+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0687 | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Cryo-EM structure of the yeast B*-a1 complex at an average resolution of 3.6 angstrom | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
| ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / splicing factor binding / U4/U6 snRNP / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) ...post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / splicing factor binding / U4/U6 snRNP / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / 7-methylguanosine cap hypermethylation / Prp19 complex / pICln-Sm protein complex / snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / pre-mRNA binding / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / poly(U) RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / spliceosomal complex assembly / DNA replication origin binding / mRNA 5'-splice site recognition / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / protein K63-linked ubiquitination / mRNA 3'-splice site recognition / Dual incision in TC-NER / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / DNA replication initiation / U5 snRNA binding / positive regulation of cell cycle / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / pre-mRNA intronic binding / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / nuclear periphery / positive regulation of RNA splicing / spliceosomal complex / RING-type E3 ubiquitin transferase / mRNA splicing, via spliceosome / ubiquitin-protein transferase activity / metallopeptidase activity / ubiquitin protein ligase activity / DNA repair / GTPase activity / mRNA binding / chromatin binding / chromatin / GTP binding / mitochondrion / DNA binding / RNA binding / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / Baker's yeast (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Wan R / Bai R / Yan C / Lei J / Shi Y | ||||||||||||
資金援助 | 中国, 3件
| ||||||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2019 タイトル: Structures of the Catalytically Activated Yeast Spliceosome Reveal the Mechanism of Branching. 著者: Ruixue Wan / Rui Bai / Chuangye Yan / Jianlin Lei / Yigong Shi / 要旨: Pre-mRNA splicing is executed by the spliceosome. Structural characterization of the catalytically activated complex (B) is pivotal for understanding the branching reaction. In this study, we ...Pre-mRNA splicing is executed by the spliceosome. Structural characterization of the catalytically activated complex (B) is pivotal for understanding the branching reaction. In this study, we assembled the B complexes on two different pre-mRNAs from Saccharomyces cerevisiae and determined the cryo-EM structures of four distinct B complexes at overall resolutions of 2.9-3.8 Å. The duplex between U2 small nuclear RNA (snRNA) and the branch point sequence (BPS) is discretely away from the 5'-splice site (5'SS) in the three B complexes that are devoid of the step I splicing factors Yju2 and Cwc25. Recruitment of Yju2 into the active site brings the U2/BPS duplex into the vicinity of 5'SS, with the BPS nucleophile positioned 4 Å away from the catalytic metal M2. This analysis reveals the functional mechanism of Yju2 and Cwc25 in branching. These structures on different pre-mRNAs reveal substrate-specific conformations of the spliceosome in a major functional state. | ||||||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0687.map.gz | 222.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-0687-v30.xml emd-0687.xml | 49.6 KB 49.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_0687.png | 72.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0687 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0687 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0687_validation.pdf.gz | 532.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_0687_full_validation.pdf.gz | 532.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0687_validation.xml.gz | 7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_0687_validation.cif.gz | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0687 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0687 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0687.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.33 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : catalytically activated spliceosome B*-a1 complex
+超分子 #1: catalytically activated spliceosome B*-a1 complex
+分子 #1: Pre-mRNA-splicing factor 8
+分子 #2: Pre-mRNA-splicing factor SNU114
+分子 #3: Pre-mRNA-splicing factor CWC21
+分子 #4: Pre-mRNA-splicing factor PRP46
+分子 #5: Pre-mRNA-processing protein 45
+分子 #6: Pre-mRNA-splicing factor SLT11
+分子 #7: Pre-mRNA-splicing factor CWC2
+分子 #8: Pre-mRNA-splicing factor CWC15
+分子 #9: Pre-mRNA-splicing factor BUD31
+分子 #10: Pre-mRNA-splicing factor CWC22
+分子 #11: Pre-mRNA-splicing factor CEF1
+分子 #12: Pre-mRNA-splicing factor CLF1
+分子 #13: Pre-mRNA-splicing factor SYF2
+分子 #14: Pre-mRNA-processing factor 17
+分子 #15: Pre-mRNA-splicing factor ISY1
+分子 #20: Pre-mRNA-splicing factor SYF1
+分子 #21: U2 small nuclear ribonucleoprotein B''
+分子 #22: U2 small nuclear ribonucleoprotein A'
+分子 #23: Pre-mRNA-splicing factor SNT309
+分子 #24: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #25: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1
+分子 #26: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #27: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #28: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2
+分子 #29: Small nuclear ribonucleoprotein-associated protein B
+分子 #30: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #31: Pre-mRNA-processing factor 19
+分子 #16: ACT1 pre-mRNA
+分子 #17: U5 snRNA
+分子 #18: U6 snRNA
+分子 #19: U2 snRNA
+分子 #32: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #33: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #34: MAGNESIUM ION
+分子 #35: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.2 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 7.9 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 49.3 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: OTHER / ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |