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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14031 | |||||||||
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タイトル | Structure of the EIAV CA-SP hexamer (C6), acquired on a Krios 4, Selectris/Falcon4, processed with Relion/M | |||||||||
マップデータ | EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, sharpened and denoised map | |||||||||
試料 |
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キーワード | Retrovirus / Equine infectious anemia virus / capsid protein / VIRAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 viral budding via host ESCRT complex / viral nucleocapsid / structural constituent of virion / nucleic acid binding / zinc ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Equine infectious anemia virus (ウマ伝染性貧血ウイルス) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Obr M / Hagen WJH / Dick RA / Yu L / Kotecha A / Schur FKM | |||||||||
資金援助 | オーストリア, 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2022 タイトル: Exploring high-resolution cryo-ET and subtomogram averaging capabilities of contemporary DEDs. 著者: Martin Obr / Wim J H Hagen / Robert A Dick / Lingbo Yu / Abhay Kotecha / Florian K M Schur / 要旨: The potential of energy filtering and direct electron detection for cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been well documented. Here, we assess the performance of recently introduced hardware for ...The potential of energy filtering and direct electron detection for cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been well documented. Here, we assess the performance of recently introduced hardware for cryo-electron tomography (cryo-ET) and subtomogram averaging (STA), an increasingly popular structural determination method for complex 3D specimens. We acquired cryo-ET datasets of EIAV virus-like particles (VLPs) on two contemporary cryo-EM systems equipped with different energy filters and direct electron detectors (DED), specifically a Krios G4, equipped with a cold field emission gun (CFEG), Thermo Fisher Scientific Selectris X energy filter, and a Falcon 4 DED; and a Krios G3i, with a Schottky field emission gun (XFEG), a Gatan Bioquantum energy filter, and a K3 DED. We performed constrained cross-correlation-based STA on equally sized datasets acquired on the respective systems. The resulting EIAV CA hexamer reconstructions show that both systems perform comparably in the 4-6 Å resolution range based on Fourier-Shell correlation (FSC). In addition, by employing a recently introduced multiparticle refinement approach, we obtained a reconstruction of the EIAV CA hexamer at 2.9 Å. Our results demonstrate the potential of the new generation of energy filters and DEDs for STA, and the effects of using different processing pipelines on their STA outcomes. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14031.map.gz | 139.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-14031-v30.xml emd-14031.xml | 19.7 KB 19.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_14031_fsc.xml | 12 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_14031.png | 153.1 KB | ||
マスクデータ | emd_14031_msk_1.map | 149.9 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-14031.cif.gz | 5.8 KB | ||
その他 | emd_14031_half_map_1.map.gz emd_14031_half_map_2.map.gz | 75.9 MB 75.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14031 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14031 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_14031_validation.pdf.gz | 1007.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_14031_full_validation.pdf.gz | 1006.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_14031_validation.xml.gz | 18.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_14031_validation.cif.gz | 23.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14031 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14031 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10889 (タイトル: Tilt series of EIAV CASPNC VLPs acquired on Krios G4 with Selectris X and Falcon 4 Data size: 461.4 Data #1: Unaligned movies of EIAV VLPs [micrographs - multiframe] Data #2: Tilt series of EIAV VLPs [tilt series]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14031.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 149.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, sharpened and denoised map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.179 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_14031_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, half map 1
ファイル | emd_14031_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, half map 2
ファイル | emd_14031_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | EIAV CA hexamer, C6 symmetrized, half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Equine infectious anemia virus
全体 | 名称: Equine infectious anemia virus (ウマ伝染性貧血ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: Equine infectious anemia virus
超分子 | 名称: Equine infectious anemia virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / NCBI-ID: 11665 / 生物種: Equine infectious anemia virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
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宿主 | 生物種: Equus caballus (ウマ) |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: Immature capsid |
-分子 #1: EIAV CASPNC
分子 | 名称: EIAV CASPNC / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Equine infectious anemia virus (ウマ伝染性貧血ウイルス) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: SPIMIDGAGN RNFRPLTPRG YTTWVNTIQT NGLLNEASQN LFGILSVDCT SEEMNAFLDV V PGQAGQKQ ILLDAIDKIA DDWDNRHPLP NAPLVAPPQG PIPMTARFIR GLGVPRERQM EP AFDQFRQ TYRQWIIEAM SEGIKVMIGK PKAQNIRQGA KEPYPEFVDR ...文字列: SPIMIDGAGN RNFRPLTPRG YTTWVNTIQT NGLLNEASQN LFGILSVDCT SEEMNAFLDV V PGQAGQKQ ILLDAIDKIA DDWDNRHPLP NAPLVAPPQG PIPMTARFIR GLGVPRERQM EP AFDQFRQ TYRQWIIEAM SEGIKVMIGK PKAQNIRQGA KEPYPEFVDR LLSQIKSEGH PQE ISKFLT DTLTIQNANE ECRNAMRHLR PEDTLEEKMY ACRDIGTTKQ KMML LAKAL QTGLAGPFK GGALKGGPLK AAQTCYNCGK PGHLSSQCRA PKVCFKCKQP GHFSKQCRSV P KNGKQGAQ GRPQKQTF |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.2 構成要素:
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グリッド | モデル: C-flat-2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: 3.5 seconds blotting time, using back-side blotting. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルター - スリット幅: 10 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 1.02 sec. / 平均電子線量: 3.5 e/Å2 / 詳細: Images acquired in the EER format |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.25 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.75 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |