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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12091 | |||||||||
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タイトル | Staphylococcus aureus 30S ribosomal subunit in absence of spermidine with reoriented helix 44 | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex ...ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Staphylococcus aureus subsp. aureus NCTC 8325 (黄色ブドウ球菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.76 Å | |||||||||
データ登録者 | Belinite M / Khusainov I / Marzi S / Romby P / Yusupov M / Hashem Y | |||||||||
資金援助 | フランス, 2件
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引用 | ジャーナル: Front Mol Biosci / 年: 2021 タイトル: Stabilization of Ribosomal RNA of the Small Subunit by Spermidine in . 著者: Margarita Belinite / Iskander Khusainov / Heddy Soufari / Stefano Marzi / Pascale Romby / Marat Yusupov / Yaser Hashem / 要旨: Cryo-electron microscopy is now used as a method of choice in structural biology for studying protein synthesis, a process mediated by the ribosome machinery. In order to achieve high-resolution ...Cryo-electron microscopy is now used as a method of choice in structural biology for studying protein synthesis, a process mediated by the ribosome machinery. In order to achieve high-resolution structures using this approach, one needs to obtain homogeneous and stable samples, which requires optimization of ribosome purification in a species-dependent manner. This is especially critical for the bacterial small ribosomal subunit that tends to be unstable in the absence of ligands. Here, we report a protocol for purification of stable 30 S from the Gram-positive bacterium and its cryo-EM structures: in presence of spermidine at a resolution ranging between 3.4 and 3.6 Å and in its absence at 5.3 Å. Using biochemical characterization and cryo-EM, we demonstrate the importance of spermidine for stabilization of the 30 S preserving favorable conformation of the helix 44. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12091.map.gz | 618.4 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12091-v30.xml emd-12091.xml | 8.2 KB 8.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_12091.png | 60.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12091 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12091 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12091_validation.pdf.gz | 314.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12091_full_validation.pdf.gz | 314.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12091_validation.xml.gz | 4.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12091_validation.cif.gz | 5.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12091 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12091 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12091.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 931.6 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.96 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Staphylococcus aureus 30S ribosomal subunit in absence of spermid...
全体 | 名称: Staphylococcus aureus 30S ribosomal subunit in absence of spermidine, class 5 |
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要素 |
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-超分子 #1: Staphylococcus aureus 30S ribosomal subunit in absence of spermid...
超分子 | 名称: Staphylococcus aureus 30S ribosomal subunit in absence of spermidine, class 5 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Staphylococcus aureus subsp. aureus NCTC 8325 (黄色ブドウ球菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 平均電子線量: 3.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: Gctf (ver. 1.06) |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 13.76 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 215450 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |