+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10092 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | KimA from Bacillus subtilis in inward-facing, occluded state | |||||||||
マップデータ | None | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | potassium transporter / LeuT fold / symporter / SMALP / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 symporter activity / transmembrane transporter activity / potassium ion transport / membrane / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Bacillus subtilis (枯草菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Tascon I / Sousa JS | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020 タイトル: Structural basis of proton-coupled potassium transport in the KUP family. 著者: Igor Tascón / Joana S Sousa / Robin A Corey / Deryck J Mills / David Griwatz / Nadine Aumüller / Vedrana Mikusevic / Phillip J Stansfeld / Janet Vonck / Inga Hänelt / 要旨: Potassium homeostasis is vital for all organisms, but is challenging in single-celled organisms like bacteria and yeast and immobile organisms like plants that constantly need to adapt to changing ...Potassium homeostasis is vital for all organisms, but is challenging in single-celled organisms like bacteria and yeast and immobile organisms like plants that constantly need to adapt to changing external conditions. KUP transporters facilitate potassium uptake by the co-transport of protons. Here, we uncover the molecular basis for transport in this widely distributed family. We identify the potassium importer KimA from Bacillus subtilis as a member of the KUP family, demonstrate that it functions as a K/H symporter and report a 3.7 Å cryo-EM structure of the KimA homodimer in an inward-occluded, trans-inhibited conformation. By introducing point mutations, we identify key residues for potassium and proton binding, which are conserved among other KUP proteins. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10092.map.gz | 26.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-10092-v30.xml emd-10092.xml | 14.1 KB 14.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10092.png | 181.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-10092.cif.gz | 5.4 KB | ||
その他 | emd_10092_half_map_1.map.gz emd_10092_half_map_2.map.gz | 31.8 MB 31.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10092 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10092 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10092_validation.pdf.gz | 469.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_10092_full_validation.pdf.gz | 468.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10092_validation.xml.gz | 9.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10092 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10092 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10092.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 34.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.077 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-ハーフマップ: KimA half-map1
ファイル | emd_10092_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | KimA half-map1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: KimA half-map2
ファイル | emd_10092_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | KimA half-map2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : KimA
全体 | 名称: KimA |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: KimA
超分子 | 名称: KimA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Bacillus subtilis (枯草菌) |
-分子 #1: APC family permease
分子 | 名称: APC family permease / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Bacillus subtilis (枯草菌) |
分子量 | 理論値: 66.838977 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MYHSIKRFLI GKPLKSQAAG EQKLTKLKAL AMLSSDALSS VAYGTEQILI ILATISAAAF WYSIPIAVGV LILLLALILS YRQIIYAYP QGGGAYIVSK ENLGEKPGLI AGGSLLVDYI LTVAVSISAG TDAITSAFPA LHDYHVPIAI FLVLVIMILN L RGLSESAS ...文字列: MYHSIKRFLI GKPLKSQAAG EQKLTKLKAL AMLSSDALSS VAYGTEQILI ILATISAAAF WYSIPIAVGV LILLLALILS YRQIIYAYP QGGGAYIVSK ENLGEKPGLI AGGSLLVDYI LTVAVSISAG TDAITSAFPA LHDYHVPIAI FLVLVIMILN L RGLSESAS ILAYPVYLFV VALLVLIAVG LFKLMTGQID QPAHHTSLGT PVAGITLFLL LKAFSSGCSA LTGVEAISNA IP AFKNPPA RNAARTLAMM GILLAILFSG ITVLAYGYGT APKPDETVVS QIASETFGRN VFYYVIQGVT SLILVLAANT GFS AFPQLA FNLARDQYMP RMFTVRGDRL GFSNGIIFLG FASIVLIILF GGQTEHLIPL YAVGVFIPFT LSQTGMCMKW IKQK PKGWI GKMLINSCGA LISFMVLSIL FVTKFNVVWP VLIFMPIVVL LFFAIKNHYT AVGEQLRIVD KEPEEIKGTV VIVPV AGVT TVVQKSIHYA KSLSDQVIAV HVSFDREQEK KFEKRWEELN NGVRLVTLHS SYRSLVHPFD KFLETVEAKA KKEQFS VMV LFPQFITKKR WHTILHNQSA FLLRVRLFWK KDIMVATLPY HFKK UniProtKB: Amino acid permease |
-分子 #2: POTASSIUM ION
分子 | 名称: POTASSIUM ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 6 / 式: K |
---|---|
分子量 | 理論値: 39.098 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 1.77 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
---|---|
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C2 (2回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 149724 |
初期 角度割当 | タイプ: OTHER |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |