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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1100 | |||||||||
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タイトル | Structural insights into the assembly of the type III secretion needle complex. | |||||||||
![]() | none | |||||||||
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生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 17.0 Å | |||||||||
![]() | Marlovits TC / Kubori T / Sukhan A / Thomas DR / Galan JE / Unger VM | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural insights into the assembly of the type III secretion needle complex. 著者: Thomas C Marlovits / Tomoko Kubori / Anand Sukhan / Dennis R Thomas / Jorge E Galán / Vinzenz M Unger / ![]() 要旨: Type III secretion systems (TTSSs) mediate translocation of virulence factors into host cells. We report the 17-angstrom resolution structures of a central component of Salmonella typhimurium TTSS, ...Type III secretion systems (TTSSs) mediate translocation of virulence factors into host cells. We report the 17-angstrom resolution structures of a central component of Salmonella typhimurium TTSS, the needle complex, and its assembly precursor, the bacterial envelope-anchored base. Both the base and the fully assembled needle complex adopted multiple oligomeric states in vivo, and needle assembly was accompanied by recruitment of the protein PrgJ as a structural component of the base. Moreover, conformational changes during needle assembly created scaffolds for anchoring both PrgJ and the needle substructure and may provide the basis for substrate-specificity switching during type III secretion. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 24.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 10.9 KB 10.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 9.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | none | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Needle Complex of the Type III Secretion from Salmonella typhimurium
全体 | 名称: Needle Complex of the Type III Secretion from Salmonella typhimurium |
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要素 |
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-超分子 #1000: Needle Complex of the Type III Secretion from Salmonella typhimurium
超分子 | 名称: Needle Complex of the Type III Secretion from Salmonella typhimurium タイプ: sample / ID: 1000 詳細: theoretical molecular weight for the base (without the needle filament and the inner rod) is approximately 2.7MDa 集合状態: 20 / Number unique components: 5 |
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-分子 #1: PrgH
分子 | 名称: PrgH / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #2: PrgK
分子 | 名称: PrgK / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Salmonella tyhpimurium |
分子量 | 実験値: 28 MDa |
-分子 #3: InvG
分子 | 名称: InvG / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 実験値: 60 MDa |
-分子 #4: PrgJ
分子 | 名称: PrgJ / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 実験値: 10 MDa |
-分子 #5: PRGI
分子 | 名称: PRGI / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Salmonella tyhpimurium |
分子量 | 実験値: 8 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 10mM Tris-HCl 500mM NaCl 0.2% LDAO |
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グリッド | 詳細: 400 mesh Cu/Rh grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 詳細: Vitrification carried out in the cold room / 手法: Blot for 15 seconds before plunging |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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温度 | 平均: 95 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: 220,000 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 79 / 平均電子線量: 10 e/Å2 / Od range: 0.8 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.7 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.3 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | The particles were selected interactively at the computer terminal. |
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CTF補正 | 詳細: phase flipping, each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C20 (20回回転対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 17.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: SPIDER, IMAGIC, MRC / 詳細: supervised projection matching procedure / 使用した粒子像数: 1391 |