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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ygh | ||||||
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タイトル | pP1192R-apo open state | ||||||
要素 | DNA topoisomerase 2 | ||||||
キーワード | ISOMERASE / ASFV / PROTEIN BINDING | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sister chromatid segregation / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / DNA binding / ATP binding / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | African swine fever virus pig/Kenya/KEN-50/1950 (ウイルス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.77 Å | ||||||
データ登録者 | Sun, J.Q. / Liu, R.L. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2024 タイトル: Structural basis for difunctional mechanism of m-AMSA against African swine fever virus pP1192R. 著者: Ruili Liu / Junqing Sun / Lian-Feng Li / Yingxian Cheng / Meilin Li / Lifeng Fu / Su Li / Guorui Peng / Yanjin Wang / Sheng Liu / Xiao Qu / Jiaqi Ran / Xiaomei Li / Erqi Pang / Hua-Ji Qiu / ...著者: Ruili Liu / Junqing Sun / Lian-Feng Li / Yingxian Cheng / Meilin Li / Lifeng Fu / Su Li / Guorui Peng / Yanjin Wang / Sheng Liu / Xiao Qu / Jiaqi Ran / Xiaomei Li / Erqi Pang / Hua-Ji Qiu / Yanli Wang / Jianxun Qi / Han Wang / George Fu Gao / 要旨: The African swine fever virus (ASFV) type II topoisomerase (Topo II), pP1192R, is the only known Topo II expressed by mammalian viruses and is essential for ASFV replication in the host cytoplasm. ...The African swine fever virus (ASFV) type II topoisomerase (Topo II), pP1192R, is the only known Topo II expressed by mammalian viruses and is essential for ASFV replication in the host cytoplasm. Herein, we report the structures of pP1192R in various enzymatic stages using both X-ray crystallography and single-particle cryo-electron microscopy. Our data structurally define the pP1192R-modulated DNA topology changes. By presenting the A2+-like metal ion at the pre-cleavage site, the pP1192R-DNA-m-AMSA complex structure provides support for the classical two-metal mechanism in Topo II-mediated DNA cleavage and a better explanation for nucleophile formation. The unique inhibitor selectivity of pP1192R and the difunctional mechanism of pP1192R inhibition by m-AMSA highlight the specificity of viral Topo II in the poison binding site. Altogether, this study provides the information applicable to the development of a pP1192R-targeting anti-ASFV strategy. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8ygh.cif.gz | 320.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8ygh.ent.gz | 250.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8ygh.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8ygh_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8ygh_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8ygh_validation.xml.gz | 49.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8ygh_validation.cif.gz | 73.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/yg/8ygh ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/yg/8ygh | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 135583.609 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) African swine fever virus pig/Kenya/KEN-50/1950 (ウイルス) 遺伝子: BA71V-P1192R (i7R), P1192R / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: A0A0C5B080, DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: pP1192R-apo open state / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: African swine fever virus pig/Kenya/KEN-50/1950 (ウイルス) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 20mM NaCl,150mM Tris-HCl |
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 0.001 mm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 2.77 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 131161 / 対称性のタイプ: POINT |