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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15139 | |||||||||
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タイトル | Tomogram of a lamellipodium of an ArpC5 knockout B16-F1 mouse melanoma cell | |||||||||
マップデータ | Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse melanoma cell | |||||||||
試料 |
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生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Faessler F / Javoor MG / Datler J / Doering H / Hofer FW / Dimchev G / Hodirnau VV / Rottner K / Schur FKM | |||||||||
資金援助 | オーストリア, 1件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2023 タイトル: ArpC5 isoforms regulate Arp2/3 complex-dependent protrusion through differential Ena/VASP positioning. 著者: Florian Fäßler / Manjunath G Javoor / Julia Datler / Hermann Döring / Florian W Hofer / Georgi Dimchev / Victor-Valentin Hodirnau / Jan Faix / Klemens Rottner / Florian K M Schur / 要旨: Regulation of the Arp2/3 complex is required for productive nucleation of branched actin networks. An emerging aspect of regulation is the incorporation of subunit isoforms into the Arp2/3 complex. ...Regulation of the Arp2/3 complex is required for productive nucleation of branched actin networks. An emerging aspect of regulation is the incorporation of subunit isoforms into the Arp2/3 complex. Specifically, both ArpC5 subunit isoforms, ArpC5 and ArpC5L, have been reported to fine-tune nucleation activity and branch junction stability. We have combined reverse genetics and cellular structural biology to describe how ArpC5 and ArpC5L differentially affect cell migration. Both define the structural stability of ArpC1 in branch junctions and, in turn, by determining protrusion characteristics, affect protein dynamics and actin network ultrastructure. ArpC5 isoforms also affect the positioning of members of the Ena/Vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) family of actin filament elongators, which mediate ArpC5 isoform-specific effects on the actin assembly level. Our results suggest that ArpC5 and Ena/VASP proteins are part of a signaling pathway enhancing cell migration. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15139.map.gz | 260.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-15139-v30.xml emd-15139.xml | 11.9 KB 11.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_15139.png | 246.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15139 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15139 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_15139_validation.pdf.gz | 455.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_15139_full_validation.pdf.gz | 455 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_15139_validation.xml.gz | 4.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_15139_validation.cif.gz | 4.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15139 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15139 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15139.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 281.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse melanoma cell | ||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 13.544 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse mela...
全体 | 名称: Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse melanoma cell |
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要素 |
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-超分子 #1: Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse mela...
超分子 | 名称: Tomogram of a lamellipodium of a ArpC5 knockout B16-F1 mouse melanoma cell タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) / 株: B16-F1 / 組織: Melanoma |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.2 構成要素:
詳細: Adjust to pH 6.2 using NaOH Immediately prior to use, add Phalloidin to a final concentration of 1ug/ml | ||||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR 詳細: After glow discharging of the grid and prior to the seeding of cells, the grid was coated using 25ug/ml Laminin for 60min | ||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: LEICA EM GP | ||||||||||||||
切片作成 | その他: NO SECTIONING |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 61 / 平均電子線量: 2.79 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode with 8 frames per tilt |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 53000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | アルゴリズム: BACK PROJECTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0.8) / 使用した粒子像数: 59 |
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