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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-17014 | |||||||||
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タイトル | Consensus map of HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in pre-translocation state | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | DNA / Polymerase / Complex / TRANSFERASE | |||||||||
生物種 | Human alphaherpesvirus 1 strain KOS (ヘルペスウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.41 Å | |||||||||
データ登録者 | Gustavsson E / Grunewald K / Elias P / Hallberg M | |||||||||
資金援助 | スウェーデン, ドイツ, 2件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2024 タイトル: Dynamics of the Herpes simplex virus DNA polymerase holoenzyme during DNA synthesis and proof-reading revealed by Cryo-EM. 著者: Emil Gustavsson / Kay Grünewald / Per Elias / B Martin Hällberg / 要旨: Herpes simplex virus 1 (HSV-1), a double-stranded DNA virus, replicates using seven essential proteins encoded by its genome. Among these, the UL30 DNA polymerase, complexed with the UL42 ...Herpes simplex virus 1 (HSV-1), a double-stranded DNA virus, replicates using seven essential proteins encoded by its genome. Among these, the UL30 DNA polymerase, complexed with the UL42 processivity factor, orchestrates leading and lagging strand replication of the 152 kb viral genome. UL30 polymerase is a prime target for antiviral therapy, and resistance to current drugs can arise in immunocompromised individuals. Using electron cryo-microscopy (cryo-EM), we unveil the dynamic changes of the UL30/UL42 complex with DNA in three distinct states. First, a pre-translocation state with an open fingers domain ready for nucleotide incorporation. Second, a halted elongation state where the fingers close, trapping dATP in the dNTP pocket. Third, a DNA-editing state involving significant conformational changes to allow DNA realignment for exonuclease activity. Additionally, the flexible UL30 C-terminal domain interacts with UL42, forming an extended positively charged surface binding to DNA, thereby enhancing processive synthesis. These findings highlight substantial structural shifts in the polymerase and its DNA interactions during replication, offering insights for future antiviral drug development. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_17014.map.gz | 52.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-17014-v30.xml emd-17014.xml | 16 KB 16 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_17014_fsc.xml | 9.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_17014.png | 67.3 KB | ||
マスクデータ | emd_17014_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-17014.cif.gz | 4.4 KB | ||
その他 | emd_17014_half_map_1.map.gz emd_17014_half_map_2.map.gz | 95.5 MB 95.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17014 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17014 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_17014_validation.pdf.gz | 973.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_17014_full_validation.pdf.gz | 972.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_17014_validation.xml.gz | 18.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_17014_validation.cif.gz | 23.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17014 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-17014 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17014.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.01 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_17014_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_17014_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_17014_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : HSV-1 DNA polymerase-processivity factor in pre-translocation state
全体 | 名称: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor in pre-translocation state |
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要素 |
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-超分子 #1: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor in pre-translocation state
超分子 | 名称: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor in pre-translocation state タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Human alphaherpesvirus 1 strain KOS (ヘルペスウイルス) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.4 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.8 構成要素:
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 58.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 165000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |