+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8p5e | |||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | S. cerevisiae nexus-sCMGE after DNA replication initiation | |||||||||||||||
![]() |
| |||||||||||||||
![]() | REPLICATION / Saccharomyces cerevisiae / helicase / CMGE / initiation of DNA replication / DNA / DNA unwinding | |||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() DNA-templated DNA replication maintenance of fidelity / gene conversion / Unwinding of DNA / DNA replication initiation / epsilon DNA polymerase complex / MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / GINS complex ...DNA-templated DNA replication maintenance of fidelity / gene conversion / Unwinding of DNA / DNA replication initiation / epsilon DNA polymerase complex / MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / GINS complex / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / nuclear DNA replication / mitotic DNA replication preinitiation complex assembly / premeiotic DNA replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / mitotic DNA replication / SUMO binding / Activation of the pre-replicative complex / CMG complex / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / single-stranded DNA 3'-5' DNA exonuclease activity / nuclear pre-replicative complex / MCM complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA replication preinitiation complex / Termination of translesion DNA synthesis / replication fork protection complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling / mitotic DNA replication initiation / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic intra-S DNA damage checkpoint signaling / silent mating-type cassette heterochromatin formation / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドデオキシリボヌクレアーゼ / single-stranded DNA helicase activity / nucleotide-excision repair, DNA gap filling / DNA replication proofreading / mitotic sister chromatid cohesion / DNA strand elongation involved in DNA replication / leading strand elongation / DNA unwinding involved in DNA replication / nuclear replication fork / 3'-5' DNA helicase activity / DNA replication origin binding / Dual incision in TC-NER / subtelomeric heterochromatin formation / DNA replication initiation / error-prone translesion synthesis / heterochromatin formation / helicase activity / base-excision repair, gap-filling / replication fork / base-excision repair / DNA-templated DNA replication / double-strand break repair via nonhomologous end joining / double-strand break repair / mitotic cell cycle / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / double-stranded DNA binding / DNA helicase / chromosome, telomeric region / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / cell cycle / nucleotide binding / mRNA binding / DNA damage response / chromatin binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | |||||||||||||||
![]() | Henrikus, S.S. / Willhoft, O. | |||||||||||||||
資金援助 | ![]() ![]()
| |||||||||||||||
![]() | ![]() タイトル: Unwinding of a eukaryotic origin of replication visualized by cryo-EM. 著者: Sarah S Henrikus / Marta H Gross / Oliver Willhoft / Thomas Pühringer / Jacob S Lewis / Allison W McClure / Julia F Greiwe / Giacomo Palm / Andrea Nans / John F X Diffley / Alessandro Costa / ![]() ![]() ![]() 要旨: To prevent detrimental chromosome re-replication, DNA loading of a double hexamer of the minichromosome maintenance (MCM) replicative helicase is temporally separated from DNA unwinding. Upon S-phase ...To prevent detrimental chromosome re-replication, DNA loading of a double hexamer of the minichromosome maintenance (MCM) replicative helicase is temporally separated from DNA unwinding. Upon S-phase transition in yeast, DNA unwinding is achieved in two steps: limited opening of the double helix and topological separation of the two DNA strands. First, Cdc45, GINS and Polε engage MCM to assemble a double CMGE with two partially separated hexamers that nucleate DNA melting. In the second step, triggered by Mcm10, two CMGEs separate completely, eject the lagging-strand template and cross paths. To understand Mcm10 during helicase activation, we used biochemical reconstitution with cryogenic electron microscopy. We found that Mcm10 splits the double CMGE by engaging the N-terminal homo-dimerization face of MCM. To eject the lagging strand, DNA unwinding is started from the N-terminal side of MCM while the hexamer channel becomes too narrow to harbor duplex DNA. | |||||||||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.8 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 1.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 178.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 270.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 17449MC ![]() 8p62C ![]() 8p63C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-DNA replication licensing factor ... , 5種, 5分子 23467
#1: タンパク質 | 分子量: 98911.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM2, YBL023C, YBL0438 / 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 111720.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM3, YEL032W, SYGP-ORF23 / 発現宿主: ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 105138.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM4, CDC54, HCD21, YPR019W, YP9531.13 / 発現宿主: ![]() ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 113110.211 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM6, YGL201C / 発現宿主: ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 95049.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM7, CDC47, YBR202W, YBR1441 / 発現宿主: ![]() ![]() |
-タンパク質 , 2種, 2分子 5E
#4: タンパク質 | 分子量: 86505.734 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: MCM5, CDC46, YLR274W, L9328.1 / 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#11: タンパク質 | 分子量: 75154.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: CDC45, SLD4, YLR103C, L8004.11 / 発現宿主: ![]() ![]() |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 AB
#7: DNA鎖 | 分子量: 5905.973 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
---|---|
#8: DNA鎖 | 分子量: 2084.392 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-DNA replication complex GINS protein ... , 4種, 4分子 CDHI
#9: タンパク質 | 分子量: 25718.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: PSF3, YOL146W / 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#10: タンパク質 | 分子量: 33983.617 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: SLD5, YDR489W / 発現宿主: ![]() ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 24230.576 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: PSF1, YDR013W, PZA208, YD8119.18 / 発現宿主: ![]() ![]() |
#15: タンパク質 | 分子量: 25096.807 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: PSF2, YJL072C, HRF213, J1086 / 発現宿主: ![]() ![]() |
-DNA polymerase epsilon ... , 2種, 2分子 FG
#12: タンパク質 | 分子量: 78425.852 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: DPB2, YPR175W, P9705.7 / 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#13: タンパク質 | 分子量: 255992.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: POL2, DUN2, YNL262W, N0825 / 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: P21951, DNA-directed DNA polymerase, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドデオキシリボヌクレアーゼ |
-非ポリマー , 4種, 16分子 ![](data/chem/img/ATP.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/ADP.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/ADP.gif)
#16: 化合物 | ChemComp-ATP / #17: 化合物 | ChemComp-ZN / #18: 化合物 | #19: 化合物 | |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
由来(天然) |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.6 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1800 nm |
撮影 | 電子線照射量: 1.67 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-
解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.21_5207 / カテゴリ: モデル精密化 |
---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 85107 / 対称性のタイプ: POINT |