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- EMDB-13682: In situ subtomogram average of autophagosome-associated protein f... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-13682
タイトルIn situ subtomogram average of autophagosome-associated protein filament
マップデータAutophagosome-associated protein filament
試料
  • 細胞: Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infected human cells.
キーワードvirus / autophagy / membrane / CYTOSOLIC PROTEIN
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 18.5 Å
データ登録者Dahmane S / Morado DR / Carlson L-A
資金援助 スウェーデン, 3件
OrganizationGrant number
H2020 Marie Curie Actions of the European Commission795892 スウェーデン
Human Frontier Science Program (HFSP)CDA00047/2017-C スウェーデン
Knut and Alice Wallenberg Foundation スウェーデン
引用ジャーナル: Nat Commun / : 2022
タイトル: Membrane-assisted assembly and selective secretory autophagy of enteroviruses.
著者: Selma Dahmane / Adeline Kerviel / Dustin R Morado / Kasturika Shankar / Björn Ahlman / Michael Lazarou / Nihal Altan-Bonnet / Lars-Anders Carlson /
要旨: Enteroviruses are non-enveloped positive-sense RNA viruses that cause diverse diseases in humans. Their rapid multiplication depends on remodeling of cytoplasmic membranes for viral genome ...Enteroviruses are non-enveloped positive-sense RNA viruses that cause diverse diseases in humans. Their rapid multiplication depends on remodeling of cytoplasmic membranes for viral genome replication. It is unknown how virions assemble around these newly synthesized genomes and how they are then loaded into autophagic membranes for release through secretory autophagy. Here, we use cryo-electron tomography of infected cells to show that poliovirus assembles directly on replication membranes. Pharmacological untethering of capsids from membranes abrogates RNA encapsidation. Our data directly visualize a membrane-bound half-capsid as a prominent virion assembly intermediate. Assembly progression past this intermediate depends on the class III phosphatidylinositol 3-kinase VPS34, a key host-cell autophagy factor. On the other hand, the canonical autophagy initiator ULK1 is shown to restrict virion production since its inhibition leads to increased accumulation of virions in vast intracellular arrays, followed by an increased vesicular release at later time points. Finally, we identify multiple layers of selectivity in virus-induced autophagy, with a strong selection for RNA-loaded virions over empty capsids and the segregation of virions from other types of autophagosome contents. These findings provide an integrated structural framework for multiple stages of the poliovirus life cycle.
履歴
登録2021年10月6日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年10月19日-
マップ公開2022年10月19日-
更新2023年12月13日-
現状2023年12月13日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_13682.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Autophagosome-associated protein filament
ボクセルのサイズX=Y=Z: 4.29 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.015
最小 - 最大-0.06239607 - 0.10313908
平均 (標準偏差)-0.00005403114 (±0.0073031676)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-50-50-50
サイズ100100100
Spacing100100100
セルA=B=C: 429.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: unsharpened map

ファイルemd_13682_additional_1.map
注釈unsharpened map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: unmasked half map

ファイルemd_13682_half_map_1.map
注釈unmasked half map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: unmasked half map

ファイルemd_13682_half_map_2.map
注釈unmasked half map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infec...

全体名称: Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infected human cells.
要素
  • 細胞: Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infected human cells.

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超分子 #1: Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infec...

超分子名称: Autophagosome-associated protein filament inside poliovirus-infected human cells.
タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
グリッドモデル: UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE
詳細Cryo-FIB lamellas of HeLa cells grown on EM-grids and infected with poliovirus type 1.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 2.5 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 33000
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 18.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: subTOM / 使用したサブトモグラム数: 141855
抽出トモグラム数: 16 / 使用した粒子像数: 55376
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア: (名称: subTOM, Dynamo)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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