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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1711 | ||||||||||||
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タイトル | Pyrococcus furiosus RNA Polymerase | ||||||||||||
![]() | Pyrococus furiosus RNA Polymerase, threshold masked map, gaussian filtered to 13 Angstrom | ||||||||||||
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![]() | Archaea / RNA Polymerase | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.0 Å | ||||||||||||
![]() | Kusser AG / Bertero MG / Naji S / Becker T / Thomm M / Beckmann R / Cramer P | ||||||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structure of an archaeal RNA polymerase. 著者: Anselm G Kusser / Michela G Bertero / Souad Naji / Thomas Becker / Michael Thomm / Roland Beckmann / Patrick Cramer / ![]() 要旨: Related multisubunit RNA polymerases (RNAPs) carry out gene transcription in all kingdoms of life. Since structural information is limited to bacterial and eukaryotic RNAPs, we determined the cryo- ...Related multisubunit RNA polymerases (RNAPs) carry out gene transcription in all kingdoms of life. Since structural information is limited to bacterial and eukaryotic RNAPs, we determined the cryo-electron microscopic structure of the RNAP from the thermophilic archaeon Pyrococcus furiosus at 13 A resolution. Comparison with eukaryotic RNAP II reveals a conserved architecture, no homologues for subunits Rpb8 and Rpb9, and significant deviation in the polymerase foot, jaws, pore, and protrusion. The structural organization of the archaeal RNA polymerase serves as a reference for future structure-function analysis of the transcription mechanism and allows for evolutionary comparisons. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 21.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 9.5 KB 9.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 86.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Pyrococus furiosus RNA Polymerase, threshold masked map, gaussian filtered to 13 Angstrom | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.2375 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Endogeneous RNA Polymerase from Pyrococcus furiosus
全体 | 名称: Endogeneous RNA Polymerase from Pyrococcus furiosus |
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要素 |
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-超分子 #1000: Endogeneous RNA Polymerase from Pyrococcus furiosus
超分子 | 名称: Endogeneous RNA Polymerase from Pyrococcus furiosus / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: The sample was monodisperse / 集合状態: Monomeric / Number unique components: 11 |
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分子量 | 実験値: 380 KDa / 理論値: 380 KDa |
-分子 #1: DNA directed RNA polymerase
分子 | 名称: DNA directed RNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: RNA polymerase / 集合状態: Monomer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 実験値: 380 KDa / 理論値: 380 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7 詳細: 10 mM HEPES (pH 7.0), 150 mM KCl, 2.5 mM MgCl2, 5 mM DTT |
グリッド | 詳細: Quantifoil R3/3 w. 2nm Carbon on top |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot / 手法: Blot for 10 seconds |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F30 |
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温度 | 平均: 80 K |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: OTHER / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 23 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 67000 / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 67000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Multi specimen / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
CTF補正 | 詳細: Wiener filtering of defocus group volumes |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 13.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER / 詳細: Final back projection in real space / 使用した粒子像数: 22240 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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詳細 | Fitted using UCSF Chimera |
精密化 | 空間: REAL |