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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1323 | |||||||||
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タイトル | Spontaneous reverse movement of mRNA-bound tRNA through the ribosome. | |||||||||
![]() | none | |||||||||
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生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 16.0 Å | |||||||||
![]() | Konevega AL / Fischer N / Semenkov YP / Stark H / Wintermeyer W / Rodnina MV | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Spontaneous reverse movement of mRNA-bound tRNA through the ribosome. 著者: Andrey L Konevega / Niels Fischer / Yuri P Semenkov / Holger Stark / Wolfgang Wintermeyer / Marina V Rodnina / ![]() 要旨: During the translocation step of protein synthesis, a complex of two transfer RNAs bound to messenger RNA (tRNA-mRNA) moves through the ribosome. The reaction is promoted by an elongation factor, ...During the translocation step of protein synthesis, a complex of two transfer RNAs bound to messenger RNA (tRNA-mRNA) moves through the ribosome. The reaction is promoted by an elongation factor, called EF-G in bacteria, which, powered by GTP hydrolysis, induces an open, unlocked conformation of the ribosome that allows for spontaneous tRNA-mRNA movement. Here we show that, in the absence of EF-G, there is spontaneous backward movement, or retrotranslocation, of two tRNAs bound to mRNA. Retrotranslocation is driven by the gain in affinity when a cognate E-site tRNA moves into the P site, which compensates the affinity loss accompanying the movement of peptidyl-tRNA from the P to the A site. These results lend support to the diffusion model of tRNA movement during translocation. In the cell, tRNA movement is biased in the forward direction by EF-G, which acts as a Brownian ratchet and prevents backward movement. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 7.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 8.2 KB 8.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 55.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 265.1 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 264.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 5.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | none | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : E. Coli 70S-tRNA complex after retrotranslocation 70S-fMetVal-tRN...
全体 | 名称: E. Coli 70S-tRNA complex after retrotranslocation 70S-fMetVal-tRNAVal-tRNAfMEt |
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要素 |
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-超分子 #1000: E. Coli 70S-tRNA complex after retrotranslocation 70S-fMetVal-tRN...
超分子 | 名称: E. Coli 70S-tRNA complex after retrotranslocation 70S-fMetVal-tRNAVal-tRNAfMEt タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 3 |
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-超分子 #1: E. Coli 70S
超分子 | 名称: E. Coli 70S / タイプ: complex / ID: 1 / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: ALL |
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-分子 #1: fMet-Val-tRNAVal
分子 | 名称: fMet-Val-tRNAVal / タイプ: rna / ID: 1 / 分類: TRANSFER / Structure: OTHER / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #2: tRNAfMet
分子 | 名称: tRNAfMet / タイプ: rna / ID: 2 / 分類: TRANSFER / Structure: OTHER / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 50 mM Tris-HCl, 70 mM NH4Cl, 30 mM KCl, 7 mM MgCl2, 0.6 mM spermine, 0.4 mM spermidine. |
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グリッド | 詳細: 200 mesh copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: Costume-made / 手法: Manual blotting |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GENERIC TVIPS (4k x 4k) 平均電子線量: 19 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 166000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
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画像解析
詳細 | Particles selected using an automatic selection program. |
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CTF補正 | 詳細: local |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 16.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Imagic / 使用した粒子像数: 5001 |