT ALRGEVVAAQ TSFKEFALSL GHTVNEGVGV LF GGAMIGL DAYELAHAEN DVQKAVFGTQ LAFDSASFVT GAAGIGAGLV GASTAGAVLG GAGVILGGLA VGFTALAQAF GAV AEDAKA VGRYFDTVDK AYKGNGYRYD NEKQVLVPLA GAVIKTLDLS KNQIDFDSQY IYRTHSGSTG SGKINYFFWV GDFP RMVHD RGQAIEVRSG IGYKDVSRPL EHGDSNVVIL PGTPKSYISY EYMLLPGATT RHDAGFDVIR RLEEDKRFDY DFYIF PGEE TIRRIHHEYV DTPIEVVLDQ RNRQLVAPEL PKELHGFLCY EIKGAGGEYL IGLNEGAKVN LTSDVASTWI IDSSQL ASD SISVSKDQLL VGEKGKEVVV KLYLAQNSQV LVVNGKGEVR KVDFTSLTAQ VISEDASKWQ VPGQQIEQHL SDLAKAH QL HGQYVVVENY RHQGRDVGRA FYDVTKDRML FTDTTNEQAK RAQLGAVMGD YAYFYDADNA VAWRVDIATG QVDAQFEP W FNQNAGHISR FWQEGDVVYL ARRYRLKERE AELGYRIIGD RMELVSAVGD DALLQLSARI GRHGDELEAI LQGYRSNST QRGTLMYTLG ARLIQPTSAA LVTVFGVDAA GVPHRYWIRT SDGTLIKPNL APPADQTLHF EAHEQTRSAW QIPADLVLAG SMPLLGGKE VFFFYSKEQK TLFRQEGPGQ EVLDANQPSA LRVTTPALTN VINLNGHLVV VTEDGRVARL DALGQLSYAA V NEHWLKGR IHWWQDLTSV TDGRATLAVF GVKDTDGKSL LPVWYHNGQV VVASAALQDK HPQFLGFEVD GSSARLFEPA SG KLYRQPA MTADALAAAF GTDEVLEASA QLPAANELEP ELHLKAAEQV DAGLRLTTVK GEILLRTHDG KLQLVAVDKD WQQ DNLVRL SQALAEVAGQ WRVKGVLTLQ GDDTQGWFDV GSGQVFSIGG IPATDNLRFI GIAVGKKGAY VYNPTDQMLY QVKE SGAQK LNHYADVERI GSSLLLQDGG KGDLSPMLIA GVDSVVLHGG AGSDTYRLSQ TMWSYYRTVV IDNDDPNQVL DRLII LAVD AEKIFVSRHE DDLMLTDSVN GTVLVIRKVF GSQAVTHRHL QIDLEGSSSV ISVDHLVKGF TRLGTANIGL FELPWA IEL DYKDDDDK UniProtKB: Toxin protein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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グリッド | モデル: C-flat-2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 21741 / 平均電子線量: 70.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPHIRE / 使用した粒子像数: 363044 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: SPHIRE |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: SPHIRE |
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-8p52: |