+
データを開く
-
基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | CryoEM structure of 20S Trichomonas vaginalis proteasome in complex with proteasome inhibitor CP-17 | |||||||||
マップデータ | CryoEM map of 20S Trichomonas vaginalis proteasome in complex with proteasome inhibitor CP-17 | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | Proteasome / 20S / Trichomonas vaginalis / covalently bound protease inhibitor CP-17 / HYDROLASE | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報proteasome endopeptidase complex / proteasome core complex, beta-subunit complex / threonine-type endopeptidase activity / proteasome core complex, alpha-subunit complex / endopeptidase activity / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Trichomonas vaginalis G3 (ちつほねまくむし) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.65 Å | |||||||||
データ登録者 | Silhan J / Boura E / Fajtova P | |||||||||
| 資金援助 | European Union, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024タイトル: Structural elucidation of recombinant Trichomonas vaginalis 20S proteasome bound to covalent inhibitors. 著者: Jan Silhan / Pavla Fajtova / Jitka Bartosova / Brianna M Hurysz / Jehad Almaliti / Yukiko Miyamoto / Lars Eckmann / William H Gerwick / Anthony J O'Donoghue / Evzen Boura / ![]() 要旨: The proteasome is a proteolytic enzyme complex essential for protein homeostasis in mammalian cells and protozoan parasites like Trichomonas vaginalis (Tv), the cause of the most common, non-viral ...The proteasome is a proteolytic enzyme complex essential for protein homeostasis in mammalian cells and protozoan parasites like Trichomonas vaginalis (Tv), the cause of the most common, non-viral sexually transmitted disease. Tv and other protozoan 20S proteasomes have been validated as druggable targets for antimicrobials. However, low yields and purity of the native proteasome have hindered studies of the Tv 20S proteasome (Tv20S). We address this challenge by creating a recombinant protozoan proteasome by expressing all seven α and seven β subunits of Tv20S alongside the Ump-1 chaperone in insect cells. The recombinant Tv20S displays biochemical equivalence to its native counterpart, confirmed by various assays. Notably, the marizomib (MZB) inhibits all catalytic subunits of Tv20S, while the peptide inhibitor carmaphycin-17 (CP-17) specifically targets β2 and β5. Cryo-electron microscopy (cryo-EM) unveils the structures of Tv20S bound to MZB and CP-17 at 2.8 Å. These findings explain MZB's low specificity for Tv20S compared to the human proteasome and demonstrate CP-17's higher specificity. Overall, these data provide a structure-based strategy for the development of specific Tv20S inhibitors to treat trichomoniasis. | |||||||||
| 履歴 |
|
-
構造の表示
| 添付画像 |
|---|
-
ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_17337.map.gz | 323.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-17337-v30.xml emd-17337.xml | 33.9 KB 33.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_17337_fsc.xml | 14.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_17337.png | 158.7 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-17337.cif.gz | 9.1 KB | ||
| その他 | emd_17337_half_map_1.map.gz emd_17337_half_map_2.map.gz | 318.2 MB 318.2 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17337 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17337 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_17337_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_17337_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_17337_validation.xml.gz | 24.1 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_17337_validation.cif.gz | 31.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17337 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17337 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 8p0tMC ![]() 8oixC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
-
マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17337.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 343 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | CryoEM map of 20S Trichomonas vaginalis proteasome in complex with proteasome inhibitor CP-17 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-ハーフマップ: CryoEM half map A of 20S Trichomonas vaginalis...
| ファイル | emd_17337_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | CryoEM half map A of 20S Trichomonas vaginalis proteasome in complex with proteasome inhibitor CP-17 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: CryoEM half map B of 20S Trichomonas vaginalis...
| ファイル | emd_17337_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | CryoEM half map B of 20S Trichomonas vaginalis proteasome in complex with proteasome inhibitor CP-17 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-
試料の構成要素
+全体 : Ternary complex of 20S proteasome from Trichomonas vaginalis
+超分子 #1: Ternary complex of 20S proteasome from Trichomonas vaginalis
+分子 #1: Family T1, proteasome alpha subunit, threonine peptidase
+分子 #2: Family T1, proteasome alpha subunit, threonine peptidase
+分子 #3: Proteasome subunit alpha type
+分子 #4: Proteasome subunit alpha type
+分子 #5: Proteasome subunit alpha type
+分子 #6: Family T1, proteasome alpha subunit, threonine peptidase
+分子 #7: Family T1, proteasome alpha subunit, threonine peptidase
+分子 #8: Proteasome subunit beta
+分子 #9: proteasome endopeptidase complex
+分子 #10: Proteasome subunit beta
+分子 #11: Proteasome subunit beta
+分子 #12: Proteasome subunit beta
+分子 #13: Proteasome subunit beta
+分子 #14: Family T1, proteasome beta subunit, threonine peptidase
+分子 #15: N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(1S)-1-[(2S,3R,5S,6R)-3-(hydroxymethyl)-5-me...
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 濃度 | 1 mg/mL | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
| |||||||||
| グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. | |||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7983 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
Trichomonas vaginalis G3 (ちつほねまくむし)
データ登録者
引用








Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)





































解析
FIELD EMISSION GUN

