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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1118 | |||||||||
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タイトル | Structural polymorphism of the major capsid protein of a double-stranded RNA virus: an amphipathic alpha helix as a molecular switch. | |||||||||
![]() | Three-dimensional density map of IBDV chimeric capsids at 15 A resolution, viewed along 2 fold axis of symmetry. The chimeric IBDV protein is VP2, including 466 amino acid residues,with an N-terminal His tag | |||||||||
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生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 15.0 Å | |||||||||
![]() | Saugar I / Luque D / Ona A / Rodriguez JF / Carrascosa JL / Trus BL / Caston JR | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural polymorphism of the major capsid protein of a double-stranded RNA virus: an amphipathic alpha helix as a molecular switch. 著者: Irene Saugar / Daniel Luque / Ana Oña / José F Rodríguez / José L Carrascosa / Benes L Trus / José R Castón / ![]() 要旨: The infectious bursal disease virus T=13 viral particle is composed of two major proteins, VP2 and VP3. Here, we show that the molecular basis of the conformational flexibility of the major capsid ...The infectious bursal disease virus T=13 viral particle is composed of two major proteins, VP2 and VP3. Here, we show that the molecular basis of the conformational flexibility of the major capsid protein precursor, pVP2, is an amphipatic alpha helix formed by the sequence GFKDIIRAIR. VP2 containing this alpha helix is able to assemble into the T=13 capsid only when expressed as a chimeric protein with an N-terminal His tag. An amphiphilic alpha helix, which acts as a conformational switch, is thus responsible for the inherent structural polymorphism of VP2. The His tag mimics the VP3 C-terminal region closely and acts as a molecular triggering factor. Using cryo-electron microscopy difference imaging, both polypeptide elements were detected on the capsid inner surface. We propose that electrostatic interactions between these two morphogenic elements are transmitted to VP2 to acquire the competent conformations for capsid assembly. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 4.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 9.4 KB 9.4 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 11.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 282.1 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 281.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 5.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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マップ
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注釈 | Three-dimensional density map of IBDV chimeric capsids at 15 A resolution, viewed along 2 fold axis of symmetry. The chimeric IBDV protein is VP2, including 466 amino acid residues,with an N-terminal His tag | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : chimeric Infectious Bursal Disease Virus capsid
全体 | 名称: chimeric Infectious Bursal Disease Virus capsid |
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要素 |
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-超分子 #1000: chimeric Infectious Bursal Disease Virus capsid
超分子 | 名称: chimeric Infectious Bursal Disease Virus capsid / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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-超分子 #1: Infectious bursal disease virus
超分子 | 名称: Infectious bursal disease virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: HT-VP2-466 / NCBI-ID: 10995 / 生物種: Infectious bursal disease virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: HT-VP2-466 |
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宿主 | 生物種: ![]() ![]() |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: HT-VP2-466 single layered capsid / 直径: 700 Å / T番号(三角分割数): 13 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6.2 / 詳細: PIPES 25 mM, 150 mM NaCl, 20 mM CaCl2 |
グリッド | 詳細: Holey carbon film on copper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内温度: 111 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: manual / 手法: double blotting |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 20 |
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温度 | 平均: 98 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 150,000 times |
詳細 | TEM Tecnai G2 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 82 / 平均電子線量: 9 e/Å2 / 詳細: original images were binned 3X / Od range: 1 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 49700 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.26 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
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画像解析
CTF補正 | 詳細: Each particle |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 15.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: emPFT / 使用した粒子像数: 1557 |