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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10781 | |||||||||
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タイトル | In situ cryo-electron tomogram of the Chlamydomonas chloroplast (Volta phase plate, bin4) | |||||||||
マップデータ | In situ cryo-electron tomogram of the Chlamydomonas chloroplast (Volta phase plate, bin4) | |||||||||
試料 |
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生物種 | Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Schaffer M / Wietrzynski W / Tegunov D / Albert S / Plitzko J / Baumeister W / Engel BD | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Charting the native architecture of thylakoid membranes with single-molecule precision. 著者: Wojciech Wietrzynski / Miroslava Schaffer / Dimitry Tegunov / Sahradha Albert / Atsuko Kanazawa / Jürgen M Plitzko / Wolfgang Baumeister / Benjamin D Engel / 要旨: Thylakoid membranes scaffold an assortment of large protein complexes that work together to harness the energy of light. It has been a longstanding challenge to visualize how the intricate thylakoid ...Thylakoid membranes scaffold an assortment of large protein complexes that work together to harness the energy of light. It has been a longstanding challenge to visualize how the intricate thylakoid network organizes these protein complexes to finely tune the photosynthetic reactions. Previously, we used in situ cryo-electron tomography to reveal the native architecture of thylakoid membranes (Engel et al., 2015). Here, we leverage technical advances to resolve the individual protein complexes within these membranes. Combined with a new method to visualize membrane surface topology, we map the molecular landscapes of thylakoid membranes inside green algae cells. Our tomograms provide insights into the molecular forces that drive thylakoid stacking and reveal that photosystems I and II are strictly segregated at the borders between appressed and non-appressed membrane domains. This new approach to charting thylakoid topology lays the foundation for dissecting photosynthetic regulation at the level of single protein complexes within the cell. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10781.map.gz | 348.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10781-v30.xml emd-10781.xml | 11.5 KB 11.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10781.png | 152.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10781 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10781 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10781_validation.pdf.gz | 208.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10781_full_validation.pdf.gz | 207.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10781_validation.xml.gz | 5.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10781 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10781 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10781.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 762.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED INTEGER (2 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | In situ cryo-electron tomogram of the Chlamydomonas chloroplast (Volta phase plate, bin4) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 13.68 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Whole Chlamydomonas cells
全体 | 名称: Whole Chlamydomonas cells |
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要素 |
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-超分子 #1: Whole Chlamydomonas cells
超分子 | 名称: Whole Chlamydomonas cells / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Grown suspended in TAP media, with normal atmosphere aeration and constant light |
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由来(天然) | 生物種: Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) 株: mat3-4 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 / 詳細: TAP media |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blotted from back for 10 seconds before plunging. |
切片作成 | 集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 30 kV / 集束イオンビーム - 電流: 0.03 nA / 集束イオンビーム - 時間: 2000 sec. / 集束イオンビーム - 温度: 95 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 1000 nm / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 120 nm 集束イオンビーム - 詳細: See https://bio-protocol.org/e1575 for detailed procedure.. The value given for _emd_sectioning_focused_ion_beam.instrument is FEI Quanta FIB. This is not in a list ...集束イオンビーム - 詳細: See https://bio-protocol.org/e1575 for detailed procedure.. The value given for _emd_sectioning_focused_ion_beam.instrument is FEI Quanta FIB. This is not in a list of allowed values set(['DB235', 'OTHER']) so OTHER is written into the XML file. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
詳細 | Bidirectional tilt scheme, separated at 0 degrees, Volta Phase Plate |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 実像数: 54 / 平均露光時間: 1.5 sec. / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode at 12 frames per second |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 42000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | アルゴリズム: BACK PROJECTION / ソフトウェア - 名称: IMOD / 使用した粒子像数: 54 |
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CTF補正 | ソフトウェア - 名称: IMOD |